4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗

于振海，王玉新，陳有光,鄭玉珍，盧紅

(山東省淡水漁業(yè)研究院，山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點試驗室，山東濟南250013)

?

4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗

于振海，王玉新，陳有光,鄭玉珍，盧紅

(山東省淡水漁業(yè)研究院，山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點試驗室，山東濟南250013)

[摘要]采用半靜水式試驗方法探討了在水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L條件下，敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種魚藥對齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)魚苗的急性毒性。結果顯示：4種藥物中敵百蟲的96h半致死濃度最低，為0.473mg/L；甲醛的96h半致死濃度最高，為37.565mg/L。4種藥物毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。4種藥物的安全濃度分別為敵百蟲0.128mg/L，車輪特寧0.886mg/L，二溴海因1.011mg/L，甲醛7.531mg/L。該結果表明：4種藥物中，敵百蟲和甲醛安全濃度低于常規(guī)用量，在生產(chǎn)中慎用；二溴海因與車輪特寧安全濃度高于常規(guī)用量，可在生產(chǎn)中安全使用。

[關鍵詞]齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)；急性毒性；半致死濃度；安全濃度

齊口裂腹魚(Schizothoraxprenanti)是鯉形目(Cypriniformes)鯉科(Cyprinidae)裂腹魚亞科(Schizothoracinae)裂腹魚屬(Schizothorax)魚類，自然分布于我國長江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及烏江下游等水域,其肉味鮮美,是產(chǎn)區(qū)的名貴魚類,也是我國特有的重要“冷水性經(jīng)濟魚類”[1,2]。

由于齊口裂腹魚具有較高的經(jīng)濟價值，近年來養(yǎng)殖面積逐漸增加。在養(yǎng)殖階段，魚苗容易因細菌、霉菌、寄生蟲等病害侵襲而大批死亡[3]。采用藥物進行病害防治是最直接、最有效和最經(jīng)濟的辦法[4]。有關水產(chǎn)藥物對魚類急性毒性研究表明，魚的種類不同、規(guī)格不同對藥物的安全濃度都存在一定的差異[5]，用藥過程中因對藥物的毒性不明、濃度使用不當而造成魚中毒的情況時有發(fā)生[6]。因此，通過急性毒性試驗確定藥物的安全濃度和毒性等級，以確定合適的藥物及用藥濃度是必要的。本試驗選用常規(guī)的病害防治藥物，通過急性毒性試驗探討試驗藥物對齊口裂腹魚的安全濃度，以期為齊口裂腹魚的病害防治時合理安全用藥提供參考。

1材料與方法

1.1材料：

試驗用魚體長(7.5±1.0)cm，體重(2.0±0.3)g。健康活潑，無病、無傷、無畸形。試驗前在試驗條件下暫養(yǎng)3d，每天投食1次，試驗開始前24h停止投食。

受試藥物有甲醛、車輪特寧、二溴海因和敵百蟲，藥品規(guī)格及生產(chǎn)廠家等詳見表1。

1.2試驗方法

試驗在規(guī)格60cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱內(nèi)進行。試驗時間為2015年4月1日至4月27日，每個周期4 d，試驗用水為養(yǎng)殖場用深井水，水質符合漁業(yè)水質標準( GB11607-89)，水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L。每箱盛水30L，苗10尾，每日測1次水溫、pH、溶解氧。

表1　4種試驗藥物的規(guī)格與成分

采用半靜態(tài)試驗法，參照盧玲等[7]的方法在室內(nèi)進行。試驗期間不投餌，甲醛具有揮發(fā)性，為保證試驗藥液質量濃度，每隔24h 更換1次試驗藥液。試驗開始和結束時，測定試驗容器中受試物濃度。

根據(jù)預試驗結果，在包括使魚全部死亡的最低濃度和96h魚類全部存活的最高濃度之間至少設置5個濃度組，以幾何級數(shù)排布，濃度間隔系數(shù)小于等于2.2[8]。每個試驗濃度組設2個平行，每一系列設1個空白對照。試驗溶液調(diào)節(jié)至相應溫度后，從馴養(yǎng)魚群中隨機取出魚并隨機迅速放入各箱中，每箱放魚苗10尾。同一試驗，試驗用魚在30min內(nèi)分組完畢。

在24、48、72、96h后檢查受試魚狀況，以試驗對象失去活力、對外界刺激無反應為死亡標準[9]。在試驗開始后3h或6h觀察各處理組魚的狀況，并記錄異常行為。

1.3數(shù)據(jù)處理

半致死濃度(LC50)、安全濃度(SC)[10]采用下述公式計算:

(1)

(2)

式中:xm為死亡組最大劑量的對數(shù)；LC50為半致死濃度，mg/L；d為相鄰濃度的對數(shù)差；p為各組的死亡率，%；∑p為各組死亡率之和，%；SC為安全濃度，mg/L；B為48h LC50，mg/L;C為24hLC50，mg/L。

2結果與分析

整個試驗過程中空白對照組沒有出現(xiàn)死魚現(xiàn)象，即死亡率為0。敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種藥物對齊口裂腹魚的毒性試驗結果如表2所示。

2.1敵百蟲對齊口裂腹魚的毒性

敵百蟲中毒后的魚苗對外界刺激反應能力降低，在水中翻滾，游泳時尾部擺動頻率高，魚體有明顯彎曲現(xiàn)象，死前魚體失去平衡，最后死于水底。濃度為0.2mg/L時，96h魚死亡率為0；濃度為0.8mg/L時，24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計算，敵百蟲對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度分別為0.583、0.525mg/L，安全濃度為0.128mg/L(表3)。

2.2車輪特寧對齊口裂腹魚的毒性

由表2可知，齊口裂腹魚在藥物濃度為1.000～1.496mg/L時96h內(nèi)未出現(xiàn)死亡，當濃度為5mg/L時，魚苗開始無明顯不適，后逐漸反應遲鈍，偶有突然竄動，身體失去平衡，約5h出現(xiàn)死亡，24h箱內(nèi)魚苗全部死亡(表2)。經(jīng)計算，車輪特寧對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為3.772、3.477mg/L，安全濃度為0.886mg/L(表3)。

2.3二溴海因對齊口裂腹魚的毒性

齊口裂腹魚放入二溴海因的水箱中后，藥物濃度為10mg/L時，大約10min就出現(xiàn)失去平衡的現(xiàn)象，30min開始出現(xiàn)死亡，死亡前出現(xiàn)浮頭，側翻失去平衡的現(xiàn)象，死亡后魚口張開，腹部略漲。藥物濃度分別為10.0mg/L 、5.6mg/L的2個試驗組的24h死亡率均為100%；濃度分別為1.0mg/L 和1.8ml/L的2個試驗組96h死亡率均為0(表2)。經(jīng)計算，二溴海因對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度均為3.369mg/L，安全濃度為1.011mg/L(表3)。

表2　4種藥物對昆明裂腹魚魚苗的致死率

表3　4種藥物的半致死濃度和安全濃度

2.4甲醛對齊口裂腹魚的毒性

甲醛急性中毒的齊口裂腹魚表現(xiàn)為不安亂竄，浮頭，后身體側翻失去平衡，最后死亡。藥物濃度為10mg/L時，96h魚死亡率為0；濃度為100mg/L時，24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計算，甲醛對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為70.771、50.097mg/L，安全濃度為7.531mg/L(表3)。

3討論

3.14種藥物對齊口裂腹魚的毒性評價

半致死濃度(LC50)用來衡量藥物對試驗魚毒性的大小，其值越小，藥物毒性越大；其值越大，毒性越低[11,12]。以96h LC50為魚類急性毒性分級標準，分為極高毒(<1mg/L)、高毒(1～10mg/L)、中毒(10～100mg/L)和低毒(>100mg/L)4個等級[8]。本試驗中4種藥物對齊口裂腹魚的96h LC50順序依次為甲醛>車輪特寧>二溴海因>敵百蟲，按照藥物對齊口裂腹魚的毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。從本試驗結果看：4種藥物中敵百蟲對齊口裂腹魚是極高毒藥物，二溴海因和車輪特寧是高毒藥物，甲醛是中毒藥物。由表3可知,4種藥物對齊口裂腹魚的半致死濃度基本表現(xiàn)為24h LC50>48h LC50>96h LC50，說明隨時間的延長，4種藥物對試驗魚的毒性效應相應提高。

3.24種藥物對齊口裂腹魚苗的用藥安全

敵百蟲為膽堿酯酶抑制劑，能將膽堿酯酶的活性點磷酸化而抑制其活性，因其在魚體內(nèi)殘留量少、殘留時間短而被廣泛用于防治體外寄生甲殼類、單殖吸蟲及腸內(nèi)寄生的部分蠕蟲，常用劑量為0.2～0.5mg/L[13]。試驗中敵百蟲對齊口裂腹魚的安全濃度為0.128mg/L，低于常用劑量，并且其在毒性分級標準中屬極高毒，因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過程中不宜使用敵百蟲。甲醛具有廣譜性殺滅細菌、寄生蟲、真菌、芽孢和病毒的作用，甲醛已被廣泛應用于水生動物疾病防治，且使用劑量較大，常規(guī)用量為10～30mg/L[14]。試驗中，甲醛的安全濃度為7.531mg/L，低于常規(guī)用量，但其毒性分級屬中毒，因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過程中甲醛要慎用。

二溴海因在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為殺菌型消毒劑，常用劑量為0.3～0.4mg/L ，多種水產(chǎn)動物安全濃度均高于常規(guī)用量，其安全系數(shù)較高，是很好的消毒劑[15]。試驗中二溴海因的安全濃度為1.011mg/L，高于常規(guī)用量，說明二溴海因能夠用于齊口裂腹魚魚苗的病害防治。車輪特寧為阿維菌素水乳劑生產(chǎn)制品，其有效成分為阿維菌素。阿維菌素對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物對錨頭鳋、中華鳋、纖毛蟲、指環(huán)蟲和線蟲等寄生蟲均有著極強的驅殺作用，現(xiàn)已廣泛應用于水產(chǎn)動物體內(nèi)外寄生蟲病的防治[16]。車輪特寧的規(guī)定劑量為0.037～0.045mg/L。本試驗中車輪特寧的安全濃度為0.886mg/L，高于常用劑量，說明車輪特寧能夠用于齊口裂腹魚魚苗疾病的防治。由于阿維菌素對魚類和蝦蟹類毒性較強[17,18]，在病害防止過程中注意合理用藥。

在生產(chǎn)上選用藥物除了考慮藥物的半致死濃度和安全濃度以外，還需對藥物的常用濃度及用藥時間進行綜合考慮。

[參考文獻]

[1]樂佩琦.中國動物志·硬骨魚綱·鯉形目(下)[M].北京：科學出版社，2000：273～390.

[2]丁瑞華.四川魚類志[M].成都：四川科學技術出版社，1994：370～371.

[3]楊州.土池培育暗紋東方鲀苗種技術[J].淡水漁業(yè)，2001，31(2) ： 25～26.

[4]楊先樂，鄭宗林.我國漁藥使用現(xiàn)狀、存在的問題及對策[J].上海水產(chǎn)大學學報，2007，16(4) ： 374～380.

[5]施鋼，陳剛，張健東，等.4種水產(chǎn)藥物對藍點笛鯛幼魚急性毒性試驗[J].南方水產(chǎn)科學，2011，7(3)：50～55.

[6]楊鶯鶯，陳畢生，陳福華，等.5種常用水產(chǎn)藥物對網(wǎng)紋石斑魚的急性毒性試驗[J].上海水產(chǎn)大學學報，2001，10(1)：93～96.

[7]盧玲，宋福.魚類急性毒性試驗[J].生物學通報，2002，37(7) ： 52～53.

[8]國家環(huán)境保護總局.水和廢水監(jiān)測分析方法(第四版)[M].北京：中國環(huán)境科學出版社， 2006：777～781.

[9]周裕華，周文玉，潘桂平，等.4種常用藥物對松江鱸急性毒性試驗[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2012，40(11)：256～257.

[10]周禮敬，詹會祥，吳興兵，等.4 種魚藥對昆明裂腹魚魚苗的急性毒性試驗[J].淡水漁業(yè)，2012，42(4) ： 26～30.

[11]李代金，黃輝，譚德清.6 種常用漁藥對厚頜魴魚苗的急性毒性試驗[J].水生態(tài)學雜志，2009，2(6) ： 25～29.

[12]中國獸醫(yī)協(xié)會.2011年執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試應試指南( 水生動物類) [M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011： 282～301.

[13] 黃志斌，胡紅.新編水產(chǎn)藥物應用表解[M].南京：江蘇科學技術出版社，2004.

[14] 弁洪民，唐黎，王新橋，等.4 種常用漁藥對鰱魚種的急性毒性試驗[J].淡水漁業(yè)，2010，40(5) ： 76～79.

[15] 趙明軍，張洪玉，夏磊，等.常用消毒劑對水產(chǎn)動物的毒性(連載三)[J].中國水產(chǎn)，2011(6)：48～50.

[16] 王松剛，房文紅，周帥，等 水產(chǎn)養(yǎng)殖用阿維菌素水乳劑的特點與應用[J].科學養(yǎng)魚，2012，(12)：90.

[17] Tatjana T，Nevenka K.Abamectin in the aquatic environment[J].Ecotoxicology，2006，15：495～502.

[18] McCracken D I.The potential for avermectins to affect wildlife[J].VetParasitol，1993，48：273～280.

[收稿日期]2015-11-03

[作者簡介]于振海(1983-)，男，碩士，助理研究員，主要從事養(yǎng)殖工程研究，zhenhaiyu-007@163.com。

[中圖分類號]S948

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-1409(2016)09-0038-04

[引著格式]于振海，王玉新，陳有光，等.4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗[J].長江大學學報(自科版) ，2016，13(9)：38～41.