青浦區(qū)288株銅綠假單胞菌耐藥分析

王　芳，唐之儉，王金金

(上海市復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院檢驗科，上海 201700)

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青浦區(qū)288株銅綠假單胞菌耐藥分析

王芳，唐之儉，王金金△

(上海市復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院檢驗科，上海 201700)

摘要:目的了解醫(yī)院銅綠假單胞菌的分布和耐藥情況，為臨床提供參考依據(jù)。方法采用德靈公司的Microscan Walkaway/96Plus微生物鑒定儀對分離的288株銅綠假單胞菌的來源分布、藥物敏感試驗進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果288株銅綠假單胞菌在臨床標(biāo)本中以痰液為主，占82.3%，感染主要發(fā)生在腦外監(jiān)為32.7%，內(nèi)監(jiān)21.6%，其次為神經(jīng)外科14.9%，對銅綠假單胞菌保持較高活性且耐藥率小于30%的抗菌藥物有阿米卡星、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、替卡西林/克拉維酸、妥布霉素、美羅培南。結(jié)論銅綠假單胞菌是醫(yī)院感染的主要致病菌之一，其耐藥機(jī)制復(fù)雜，臨床應(yīng)根據(jù)藥敏試驗合理使用抗菌藥物，以避免產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶而耐藥。

關(guān)鍵詞:銅綠假單胞菌；抗藥性；微生物

銅綠假單胞菌是臨床分離率很高的非發(fā)酵菌，廣泛分布于健康人皮膚、呼吸道、腸道及周圍環(huán)境，并引起免疫力低下患者感染，也是院內(nèi)感染的主要病原菌之一，研究者從各類標(biāo)本中分離出銅綠假單胞菌288例，對其臨床分布及耐藥性進(jìn)行分析，以更好地為臨床和醫(yī)院感染控制提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1菌株來源288株銅綠假單胞菌于2014年1月至2015 年4月收集自復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院。所有菌株均使用美國Microscan Walkaway/96Plus全自動細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行鑒定和藥敏分析。以銅綠假單孢菌ATCC27853、大腸桿菌ATCC25922作為質(zhì)控菌。藥敏判定依據(jù)NCCLS標(biāo)準(zhǔn)。

1.2方法美國西門子Microscan Walkaway/96Plus全自動微生物鑒定儀，西門子NC50革蘭陰性鑒定板系統(tǒng)鑒定細(xì)菌以及MIC值。科瑪嘉公司提供血平板、麥康凱、巧克力平板。生物梅里埃公司提供氧化酶檢測試劑。采用德靈公司的Microscan Walkaway/96Plus微生物鑒定儀對分離的288株銅綠假單胞菌的來源分布、藥物敏感試驗進(jìn)行分析。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理運(yùn)用WHONET5.4軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2結(jié)果

288株銅綠假單胞菌收集自復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院2014年1月至2015 年4月，占全部標(biāo)本檢測總陽性率的13.87%，藥敏結(jié)果見圖1(見《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)、標(biāo)本構(gòu)成比及臨床科室前4位分布見表1～3。

表1　288株銅綠假單胞菌藥敏結(jié)果

表2　288株銅綠假單胞菌的標(biāo)本分布構(gòu)成比

表3　288株銅綠假單胞菌的臨床科室前4位分布

3討論

銅綠假單胞菌是臨床最常見的病原菌之一。近幾年來國內(nèi)外報道呼吸道感染的病原菌主要是革蘭陰性桿菌，其中又以銅綠假單胞菌最為多見，耐藥的銅綠假單胞菌感染常導(dǎo)致嚴(yán)重后果，是臨床治療中的一個難點。

銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制主要有以下幾個方面[1]:(1)染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺環(huán)，使抗菌藥物失活；(2)由OprD2膜蛋白的缺失，使菌體外膜通透性下降，阻礙抗菌藥物進(jìn)入內(nèi)膜靶位；(3)對于不產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，外膜通透性亦無障礙的細(xì)菌可以通過改變PBP的數(shù)量或是降低PBP的親和力而形成耐藥；(4)細(xì)胞外膜主動外排系統(tǒng)的表達(dá)。表1顯示288株銅綠假單胞菌對抗菌藥物活性最好的依次是碳青霉烯類-美羅培南、氨基糖苷類-妥布霉素、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合藥物-替卡西林/克拉維酸。碳青霉烯抗菌藥物對大多數(shù)內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，與青霉素結(jié)合蛋白親和力強(qiáng)，殺菌活性強(qiáng)，但是由于臨床廣泛應(yīng)用導(dǎo)致銅綠假單胞菌對其產(chǎn)生耐藥，機(jī)制包括外膜通道蛋白丟失、外排泵的過度表達(dá)、β-內(nèi)酰胺酶的水解作用、青霉素結(jié)合蛋白構(gòu)象的改變及生物被膜的形成[2]，特別是亞胺培南耐藥率的升高。國家細(xì)菌耐藥監(jiān)測研究組(BRSSG)2001、2002年的統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明國內(nèi)多家醫(yī)院臨床分離的銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率已分別達(dá)13.1%～19.1%[3-4]；本院分離的銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率為27.6%，而且，Aloush等[5]發(fā)現(xiàn)，亞胺培南相對于頭孢拉定、哌拉西林、環(huán)丙沙星，更易誘導(dǎo)耐藥株出現(xiàn),要引起重視，不能盲目用“萬能藥”；氨基糖苷類藥物如阿米卡星、妥布霉素的耐藥率為22.3%、15.5%，阿米卡星AMK對細(xì)菌產(chǎn)生的鈍化酶比較穩(wěn)定，可聯(lián)合用藥用于銅綠假單胞菌感染。但其腎毒性較大，主要用在聯(lián)合治療時使用，臨床較少單獨使用；頭孢菌素中頭孢他啶以24.2%的耐藥率低于其他頭孢菌素，表現(xiàn)出較好的抗菌活性，頭孢吡肟的耐藥率為43.7%,頭孢吡肟FEP敏感度低于頭孢他定CAZ主要原因可能是編碼kpc與pse-1的耐藥基因存在和外排系統(tǒng)mexAB-oprM、mexCD-OprJ的表達(dá)增加共同作用[6]，頭孢他啶CAZ耐藥率低于頭孢噻肟CTX，可能與臨床醫(yī)生近年來用頭孢噻肟較多，所以應(yīng)根據(jù)病原學(xué)的檢測來治療，以減少細(xì)菌的抗菌壓力，在15種抗菌藥物中三代頭孢菌素的耐藥率，呈逐年增長，可能與三代頭孢菌素在本院臨床的廣泛應(yīng)用密切相關(guān)，有必要加強(qiáng)對銅綠假單胞菌耐藥率有計劃的連續(xù)監(jiān)測； 對喹諾酮類耐藥性與廣泛用喹諾酮類有關(guān)，有關(guān)報道指出應(yīng)用喹諾酮類藥物可使銅綠假單胞菌對亞胺培南出現(xiàn)交叉耐藥[7]。對于銅綠假單胞菌嚴(yán)重感染患者，CLSI M100-S17文件建議治療采用大劑量抗假單胞菌抗菌藥物或加酶抑制劑復(fù)合制劑[8]，并推薦與氨基糖苷類或氟喹諾酮類聯(lián)合應(yīng)用[9]。

從本院送檢標(biāo)本中檢出銅綠假單胞菌主要分布于痰液標(biāo)本，這與文獻(xiàn)中提到的銅綠假單胞菌院內(nèi)感染最常見的部位是肺部的描述相符[10]。另外，監(jiān)護(hù)室的檢出率比較高，一是由于他們的送檢率較高，個別陽性為同一患者不同時間送檢分離得到，其次可能與此類患者病情較重，生命體征差，頻繁使用侵入性操作(如器官切開、導(dǎo)管插管等)因素有關(guān)。

為提高療效、減少藥物不良反應(yīng)、減少耐藥菌株的產(chǎn)生、延長抗菌藥物使用壽命和合理使用抗菌藥物，除了微生物室針對送檢樣品出具一份準(zhǔn)確可靠的鑒定及藥敏分析報告，臨床也應(yīng)規(guī)范操作和積極送檢感染標(biāo)本，制定合理的治療方案，對降低細(xì)菌耐藥率、有效控制醫(yī)院感染具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

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(收稿日期：2016-01-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.045

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1257-03

△通訊作者，wangwang_hi@126.com。

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