豬瘟與豬藍(lán)耳病疫苗綜合免疫程序研究

胡元春，呂鳳霞（.新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南新鄉(xiāng)453000；.河南牧翔動(dòng)物藥業(yè)有限公司）

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豬瘟與豬藍(lán)耳病疫苗綜合免疫程序研究

胡元春1，呂鳳霞2
（1.新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南新鄉(xiāng)453000；2.河南牧翔動(dòng)物藥業(yè)有限公司）

摘要：豬瘟（HC）是一種高度接觸性傳染病，呈世界范圍流行，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，該病傳染性強(qiáng)、病死率高，造成的損失極為嚴(yán)重，幾乎是毀滅性的［1-3］。在臨床中，豬瘟疫苗的免疫經(jīng)常受到母源抗體、免疫程序、豬群體質(zhì)及其他疫苗的影響，特別是豬繁殖與呼吸綜合征（即豬藍(lán)耳病，PRRS）、口蹄疫等免疫抑制疾病疫苗的干擾，而豬瘟和豬藍(lán)耳病這兩種疾病的免疫接種時(shí)間相近，研究藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響，從而確定出豬繁殖與呼吸綜合征和豬瘟疫苗的綜合最佳免疫程序顯得尤為重要。

關(guān)鍵詞：豬瘟；藍(lán)耳?。痪C合免疫

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

某豬場(chǎng)未經(jīng)免疫藍(lán)耳苗和豬瘟苗的正常健康仔豬，出生時(shí)間相同或相近。

1.1.2疫苗

豬瘟活疫苗（兔源）〈脾淋苗〉、藍(lán)耳活疫苗R98株。

1.1.3抗體檢測(cè)試劑盒

豬瘟抗體檢測(cè)盒、PRRSV抗體檢測(cè)盒

1.2方法

該試驗(yàn)采用對(duì)不同日齡的仔豬進(jìn)行藍(lán)耳和豬瘟的免疫，通過測(cè)定血清中抗體的水平，繪制抗體水平曲線來反映藍(lán)耳對(duì)豬瘟的影響，從而得出最佳綜合免疫程序。

1.2.1試驗(yàn)分組

Ⅰ組：不免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗。

Ⅱ組：14日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗。

Ⅲ組：21日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗。

Ⅳ組：28日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，35日齡免疫豬瘟疫苗。

Ⅴ組：35日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗。

Ⅵ組：14日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，不免疫豬瘟疫苗。

Ⅶ組：藍(lán)耳病疫苗和豬瘟疫苗均不免疫。

1.2.2試驗(yàn)內(nèi)容

1.2.2.1檢測(cè)藍(lán)耳病疫苗的免疫效果通過對(duì)免疫接種后的豬群采血，在實(shí)驗(yàn)室用ELISA方法檢測(cè)抗體水平，并繪制抗體水平的曲線。

1.2.2.2檢測(cè)藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響通過7組對(duì)比試驗(yàn)，探討藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響，及母源抗體對(duì)藍(lán)耳病活苗免疫抗體的影響，從而確定最佳免疫程序。

1.2.2.3豬瘟和豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作。

表1　不同免疫組CSF疫苗免疫后28 d ELISA抗體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2　結(jié)果

2.1 CSF疫苗免疫后ELISA抗體水平（見表1）

根據(jù)判斷依據(jù)，該試驗(yàn)中陰性平均OD值為0.964，陽(yáng)性平均OD值為0.098，陽(yáng)性阻斷率為89.83%＞50%，故該試驗(yàn)成立，數(shù)據(jù)有效。計(jì)算可得：當(dāng)樣本OD≤0.5784為陽(yáng)性；OD≥0.6748為陰性；兩者之間為可疑。用阻斷率表示抗體水平，表明豬瘟抗體產(chǎn)生最好的組分別為第Ⅲ組、第Ⅳ組、第Ⅴ組，優(yōu)于其他試驗(yàn)組。

2.2 PRRSV抗體水平測(cè)定結(jié)果（見表2）

根據(jù)判斷依據(jù)，當(dāng)S的OD450值≥0.198時(shí)，該樣品為陽(yáng)性；S的OD450值≤0.178時(shí)，該樣品為陰性；兩者之間時(shí)，該樣品為可疑。結(jié)果表明在免疫前豬群中已有藍(lán)耳的隱性感染；Ⅱ組在免疫1 w后就開始產(chǎn)生抗體，但是Ⅲ組在免疫1 w后卻無(wú)相應(yīng)的抗體產(chǎn)生，而在34 d后即55日齡時(shí)卻檢測(cè)到了抗體，這可能與免疫的豬瘟疫苗有關(guān)，說明豬瘟疫苗會(huì)滯后藍(lán)耳苗產(chǎn)生抗體；綜合比較，此時(shí)Ⅱ組產(chǎn)生最高水平的PRRS抗體，而Ⅲ組、Ⅳ組的陽(yáng)性率也比較高。

該試驗(yàn)中，總共對(duì)豬只進(jìn)行了4次采血，均對(duì)Ⅱ組進(jìn)行了隨機(jī)抽樣采血，因此可用Ⅱ組的數(shù)據(jù)來反映藍(lán)耳苗產(chǎn)生抗體的水平及抗體變化曲線，結(jié)果見下圖。隨著時(shí)間的推移，PRRS的抗體水平有增高的趨勢(shì)。說明該P(yáng)RRS活疫苗的保護(hù)率很高。

表2　不同組仔豬PRRS疫苗免疫前后ELISA抗體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

圖　不同日齡Ⅱ組PRRS抗體水平平均值曲線

綜合上述結(jié)果，豬瘟的母源抗體影響藍(lán)耳苗產(chǎn)生抗體，不僅在時(shí)間上使其滯后，而且還影響其抗體水平。依據(jù)該場(chǎng)豬瘟母源抗體的變化水平，可見第Ⅲ組為最好的組合。因此建議最佳免疫時(shí)間為：21日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗，此時(shí)相互間免疫干擾作用最小。

3　討論

目前預(yù)防豬瘟暴發(fā)和流行，關(guān)鍵在于對(duì)豬群進(jìn)行合理的疫苗免疫，特別是對(duì)于隱性感染CSFV和PRRSV的豬場(chǎng)，只有使仔豬體內(nèi)保持足夠的豬瘟抗體才可以避免豬瘟暴發(fā)［4］。而查閱了各種資料后，發(fā)現(xiàn)不同學(xué)者對(duì)豬瘟的首免日齡存在爭(zhēng)議。對(duì)于健康豬群，李儒曙［5］等認(rèn)為，30 d是較佳的豬瘟首免日齡，而蔡葵蒸［6］等則確定，首免日齡為25～30 d。在該試驗(yàn)中，豬瘟的母源抗體在21日齡時(shí)基本消耗殆盡，抗體水平基本為零，此時(shí)為防止豬瘟的感染，應(yīng)立即免疫豬瘟疫苗，才能起到防御的作用。因此建議該豬場(chǎng)應(yīng)在仔豬21日齡左右進(jìn)行豬瘟的首免或者對(duì)母豬進(jìn)行豬瘟的加強(qiáng)免疫以提高仔豬的母源抗體水平。該研究第6組、第7組均未免疫豬瘟疫苗，且由免疫前、21日齡和28日齡豬瘟母源抗體的變化可知，隨著仔豬日齡的增加，母源抗體趨為零。

國(guó)內(nèi)外都曾有過多種疫苗共用對(duì)豬瘟抗體影響的研究。據(jù)杜喜忠［7］等報(bào)道，藍(lán)耳病滅活苗對(duì)豬瘟免疫影響較小，而藍(lán)耳病弱毒苗和豬瘟疫苗同時(shí)免疫影響最大，差異達(dá)到顯著或極顯著水平，藍(lán)耳病弱毒苗和豬瘟疫苗先后間隔7d免疫效果差異不顯著。據(jù)王劍峰［8］等報(bào)道，SF與PRRS同時(shí)免疫則對(duì)SF的抗體水平有明顯影響，這樣的豬群很容易受到SF野毒的攻擊而感染發(fā)病。關(guān)于兩者之間最佳綜合免疫程序未曾有過相關(guān)報(bào)道，所以該試驗(yàn)就此進(jìn)行了分組并測(cè)定血清抗體水平來揭示兩者之間的關(guān)系。該研究結(jié)果表明，仔豬免疫藍(lán)耳苗后確實(shí)影響豬瘟的抗體水平，依據(jù)本場(chǎng)豬瘟母源抗體的變化水平，建議最佳免疫時(shí)間為：21日齡免疫藍(lán)耳病疫苗，28日齡免疫豬瘟疫苗，相互間免疫干擾作用最小。

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［8］王劍峰，楊宗照，谷藝.同時(shí)注射豬瘟和藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬瘟抗體效價(jià)的影響試驗(yàn)［J］.浙江畜牧獸醫(yī)，2007，（1）：33.

收稿日期：（2016-02-15）

中圖分類號(hào)：S858.28

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1004-5090（2016）04-0010-02