家兔血?dú)庵笜?biāo)正常值測定及初步分析

韓麗麗 叢馨 宋德懋

摘要：目的統(tǒng)計(jì)家兔血?dú)庵笜?biāo)正常值，為教學(xué)實(shí)驗(yàn)及研究提供數(shù)據(jù)參考。方法選取健康成年大耳白兔190只，麻醉狀態(tài)下股動(dòng)脈取血，利用血?dú)夥治鰞x測定各項(xiàng)血?dú)庵笜?biāo)，通過頸總動(dòng)脈插管監(jiān)測血壓。結(jié)果pH值：7.28～7.52；二氧化碳分壓（PaCO2）：16.60～36.44mmHg；氧分壓（PaO2）：89.00～99.75mmHg；紅細(xì)胞比容（HCT）：30.90～38.10%；碳酸氫鹽（HCO3-）：7.83～23.51mmol/L；堿剩余（BE）：-16.20～0.90mmol/L。結(jié)論家兔血?dú)庵笜?biāo)正常值與人類相比存在較大差異。

關(guān)鍵詞：家兔；血?dú)庵笜?biāo)；正常值

中圖分類號：Q95-33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號：1672-3791（2016）04（b）-0000-00

Abstract： Objective： To quantify and analyze the normal blood gas indexes in rabbits， and provide references for teaching and research experiments. Methods： 190 Health adult rabbits were chosen and the artery blood was harvested from the femoral artery under anesthesia. The blood gas indexes were measured by use of blood gas analyzer， and the blood pressure was monitored through the common carotid artery. Results： pH： 7.28-7.52； partial pressure of carbon dioxide （PaCO2）： 16.60-36.44mmHg； partial pressure of oxygen （PaO2）： 89.00-99.75mmHg； hematocrit （HCT）： 30.90-38.10%； bicarbonate （HCO3-）： 7.83～23.51mmol/L； base excess （BE）： -16.20-0.90mmol/L. Conclusion： The normal blood gas indexes of rabbit showed great differences compared with that of human.

Keywords： Rabbit； blood gas index； normal value

家兔是生理學(xué)與病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，酸堿平衡紊亂實(shí)驗(yàn)頗為重要，并且普遍使用家兔作為實(shí)驗(yàn)對象。但我們的教材中提供的大多是人的正常血?dú)庵笜?biāo)數(shù)據(jù)，關(guān)于家兔的血?dú)庵笜?biāo)正常參考值報(bào)道較少。在教學(xué)中，經(jīng)常會(huì)有學(xué)生提出疑問——家兔血?dú)庵蹬c人類是否相同？有何差異？為更好的服務(wù)教學(xué)工作，本實(shí)驗(yàn)對近兩個(gè)學(xué)期酸堿平衡紊亂實(shí)驗(yàn)中家兔血?dú)庵笜?biāo)正常值的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了初步統(tǒng)計(jì)分析，旨在為今后的教學(xué)及科研提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

2014年11月至2015年11月期間，選取健康成年大耳白兔190只，雌雄不限，體重2.0 ～3.0kg，普通級，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供。

儀器設(shè)備

采用丹麥雷度米特（RADIOMETER）公司生產(chǎn)的ABL80全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x，原裝試劑包及測試卡，在室溫（18～28℃）下，測定家兔動(dòng)脈血的血?dú)庵笜?biāo)：pH值、二氧化碳分壓（PaCO2）、氧分壓（PaO2）、紅細(xì)胞比容（HCT）、碳酸氫鹽（HCO3-）和堿剩余（BE），剔除實(shí)驗(yàn)中極值。采用成都泰盟公司生產(chǎn)的BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)監(jiān)測血壓。

實(shí)驗(yàn)方法

動(dòng)物手術(shù)

稱重與固定

將家兔稱重后仰臥位放于兔臺(tái)上，采用背位交叉固定法，即先將后肢綁緊于兔臺(tái)底端的金屬框上，然后將兩前肢的固定帶在背部交叉后分別壓住對側(cè)前肢的前臂，并綁緊于兔臺(tái)兩側(cè)的金屬框上，最后將頭部用兔頭固定器固定，適當(dāng)調(diào)整固定器高度，使家兔頸部平直。

備皮與麻醉

將頸部與一側(cè)腹股溝處剪毛備皮。采用局部麻醉方式，每部位用2～3ml 1%普魯卡因作皮下浸潤性注射，邊進(jìn)針邊注藥至整個(gè)手術(shù)區(qū)域均被浸潤。頸部沿頸正中線進(jìn)行麻醉，腹股溝部位沿股動(dòng)脈走行方向進(jìn)行麻醉。

氣管插管

在甲狀軟骨下沿頸正中線作4～6cm皮膚切口，鈍性分離皮下組織，暴露頸部肌肉，分開頸部正中肌群即可看到氣管。在甲狀軟骨下1～2cm處剪一倒“T”型切口，注意，為避免較多出血，橫向切口盡量剪在軟骨環(huán)上，然后將氣管插管沿向心方向插入并固定。

分離血管

本實(shí)驗(yàn)需分離一側(cè)頸總動(dòng)脈及股動(dòng)脈兩處血管。分離頸總動(dòng)脈用于監(jiān)測血壓，翻開氣管一側(cè)肌肉層，將頸總動(dòng)脈從血管神經(jīng)鞘中分離出來，游離出3～4cm，下穿兩根細(xì)線備結(jié)扎固定插管用。分離股動(dòng)脈用于取血，測定血?dú)庵笜?biāo)，沿股動(dòng)脈走行方向作3～4cm長皮膚切口，鈍性分離皮下組織，將股動(dòng)脈同股神經(jīng)及股靜脈分離開，并游離出2～3cm，穿線備用。

肝素化

耳緣靜脈注射0.5%肝素溶液5ml/kg，行全身肝素化抗凝血。

動(dòng)脈插管

先將兩動(dòng)脈插管內(nèi)充滿肝素，然后結(jié)扎動(dòng)脈遠(yuǎn)心端，用動(dòng)脈夾夾閉近心端，用眼科剪在近結(jié)扎線處45°角向心方向剪一小斜口，插入動(dòng)脈插管并結(jié)扎固定。

描記正常血壓曲線

打開BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，描記一段正常的血壓曲線。

股動(dòng)脈取血

用1ml注射器吸取少量肝素，將管壁潤濕后推出，然后將針頭刺入橡皮塞以隔絕空氣。打開三通活塞，松開動(dòng)脈夾，棄去前2～3滴血液后，迅速除掉注射器上的針頭，立即插入三通活塞，取血0.5ml（注意勿進(jìn)入氣泡）。關(guān)閉三通活塞，拔出注射器并立即套上原針頭，轉(zhuǎn)動(dòng)注射器30秒，使血液與肝素混合。

血?dú)庵笜?biāo)測定

將ABL80血?dú)夥治鰞x探針插入血樣中，按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行測定，并打印各項(xiàng)數(shù)據(jù)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗(yàn)，P>0.05呈正態(tài)分布，其95%參考值范圍選用公式x ?± 1.96S表示；P<0.05呈偏態(tài)分布，其95%參考值范圍選用百分位數(shù)法P2.5和P97.5表示。對PaCO2、PaO2與HCT三組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作Pearson直線相關(guān)性分析，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r值并作t檢驗(yàn)，P<0.05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

2.1 各項(xiàng)血?dú)庵笜?biāo)值

對pH值、PaCO2、PaO2、HCT、HCO3-和BE數(shù)據(jù)進(jìn)行Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示：pH值、PaCO2、HCO3-和BE呈正態(tài)分布（P > 0.05），因此其95 %參考值范圍選用公式x ?±1.96S進(jìn)行計(jì)算（表1）；PaO2和HCT呈偏態(tài)分布（P < 0.05），因此其95 %參考值范圍選用百分位數(shù)法P2.5和P97.5 進(jìn)行計(jì)算（表2）。

2.2PaCO2與PaO2的相關(guān)關(guān)系

Pearson直線相關(guān)性分析結(jié)果顯示：PaCO2與PaO2成顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.325，P<0.01）。

討論

本實(shí)驗(yàn)對190只教學(xué)用健康大耳白兔血?dú)庵笜?biāo)正常值進(jìn)行了測定，結(jié)果顯示，家兔的血?dú)庵党齪H值、PaO2與人類較為接近以外，其他指標(biāo)PaCO2、HCT、HCO3-和BE與健康人體血?dú)饩迪啾染蚚1，2]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與已報(bào)道資料的檢測結(jié)果略有差異。如本實(shí)驗(yàn)檢測家兔動(dòng)脈血pH均值7.40，參考范圍7.28～7.52，這與人類動(dòng)脈血正常pH值范圍7.35～7.45相比，雖波動(dòng)范圍較大，但差異不大。國內(nèi)研究報(bào)道家兔動(dòng)脈血pH均值由7.37～7.53不等[3-8]，國外所報(bào)道的家兔或?qū)嶒?yàn)兔動(dòng)脈血pH均值位于7.33-7.50之間[9-14]。而本實(shí)驗(yàn)中PaO2數(shù)值與本校前期報(bào)道結(jié)果基本一致[3]，但均高于國內(nèi)其他已報(bào)道PaO2的研究結(jié)果。

我們認(rèn)為造成以上差異的可能原因有：家兔品系不同，飼養(yǎng)條件不一，測定儀器各異，地區(qū)差異等，另外，國外有文獻(xiàn)報(bào)道，是否麻醉及采用不同麻藥種類也會(huì)對家兔血?dú)庵翟斐捎绊慬11，14]。麻醉藥如烏拉坦，普魯卡因等會(huì)在不同程度上對家兔呼吸產(chǎn)生抑制作用，再加上家兔屬草食性動(dòng)物，消化管較長，容易壓迫隔膜導(dǎo)致肺不張，所以，為避免家兔在麻醉后與插管前這段時(shí)間內(nèi)由于呼吸抑制出現(xiàn)短暫高碳酸血癥，我們建議待氣管插管后5～10min再進(jìn)行動(dòng)脈取血，另外，氣管橫向切口盡量剪在軟骨環(huán)，也是避免出血較多灌入氣管造成家兔呼吸不暢的有效方法。此外，實(shí)驗(yàn)未考慮測定溫度、時(shí)間等因素的影響，實(shí)驗(yàn)手術(shù)操作及動(dòng)脈取血在機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中，學(xué)生操作不規(guī)范可能會(huì)對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)造成輕微影響，比如血樣短時(shí)間與空氣接觸或存在少量氣泡等。為使結(jié)果相對準(zhǔn)確，實(shí)驗(yàn)中儀器設(shè)備由專業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)并盡可能擴(kuò)大統(tǒng)計(jì)樣本量。

分析數(shù)據(jù)后，我們還發(fā)現(xiàn)，家兔動(dòng)脈血中PaCO2與PaO2成顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.325，P<0.01）。根據(jù)波爾效應(yīng)，PaCO2升高，可使Hb與O2的親和力下降，促進(jìn)氧氣的釋放。而根據(jù)何爾登效應(yīng)，O2與Hb結(jié)合會(huì)促進(jìn)CO2的釋放。這兩種效應(yīng)從側(cè)面證明了我們的數(shù)據(jù)是可靠的。

綜上所述，我們認(rèn)為本實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)可信，對今后教學(xué)有一定參考價(jià)值。

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