系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清維生素D水平與維生素D抗體及自身抗體關(guān)系的研究

邢桂芝，王志敏，石哲群，佟勝全，房　成，褚金龍

(1.唐山市工人醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 唐山063000；2.河北大學(xué)附屬醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科；3.唐山市康復(fù)醫(yī)療中心)

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系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清維生素D水平與維生素D抗體及自身抗體關(guān)系的研究

邢桂芝1，王志敏2*，石哲群3，佟勝全3，房成1，褚金龍1

(1.唐山市工人醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 唐山063000；2.河北大學(xué)附屬醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科；3.唐山市康復(fù)醫(yī)療中心)

摘要：目的觀察系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者血清25羥基維生素D3(25-OH-D3)水平與疾病活動(dòng)度的相關(guān)性，研究其與維生素D抗體(VD-Ab)及自身抗體的關(guān)系，并探討其臨床意義。方法收集資料完整的90例SLE患者及60例健康志愿者的血清標(biāo)本。應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清25-OH-D3水平，酶聯(lián)免疫(ELISA)法測(cè)定血清VD-Ab水平，免疫斑點(diǎn)法測(cè)定自身抗體。采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果病例組血清25-OH-D3水平為10.29±5.74 ng/ml，對(duì)照組血清25-OH-D3水平為13.72±5.39ng/ml，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。病例組血清VD-Ab水平為792.2±450.7 nmol/L，對(duì)照組為705.3±280.2 nmol/L，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。SLE患者血清25-OH-D3水平與VD-Ab水平無(wú)明顯相關(guān)性(r=-0.120，P>0.05)，與SLEDAI呈負(fù)相關(guān)(r=-0.417，P<0.01)。SLE患者抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽(yáng)性組血清25-OH-D3水平低于陰性組，P<0.05?？筺RNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽(yáng)性組與陰性組血清25-OH-D3水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論SLE患者血清25-OH-D3水平低下，與疾病活動(dòng)度負(fù)相關(guān)。SLE患者血清維生素D水平降低與VD-Ab無(wú)關(guān)，可能與抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體有關(guān)，維生素D在SLE發(fā)病中起重要作用。

關(guān)鍵詞：系統(tǒng)性紅斑狼瘡；25-羥-維生素D3；維生素D抗體；自身抗體

(ChinJLabDiagn,2016,20:0592)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種多臟器功能損害的自身免疫性疾病，以血清中出現(xiàn)多種自身抗體為特征。研究發(fā)現(xiàn)，維生素D與SLE疾病活動(dòng)相關(guān)，它可能是一種免疫調(diào)節(jié)劑[1-2]。維生素D參與T淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等的增殖與分化，以及抑制細(xì)胞因子、抗體的產(chǎn)生[3]。維生素D的缺乏可能與維生素D抗體(VD-Ab)有關(guān)[4]，然而，該結(jié)論尚有爭(zhēng)議。本文旨在觀察SLE患者體內(nèi)25羥基維生素D3(25-OH-D3)及VD-Ab的水平及兩者的相關(guān)性，研究25-OH-D3水平與自身抗體的關(guān)系，并探討維生素D在SLE發(fā)病中的可能作用。

1資料與方法

1.1臨床資料收集2013年11月-2015年3月在唐山市工人醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院，資料完整的SLE患者為病例組。SLE患者共90例，其中女79例，男11例，年齡(37±13)歲；入選患者具備以下條件：(1)均符合1997年ACR制定的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)或2009年ACR修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。(2)初發(fā)或未服用過鈣劑、維生素D及維生素D類似物。(3)未合并其他自身免疫性疾病及甲狀腺功能亢進(jìn)等影響體內(nèi)維生素D代謝的疾病。以60例健康志愿者為對(duì)照組，其中女53例，男7例，年齡(35±10)歲。病例組和對(duì)照組的年齡及性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。

1.2實(shí)驗(yàn)方法研究對(duì)象均于次日晨起留取空腹靜脈血3 ml，靜止30 min后以3 000 r/min離心5 min，再取上清液-80℃保存。25-OH-D3水平由北京大學(xué)第三醫(yī)院化驗(yàn)室采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。使用北京誠(chéng)林生物科技有限公司進(jìn)口分裝的人維生素D抗體ELISA試劑盒(批號(hào)LOT201410)測(cè)定VD-Ab水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書。自身抗體由唐山工人醫(yī)院應(yīng)用免疫斑點(diǎn)法測(cè)定。

2結(jié)果

2.1病例組和對(duì)照組血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比較見表1。

表1　兩組血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05

2.2SLE患者血清25-OH-D3水平與VD-Ab水平無(wú)明顯相關(guān)，r=-0.120，P>0.05。

2.3SLE患者血清25-OH-D3水平與疾病活動(dòng)度的相關(guān)性根據(jù)SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)積分表(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)對(duì)SLE患者進(jìn)行評(píng)分，SLE患者血清25-OH-D3水平與SLEDAI呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.417，P<0.01。

2.4SLE患者血清25-OH-D3水平與自身抗體的關(guān)系根據(jù)自身抗體陰性或陽(yáng)性分為兩組，分別比較兩組間血清25-OH-D3水平，抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽(yáng)性組與陰性組25-OH-D3水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；抗nRNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽(yáng)性組與陰性組25-OH-D3水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05(表2)。

表2SLE患者血清25-OH-D3水平與自身抗體的關(guān)系

自身抗體結(jié)果n25-OH-D3(ng/ml)t/zP抗dsDNA抗體+388.3±4.2-3.4120.003-5211.7±5.8抗nRNP抗體+289.0(5.8-13.0)-0.2350.814-629.2(5.2-13.6)

3討論

流行病學(xué)調(diào)查顯示，維生素D的缺乏與許多慢性病，如自身免疫性疾病、癌癥、心血管疾病、糖尿病、感染性疾病等，有著密切的關(guān)系[3]。近年，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者體內(nèi)的維生素D水平出現(xiàn)明顯下降[4-5]。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者維生素D水平與SLE疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)。Ritterhouse LL等[6]提出，25-OH-D3與系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床活動(dòng)、抗C1q抗體、抗dsDNA抗體相關(guān)。Munoz L E等[7]提出，SLE患者血清25-OH-D3水平與舒張壓、空腹血糖、膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、BMI、蛋白尿和補(bǔ)體C3相關(guān)。本研究通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，SLE患者血清25-OH-D3水平低于健康對(duì)照組，且維生素D水平與SLEDAI明顯負(fù)相關(guān)，與國(guó)內(nèi)外研究相一致。本實(shí)驗(yàn)將維生素D水平不足定義為25-OH-D3<20 ng/mL，健康對(duì)照組血清25-OH-D3水平也明顯低于參考值，這表明維生素D的缺乏可能是個(gè)普遍性問題。本研究納入SLE患者基本為初發(fā)，且未服用過鈣劑或維生素D類似物等影響體內(nèi)維生素D代謝的藥物，SLE患者維生素D水平降低，考慮其可能與SLE發(fā)病相關(guān)，維生素D可能有免疫調(diào)節(jié)作用。SLE患者體內(nèi)維生素D水平降低，除與年齡、種族、陽(yáng)光暴露、使用防曬霜、吸煙、某些藥物、皮膚色素沉著、飲食攝入和遺傳等相關(guān)外，有學(xué)者提出維生素D降低可能與SLE患者體內(nèi)產(chǎn)生VD-Ab有關(guān)，尤其是抗磷脂抗體綜合征患者體內(nèi)存在 VD-Ab[8]，而本研究并未發(fā)現(xiàn)SLE患者血清VD-Ab水平高于健康對(duì)照組，也未發(fā)現(xiàn)25-OH-D3與VD-Ab的相關(guān)性，與Ganley I G 等[9]研究結(jié)果相一致，SLE患者維生素D水平降低可能與VD-Ab無(wú)關(guān)，而與環(huán)境、免疫等多種因素相關(guān)。

維生素D缺乏可能與SLE患者的免疫異常相關(guān)，因此，有學(xué)者猜測(cè)，維生素D缺乏參與自身抗體的產(chǎn)生[10]。在此之前，已經(jīng)通過體外研究證實(shí)，維生素D阻止B細(xì)胞分化，抑制B細(xì)胞抗體及自身抗體的產(chǎn)生[11]。也有報(bào)道認(rèn)為，維生素D缺乏與凋亡細(xì)胞的清除機(jī)制相關(guān)，從而導(dǎo)致ANA過多的產(chǎn)生[12]。本研究將自身抗體陰性與陽(yáng)性進(jìn)行分組，發(fā)現(xiàn)抗dsDNA陽(yáng)性組血清25-OH-D3水平低于抗dsDNA陰性組，與CC Mok等[13]人研究相一致。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽(yáng)性組血清25-OH-D3水平均低于陰性組?？菇M蛋白抗體與SLE疾病活動(dòng)程度相關(guān)，且對(duì)狼瘡腎臟疾病的特異性高于抗dsDNA抗體[14-15]，這間接反應(yīng)維生素D水平降低可能與狼瘡腎炎相關(guān)?？剐牧字贵w陽(yáng)性組維生素D降低，可能由該抗體消耗維生素D有關(guān)。然而，本研究并未發(fā)現(xiàn)抗nRNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽(yáng)性組與陰性組25-OH-D3水平的差異，有待于進(jìn)一步的研究。

在狼瘡動(dòng)物模型中，補(bǔ)充維生素D可以抑制疾病活動(dòng)。近年來，越來越多的文獻(xiàn)提示SLE患者補(bǔ)充維生素D的重要性，它可能對(duì)SLE起到預(yù)防和治療的作用，維生素D可能成為SLE等自身免疫性疾病的背景用藥。然而，補(bǔ)充維生素D是否可以緩解SLE疾病活動(dòng)度，以及SLE患者如何補(bǔ)充維生素D，仍需要大規(guī)模的研究證實(shí)。

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Study of Relationships between 25-Hydroxyvitamin D3 and both Vitamin D Antibodies and Autoantibodies in Systemic Lupus Erythematosus

XINGGui-zhi,WANGZhi-min,SHIZhe-qun,etal.

(TangshanWorker′sHospital,Tangshan063000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the associations of Serum 25-hydroxyvitamin D3 (25-OH-D3) levels with disease activity inPatients with systemic lupus erythematosus (SLE),study the relationships between 25-OH-D3 and both vitamin D-antibody (VD-Ab) and autoantibodies,and investigate their clinical significance.MethodsTo collect serum samples of 90 cases of SLE patients whose data complete and 60 cases of healthy volunteers.Applicating chemiluminescence to determinate the level of serum 25-OH-D3,the Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) method was employed to detect the level of serum VD-Ab,applicating immune spot to determinate autoantibodies.Data analysis is done with SPSS 13.0 statistical software.ResultsThe average level of serum 25-OH-D3 of patient group was 10.29±5.74 ng/ml,and control group was 13.72±5.39 ng/ml,compare it between them,showed P<0.05,the difference was statistically significant.The serum VD-Ab level in patient group was 792.2±450.7 nmol/L,and the level in control group was 705.3±280.2 nmol/L,it not reach statistical significance,P>0.05.There was no significant relationships between the level of serum 25-OH-D3 and the level of serum VD-Ab(r=-0.120，P>0.05),a negative correlation was found between the levels of 25-OH-D3 and SLEDAI(r=-0.417，P<0.01).The level of serum 25-OH-D3 in SLE patients with anti dsDNA,anti-histone,anticardiolipin antibody positive group was lower than that of the negative group,P<0.05.There was no significant difference between the level of serum 25-OH-D3 of anti-nRNP antibody,anti-Sm antibody,anti-SSA antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti nucleosome antibody,anti-Ribp antibody positive group and that of the negative group,P>0.05.ConclusionThe level of serum vitamin D in SLE patient is low,and it is negatively correlated with disease activity.The low level of serum 25-OH-D3 is not correlated with anti-vitamin D antibody,it may correlated with anti dsDNA antibody,anti-histone antibody and anticardiolipin antibody,vitamin D is important in the pathogenesis of SLE．

Key words:Systemic lupus erythematosus;25-Hydroxyvitamin D3;Vitamin D-Antibody;Autoantibodies

(收稿日期：2015-07-16)

中圖分類號(hào)：R593.241

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

*通訊作者

基金項(xiàng)目：河北省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目(20150956)

文章編號(hào)：1007-4287(2016)04-0592-04