林榮萬 賴圣明 黃中超
中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院檢驗科 廣東廣州 510655
尿蛋白三種檢驗方法比較
林榮萬 賴圣明 黃中超
中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院檢驗科 廣東廣州 510655
目的尿蛋白三種檢驗方法比較。方法選取我院2015年3月連續(xù)5d隨機采集的300例住院病人尿液標本為研究對象,采用干化學(xué)法、加熱乙酸法及基水楊酸法檢測尿液標本,并比較三種檢驗方法的檢查結(jié)果。結(jié)果干化學(xué)法診斷陽性率31.33%高于加熱乙酸法22.33%與磺基水楊酸法陽性率23.33%,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。干化學(xué)法靈敏度95.65%、誤診率12.12%高于加熱乙酸法83.82%、4.31%,特異度87.88%%、漏診率4.35%%低于加熱乙酸法95.69%、16.18%,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論尿蛋白陽性結(jié)果在臨床上具有重要意義,三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣,相輔相成,應(yīng)依據(jù)具體情況選擇定性檢查方法,注意質(zhì)量管理,持續(xù)多次驗證,以降低方法學(xué)造成的誤診率與漏診率,提高結(jié)果準確性。
尿蛋白;干化學(xué)法;加熱乙酸法;磺基水楊酸法
醫(yī)院中最常用的檢驗項目之一即為尿常規(guī)檢查,其可反映身體健康狀況的基本指標,可用于泌尿系統(tǒng)疾病的篩檢[1]。在正常生理狀態(tài)下,分子質(zhì)量<4萬U的低分子蛋白質(zhì)能夠通過濾過膜,但腎小球濾過膜能夠有效阻止分子質(zhì)量>4萬U的蛋白質(zhì)通過,且通過濾過膜的蛋白質(zhì)可被近曲小管重吸收,因此健康成人每日排出的蛋自質(zhì)含量極少(30-130mg),一般不能用常規(guī)定性方法檢測出來[2]。檢測尿蛋白可早期診斷腎臟及有關(guān)疾病引發(fā)的腎損害,是泌尿系統(tǒng)疾病實驗室檢查的重要內(nèi)容,如尿微量白蛋白是臨床應(yīng)用較多的早期糖尿病腎病診斷指標,可提示腎小球早期損害[3];糖尿病中亦有不同程度的尿微量白蛋白,可提示糖尿病腎病[4],因此,定性分析尿蛋白在臨床診斷中具有重要意義。本研究主要探討干化學(xué)法、加熱乙酸法及磺基水楊酸法三種檢驗方法比較。
1.1 標本 收集住院患者送檢的新鮮尿液。
1.2 方法(1)干化學(xué)法。測定尿液pH,調(diào)至pH在5-6之間。檢測時將試帶浸人尿中立即取出,并吸去多余尿液,于1min內(nèi)與標準色板比色。(2)加熱乙酸法。大試管1支,加清晰尿液約5ml或至試管高度2/3處。加熱時斜持試管下端,使用酒精燈加熱尿液上1/3段,煮沸即止。然后將試管輕輕直立,置于黑色背景下,觀察煮沸部分是否有渾濁。加酸后再加熱滴加2 -4滴0.85mmol/L乙酸溶液,煮沸后立即觀察結(jié)果。(3)磺基水楊酸法。留取2 mI離心后上清尿液于小試管中,滴加2滴10%磺柳酸試劑,形成界面,觀察尿液渾濁度變化、有無沉淀生成,并記錄結(jié)果。
1.3 結(jié)果判定標準 無渾濁為陰性(-);輕微渾濁,黑色背景下隱約可見為弱陽性±;呈白色云霧狀渾濁陽性+;呈顆粒狀白色渾濁為陽性++;呈絮片狀渾濁或沉淀為陽性+++;大量絮片狀并有凝塊沉淀為陽性++++。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 選用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS15.0對研究數(shù)據(jù)進行分析和處理,計數(shù)資料采取率(%)表示,組間對比進行x22檢驗,以P<0.05為有顯著性差異和統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 干化學(xué)法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較 干化學(xué)法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 干化學(xué)法、加熱乙酸法、磺基水楊酸法陽性率比較
2.2 磺基水楊酸法(設(shè)為參考方法)、干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗結(jié)果比較 干化學(xué)法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法,特異度、漏診率低于加熱乙酸法,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
表2 磺基水楊酸法(設(shè)為參考方法)、干化學(xué)法、加熱乙酸法檢驗結(jié)果比較
尿液干化學(xué)法是目前臨床上檢測尿蛋白的方法中開展最廣泛方法,,在實驗室尿液檢查占據(jù)重要地位,方法較為方便快捷,且速度快,成本低[5],但影響因素較多;如堿性、分泌物、色素、部分鹽類或含有較多細胞成分時,采用尿液干化學(xué)法檢測可引起假陽性,且因為溴酚藍只與白蛋白結(jié)合,不與黏蛋白、球蛋白等大分子蛋白發(fā)生作用,從而對結(jié)果準確性產(chǎn)生影響;另外,當樣本量較高時,若檢測不及時,易產(chǎn)生絮狀物或沉淀,影響測定結(jié)果,故尿液干化學(xué)法只能作為一種過篩試驗,在臨床檢測中有一定局限[6]。加熱乙酸法是是傳統(tǒng)檢測尿蛋白的經(jīng)典方法,加熱煮沸可使蛋白質(zhì)凝固變性,再加酸使尿液pH下降達蛋白質(zhì)等電點,從而促進變性蛋白質(zhì)的沉淀,并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結(jié)晶,進而避免混濁的干擾,結(jié)果準確,尿蛋白特異性強,干擾因素少,檢出敏感度低于磺基水楊酸法,可作為蛋白質(zhì)定性實驗的確證實驗,但該法操作繁瑣[7]?;腔畻钏岱ň哂胁僮骱啽恪⒖焖?、敏感度高等特點,但干擾因素較多;檢測時易受干擾因素影響,造成假性結(jié)果。
本研究主要探討了尿蛋白三種檢驗方法。干化學(xué)法診斷陽性率高于加熱乙酸法與磺基水楊酸法陽性率,干化學(xué)法靈敏度、誤診率高于加熱乙酸法,特異度、漏診率低于加熱乙酸法,三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣;當尿酸鹽含量較高,尿呈酸性反應(yīng),磺基水楊酸法檢測結(jié)果比實際情況低,易呈假陽性。使用造影劑時,加熱醋酸法、磺基水楊酸法均會假陽性反應(yīng),需選擇干化學(xué)法檢測;若大量使用青霉素,磺基水楊酸法易呈假陽性反應(yīng);當尿呈強堿性時,加熱醋酸法與磺基水楊酸法呈假陰性反應(yīng)[8。當尿蛋自僅為一些特殊蛋白質(zhì)磺基水楊酸法敏感度低。因此,在尿蛋白定性時,應(yīng)綜合分析各種因素,依據(jù)具體情況選擇適宜的方法。王琳[9]等研究三種尿蛋白定性方法的對比評價結(jié)果顯示,干化學(xué)法陽性率最高,為30.8%,且靈敏度較高,但誤診率較高,加熱乙酸法特異度最高,三種方法各有優(yōu)缺點,應(yīng)綜合分析,慎重選擇檢測方法,與本研究結(jié)果相符。
綜上,尿蛋白陽性結(jié)果在臨床上具有重要意義,三種尿蛋白檢驗方法各有優(yōu)劣,相輔相成,檢查時應(yīng)持續(xù)多次驗證,以減少誤診率與漏診率,提高結(jié)果準確性。
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1672-5018(2016)07-257-02