翠云草提取物治療腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制

馮超 袁紅伶 孫志為

摘要：翠云草作為中華民族的傳統(tǒng)藥物，長(zhǎng)期以來(lái)，在傣族地區(qū)常被用于慢性腎炎的治療，其療效一直備受民間肯定，但翠云草的腎保護(hù)作用機(jī)制和有效活性成分尚不清楚。本文根據(jù)翠云草提取物的抗炎與抗氧化的活性，概述其抗腎間質(zhì)纖維化的可能機(jī)制，藥物有效活性成分主要包括穗花杉雙黃酮、甾體皂苷類、γ內(nèi)酯衍生物和萜類化合物，其最具有研究?jī)r(jià)值的可能為穗花杉雙黃酮。

關(guān)鍵詞：翠云草；抗炎；抗氧化；抗腎間質(zhì)纖維化

中圖分類號(hào)：R284文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2016）07-0091-03

翠云草[Selaginella Uncinata（Desv.）Spring]系蕨類卷柏科卷柏屬植物，具有清熱利濕，止咳止血等功效[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明翠云草含有大量雙黃酮類、苯丙素類、甾體類、酚類、有機(jī)酸類和阿魏酸棕櫚酸-16-醇酯等成分，可通過(guò)抗炎、抗病毒、抗氧化、抗血栓及擴(kuò)張血管等多種機(jī)制發(fā)揮療效[2]，運(yùn)用于慢性腎炎，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等多種疾病的治療[1]。翠云草作為中華民族傳統(tǒng)的藥物，長(zhǎng)期在傣族地區(qū)應(yīng)用于慢性腎炎的治療。既往翠云草的使用主要依據(jù)于傣醫(yī)藥的“四塔理論”，但具體的作用機(jī)制尚不清楚。

各種原因?qū)е碌穆阅I臟病最終將進(jìn)展至終末期腎衰竭，以腎小管間質(zhì)纖維化為共同的病理特征，主要表現(xiàn)為間質(zhì)區(qū)域炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，大量細(xì)胞外基質(zhì)的沉積和小管萎縮。大量研究已證實(shí)，腎小管間質(zhì)纖維化是腎固有細(xì)胞和炎癥細(xì)胞介導(dǎo)的氧化應(yīng)激和慢性炎癥反應(yīng)的結(jié)果。這樣，抑制炎癥反應(yīng)和抗氧化將有可能阻止或減輕腎間質(zhì)纖維化程度，延緩慢性腎臟病進(jìn)展。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，翠云草具有顯著的抗炎和抗氧化作用。本文將對(duì)翠云草的抗炎和抗氧化作用機(jī)制及主要有效成分重點(diǎn)闡述，并探討翠云草治療腎小管間質(zhì)纖維化的可能機(jī)制。

1病因病機(jī)

目前已公認(rèn)，慢性炎癥是參與腎小管間質(zhì)纖維化發(fā)生和進(jìn)展的重要機(jī)制。在腎纖維化進(jìn)程中，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞釋放多種炎癥介質(zhì)，可調(diào)控多種氧化酶，如黃嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase，XOD）、脂質(zhì)氧化酶（Lipoxygenase，LOX）及環(huán)氧化酶II（Cyclooxygenase II，COX-2）等，誘發(fā)腎實(shí)質(zhì)內(nèi)的氧化應(yīng)激，導(dǎo)致腎固有細(xì)胞受損，促進(jìn)腎小管間質(zhì)纖維化發(fā)生和進(jìn)展。多個(gè)研究表明，這些氧化酶介導(dǎo)的氧化應(yīng)激被認(rèn)為是參與腎小管間質(zhì)纖維化的重要機(jī)制之一。XOD與LOX是炎癥介質(zhì)產(chǎn)生途徑中的兩種重要氧化酶。XOD能催化黃嘌呤和次黃嘌呤氧化生成尿酸，并產(chǎn)生過(guò)氧化物自由基，誘發(fā)氧化應(yīng)激，從而導(dǎo)致腎臟炎癥的發(fā)生[3]。

2翠云草作用機(jī)制

Hiroki Omori等人研究發(fā)現(xiàn)使用XOD抑制劑能顯著抑制腎間質(zhì)炎癥及因梗阻引起的腎間質(zhì)纖維化[4]。黎利等人經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)翠云草各提取物對(duì)XOD與LOD具有抑制作用，其乙酸乙酯提取物與95%乙醇提取物是抑制XOD和LOX活性的有效部位，經(jīng)構(gòu)效關(guān)系分析，推斷翠云草提取物活性成分的母核應(yīng)為黃酮母核[5]。這表明翠云草提取物通過(guò)抑制XOD與LOX的活性發(fā)揮抗炎作用，有效成分為黃酮類。COX-2是一種催化炎癥介質(zhì)產(chǎn)生的誘導(dǎo)氧化酶，它與炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生密切相關(guān)。選擇性地抑制COX-2的活性能顯著改善腎功能，減少細(xì)胞外基質(zhì)合成，減輕腎小球硬化及間質(zhì)纖維化[6]。孫穎楨等人研究表明：在體外腸癌HT-29細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上，翠云草總黃酮能顯著在mRNA水平上抑制COX-2，且劑量呈依賴性抑制COX-2的表達(dá)[7]。以上表明翠云草提取物具有抑制XOD、LOX及COX-2氧化酶活性的作用，從整體發(fā)揮協(xié)同作用，進(jìn)行多靶點(diǎn)、多途徑地控制炎癥的發(fā)展，緩解腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程，符合中藥治療腎間質(zhì)纖維化的思路。

由于腎組織需要較高的氧耗來(lái)完成水和電解質(zhì)的主動(dòng)運(yùn)輸和重吸收，所以腎小管和腎小球更易受到氧化損傷。在進(jìn)行性腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化過(guò)程中，都伴有活性氧（Reactive oxygen species，ROS）增加和細(xì)胞抗氧化能力的改變。氧化應(yīng)激參與了多種腎臟損傷的發(fā)病，在腎間質(zhì)纖維化的起始和發(fā)展過(guò)程中，都有氧化應(yīng)激的參與[8]。ROS在腎臟缺血缺氧的情況下可通過(guò)多種機(jī)制損傷腎小球及腎臟固有細(xì)胞[9]。慢性腎臟病中ROS的主要來(lái)源是細(xì)胞線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的電子轉(zhuǎn)運(yùn)鏈異常，慢性腎功能不全時(shí)常伴有超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）減少和還原型輔酶II（Nicotinamide adenosine denucleotide hydro-phosphoric acid，NADPH）增加，加重超氧化物產(chǎn)生氧化應(yīng)激，從而增加了因腎功能不全引起的心血管病發(fā)生的概率[10]。SOD是機(jī)體主要的抗氧化酶，可拮抗LOX，其活力的高低可間接反映機(jī)體清除氧自由基（Oxygen free radicals，OFR）的能力。氧化應(yīng)激所產(chǎn)生的OFR可以誘導(dǎo)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)并促進(jìn)其釋放多種促纖維化因子，因此氧化應(yīng)激不僅可以直接導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)的損傷，而且可以加重多種疾病所致的腎間質(zhì)纖維化[11]。OFR減少可抑制炎性細(xì)胞釋放促纖維化細(xì)胞因子，從而減緩腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程。

穗花杉雙黃酮是一種很強(qiáng)的抗氧劑，它可以清除體內(nèi)的OFR如花青素、花色素，并抑制油脂性過(guò)氧化物的溢出，這種阻止氧化的能力是維生素E的10倍以上。Xican Li等人研究表明穗花杉雙黃酮通過(guò)抗氧化機(jī)制保護(hù)DNA中的羥基不受氧化[12]。Ping Xu等人研究發(fā)現(xiàn)穗花杉雙黃酮可通過(guò)調(diào)節(jié)ROS的濃度來(lái)保護(hù)遭輻射的中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞（V79）不受氧化損傷[13]。Jun-Xia Zheng等人從翠云草60%乙醇提取液中分離出4種甾體皂苷，進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其對(duì)缺氧的腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（Pc12）具有保護(hù)作用，這表明翠云草醇提物的甾體皂苷也具有抗氧化作用[14]。Girish C等人在黑腹果蠅實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)翠云草水提物具有神經(jīng)保護(hù)和抗氧化等多重作用[15]。Jun-Xia Zheng等人從翠云草中提取的γ內(nèi)酯衍生物和萜類化合物對(duì)Pc12細(xì)胞缺氧損傷具有保護(hù)作用，明確了翠云草抗氧化的有效活性成分[16]。上述研究表明翠云草提取物可減輕過(guò)量ROS引起的膠原沉積，其抗氧化的有效活性成分主要為穗花杉雙黃酮、甾體皂苷類、γ內(nèi)酯衍生物及萜類化合物，其最具有研究?jī)r(jià)值的為穗花杉雙黃酮。

大量研究已證實(shí)了ROS在炎癥性腎小球腎炎中具有重要作用[17～18]。ROS除產(chǎn)生NO外，還能產(chǎn)生O2-和H2O2[18]。在腎小球腎炎中，各種可溶性的微粒刺激能激活中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞，釋放大量ROS和NO衍生的氧化劑[19]。在患寡免疫復(fù)合物性壞死性血管炎和新月體性腎小球腎炎患者的血循環(huán)中存在抗中性粒細(xì)胞漿抗體（Anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA），可使中性粒細(xì)胞產(chǎn)生大量的O2-[20]。在炎癥性腎小球損傷中激活的中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞可能是氧化劑的重要來(lái)源，因此通過(guò)抗炎與抗氧化途徑來(lái)抗腎間質(zhì)纖維化是比較理想的選擇。

3小結(jié)

綜上，翠云草有可能是通過(guò)抗炎與抗氧化途徑，抑制腎小管間質(zhì)纖維化，起到治療慢性腎炎的作用。筆者前期的研究發(fā)現(xiàn)也支持這一觀點(diǎn)，即翠云草可抑制腎小管擴(kuò)張與減少腎間質(zhì)I型膠原，發(fā)揮腎保護(hù)作用。其中，有效活性成分主要為穗花杉雙黃酮、甾體皂苷類、γ內(nèi)酯衍生物和萜類化合物，尤其是穗花杉雙黃酮。然而，翠云草的抗腎間質(zhì)纖維化分子機(jī)制尚待進(jìn)一步的研究。逆轉(zhuǎn)或終止腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展已成為目前亟待需要解決的問(wèn)題，探索翠云草的有效成分和抗纖維化作用機(jī)制，將可能為慢性腎臟病的治療提供新的治療途徑。參考文獻(xiàn)：

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