二苯乙烯苷對糖尿病大鼠心肌損傷的保護作用

李彩蓉，甘受益，黃紅霞，蔡 飛

（1.湖北科技學院臨床醫(yī)學院內科學教研室；2.咸寧市中心醫(yī)院心內科；3.湖北科技學院糖尿病心腦血管病變湖北省重點實驗室，湖北咸寧 437100）

二苯乙烯苷對糖尿病大鼠心肌損傷的保護作用

李彩蓉1，甘受益2，黃紅霞2，蔡 飛3

（1.湖北科技學院臨床醫(yī)學院內科學教研室；2.咸寧市中心醫(yī)院心內科；3.湖北科技學院糖尿病心腦血管病變湖北省重點實驗室，湖北咸寧 437100）

目的 探討二苯乙烯苷（TSG）對糖尿病大鼠心肌損傷的作用及對沉默信息調節(jié)因子2的哺乳動物同源體1 （SIRT1）和磷酸腺苷活化的蛋白激酶（AMPK）蛋白影響。方法 建立2型糖尿病大鼠模型，分組給藥，16周時處死大鼠，生化法測定血糖、血脂、肝功能及肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）和心肌組織游離脂肪酸（NEFA）；酶聯免疫吸附法測定心肌肌鈣蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、心肌組織脂代謝相關酶脂肪酸跨膜轉運載體蛋白（FATPs）和脂肪酸β氧化酶（FA-β-oxidase）的含量；放射免疫法測定血漿炎癥因子腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）、白細胞介素1β（IL-1β）的含量，Western blot檢測心肌組織中TNF-α、IL-6、IL-1β、SIRT1和AMPK蛋白的表達；并測定左心室膠原含量。結果TSG干預后能減低血脂水平，對血糖和胰島素水平無明顯影響。TSG能減低糖尿病大鼠心肌組織中膠原含量，減少心臟游離脂肪酸含量，增加心肌組織脂代謝相關酶（FATPs和FA-β-oxidase）含量，抑制外周血和心肌組織中炎癥因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）的分泌。TSG能明顯增加糖尿病大鼠心臟SIRT1和pAMPK蛋白表達。結論 TSG對糖尿病大鼠心肌具有保護作用，其機制可能與抑制心肌炎癥因子和改善能量代謝有關。

糖尿病心肌??；二苯乙烯苷；沉默信息調節(jié)因子2的哺乳動物同源體1；磷酸腺苷活化的蛋白激酶；脂肪酸β氧化酶；腫瘤壞死因子

糖尿病心肌?。╠iabetic cardiomyopathy，DCM）是糖尿病患者所特有的心臟病，是糖尿病常見的心血管并發(fā)癥之一［1］。糖尿病心肌病變表現為心肌細胞肥大、心肌間質纖維化、心室擴張及舒張功能障礙，若不積極治療，最終將發(fā)展為充血性心力衰竭［2］。高糖環(huán)境下微血管內皮功能異常、心肌的胰島素信號傳導障礙及心肌代謝紊亂是糖尿病心肌重構和心肌舒張功能障礙致心功能不全的始動環(huán)節(jié)［3］。然而糖尿病心肌病發(fā)病機制尚不明確，亦無理想的臨床藥物治療。2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（2，3，5，4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside，TSG），簡稱二苯乙烯苷，是傳統(tǒng)中藥寥科植物何首烏中提取的一種水溶性有效成分，具有降血脂、抗炎癥、抗衰老、免疫調節(jié)和心血管活性等功能［4］。本實驗采用高脂飲食和鏈脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病模型，探討TSG干預后對糖尿病大鼠心臟損傷的保護作用，以及SIRT1和AMPK蛋白在其中的作用。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 血糖測定儀（ONE TOUCH Ultra穩(wěn)豪系列，LifeScanInc，美國）；全自動酶標儀（MUL-TISKAN MK3，Thermo產品，美國）；紫外分光光度計（AGILENT 8453，Agilent Techologies，德國）；pH計（Mettler Toledo公司）；全自動發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)（Syngene）。二苯乙烯苷（北京中國藥品生物制品鑒定所，純度98％）；鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ；Sigma）；游離脂肪酸（nonesterified fatty acids，NEFA；南京建成生物工程研究所）；脂肪酸跨膜轉運載體蛋白（FATPs）和脂肪酸β氧化酶（FA-β-oxidase）酶聯免疫吸附測定試劑盒（加拿大Groudwork Biotech-nology Diagnosticate Ltd）；肌酸激酶（creatine kinase，CK）和乳酸脫氫酶（serum lactate dehydrogenase，LDH）試劑盒（上?？迫A公司）；心肌肌鈣蛋白I（car-diac troponin I，cTnI）酶聯免疫吸附測定試劑盒（武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司）；腫瘤壞死因子-α （tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、白介素-6（in-terleukin-6，IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein ki-nase，AMPK）、SIRT1（silent mating type information regulation 2 homolog 1）和β-actin抗體（Santa Cruz， USA）。

1.2 動物分組及給藥 清潔級♂Wister大鼠（200 ±20）g，由湖北省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（鄂）2014-0007。大鼠適應性喂養(yǎng)1周后，分為正常對照組和糖尿病模型組，正常對照組予以基礎飼料喂養(yǎng)，糖尿病模型組參照文獻［5］建模：大鼠喂高脂飲食誘導大鼠胰島素抵抗，6周后STZ腹腔注射（30 mg·kg－1溶于0.1 mol·L－1的枸櫞酸鈉緩沖液，pH 4.4）破壞大鼠部分胰島β功能。72 h后測血糖≥11.1 mmol·L－1的大鼠即為2型糖尿病大鼠（共34只）。造模成功后取血糖較高的30只隨機分為3組：糖尿病模型組（10只），糖尿病模型組＋TSG小劑量（腹腔注射，10 mg·kg－1）干預組（10只），糖尿病模型組＋TSG大劑量（腹腔注射20 mg·kg－1）干預組（10只），繼續(xù)給予高脂飲食，所有動物繼續(xù)喂養(yǎng)8周后處死大鼠。

1.3 血清生化指標、肌鈣蛋白含量及心肌組織游離脂肪酸 給藥結束后，大鼠進食12 h，頸動脈取血（肝素化），自動生化分析儀測定血清空腹血糖（fast-ing bloodglucose，BFS）、甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、谷草轉氨酶（glu-tamic oxalacetictraninase，AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、肌酸激酶和乳酸脫氫酶的含量。留取各組大鼠同部位心臟組織，采用預冷生理鹽水充分洗凈，勻漿，3 500 r·min－1，離心10 min后，留取上清，生化測定心肌組織游離脂肪酸含量。酶聯免疫法檢測肌鈣蛋白含量。

1.4 左心室膠原含量測定 取各組大鼠同部位左心室0.1 g組織，依據膠原中羥脯氨酸含量13.4％比例，膠原（collgen）含量以羥脯氨酸×7.46計算，按照試劑盒說明書測定左心室樣品中羥脯氨酸含量。結果以mg·kg－1組織表示。

1.5 心肌組織脂代謝相關酶的測定 心肌組織以生理鹽水制作勻漿，按照試劑盒說明書，酶聯免疫吸附法（ELISA）測定大鼠心肌組織中FATPs，FA-β-oxidase含量。

1.6 放射免疫法測定血漿炎癥因子和血胰島素頸動脈取血，將3 mL血以3 500 r·min－1離心10 min，取上清－70℃保存，按照試劑盒說明書操作，分別進行放射免疫法測定外周血腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）、白細胞介素1β（IL-1β）的含量。血清胰島素水平采用放射免疫法測定。

1.7 Western blot檢測心肌組織中TNF-α、IL-6、IL-1β、SIRT1和AMPK的表達 從－80℃中取出大鼠左室心尖部心肌，稱取50 mg組織，用預冷的PBS洗組織塊3次，然后進行裂解，置4℃，采用超速離心法分離提取總蛋白，用BCA蛋白定量試劑盒定量。SDS-PAGE分離蛋白后，轉膜到PVDF膜上，封閉、漂洗后加入洗膜后加入一抗（Santa Cruz公司，1∶500稀釋）4℃過夜。再用辣根過氧化酶標記的羊抗小鼠多抗（1∶500稀釋）雜交1 h；洗膜后加ECL（增強化學發(fā)光），然后將硝酸纖維膜放入X線片暗盒，壓片，顯影，定影。免疫印跡條帶IOD值最后用Gel-Pro Analyzer3.1圖像分析系統(tǒng)分析。

2 結果

2.1 糖尿病大鼠心室重塑指標的變化 與正常對照相比，糖尿病模型組大鼠心臟體重明顯降低，心臟指數（cardiac weight index）和左室指數（left ventricu-lar weight index）明顯增高（P＜0.01），TSG干預組也明顯增高（P＜0.05，P＜0.01）。與模型組比較，TSG各劑量干預組大鼠心臟指數和左室指數均明顯降低（P＜0.01），以大劑量干預組明顯。見Tab 1。

2.2 大鼠血糖、血脂和胰島素的變化 與正常對照相比，糖尿病模型組大鼠血糖、膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白及胰島素水平明顯升高（P＜0.01），TSG干預組也明顯增高（P＜0.05，P＜0.01）。與模型組比較，大劑量TSG干預后大鼠血TC和TG明顯降低（P＜0.05）。TSG干預后對大鼠血FBG、HbA1c和FINS無明顯改善。見Tab 2。

2.3 血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶含量、肌鈣蛋白和肝功能的變化 與正常對照組比較，糖尿病大鼠血清中CK、LDH和cTnI含量增加（P＜0.05，P＜0.01）。TSG干預組大鼠血清中CK、LDH和cTnI含量有不同程度的減少，與糖尿病模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義，尤以大劑量干預組效果明顯（P＜0.05）。與正常對照組比較，糖尿病大鼠血清AST與正常對照組比較差異有統(tǒng)計意義（P＜0.05），余各組大鼠血AST和ALT差異無統(tǒng)計學意義。見Tab 3。

2.4 左心室膠原含量的變化 心室收縮和舒張功能障礙與心肌膠原纖維增生密切相關。如Tab 4所示，與正常對照組比較，糖尿病大鼠心肌膠原含量明顯增加（P＜0.05）。經TSG干預后，心肌膠原含量明顯下降，尤以大劑量組干預效果明顯，與糖尿病模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.5 心肌組織中游離脂肪酸和脂肪酸代謝相關酶的變化 與正常對照組比較，高脂飲食喂養(yǎng)的糖尿病大鼠心肌組織游離脂肪酸含量增加（P＜0.01），TSG干預后心肌組織游離脂肪酸含量明顯改善，與糖尿病模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，P ＜0.01）。脂肪酸代謝相關酶（FATPs，FA-β-oxi-dase）與脂肪酸（FAs）從細胞外轉移至細胞內，參與氧化還原反應有關。高脂飲食喂養(yǎng)的糖尿病大鼠心肌組織中FATPs和FA-β-oxidase含量與正常對照組大鼠比較明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示脂肪酸轉運和氧化能力下降，經TSG干預后，心肌組織中FAPs和FA-β-oxidase含量增加（P＜0.05），提示TSG可增加心肌組織中脂肪酸的轉運和氧化利用。見Tab 5。

Tab 1 Effects of TSG on indexes of left ventricular remodeling in experimental diabetic candiomyopathy（±s，n＝10）

Tab 1 Effects of TSG on indexes of left ventricular remodeling in experimental diabetic candiomyopathy（±s，n＝10）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；＃P＜0.05 vs DM

Treatment n Weight after/g Weight before/g Cardiac weight index/mg·g－1 Left ventricular weight index/mg·g －1 Control 10 226.53±31.56 524.51±31.56 2.61±0.25 1.91±0.07 DM 9 235.32±19.64** 278.32±29.14** 3.71±0.28* 2.99±0.07**DM＋TSG10 mg·kg－1 10 231.31±24.65* 313.43±27.32* 2.97±0.22** 2.42±0.06*DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 229.72±31.78*＃ 387.51±37.75*＃ 2.81±0.23*＃ 2.11±0.05*＃

Tab 2 Effects of TSG on FBG，TC，TG，HbA1c and FINS level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

Tab 2 Effects of TSG on FBG，TC，TG，HbA1c and FINS level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；＃P＜0.05，＃＃P＜0.01 vs DM

Treatment n FBG/mmol·L－1 TC/mmol·L－1 TG/mmol·L－1 HbA1c /A·（10 g）－1Pro FINS/mmol·L －1 Control 10 5.11±0.73 4.87±0.71 1.62±0.32 26.47±5.74 15.72±1.43 DM 9 19.57±2.77** 7.83±1.58** 3.21±0.52** 44.73±15.37** 22.71±2.62**DM＋TSG 10 mg·kg－1 10 18.97±2.83** 6.71±0.93* 2.79±0.61** 43.78±16.79** 22.31±2.71**DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 17.04±2.72** 5.94±0.97＃ 1.89±0.52*＃＃ 42.87±16.91** 21.53±2.53*

Tab 3 Effects of TSG on blood CK，LDH and cTnI level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

Tab 3 Effects of TSG on blood CK，LDH and cTnI level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；＃P＜0.05，＃＃P＜0.01 vs DM

Treatment n AST/U·L－1 ALT/U·L－1 CK/U·L－1 LDH/U·L－1 cTnI/μg·L －1 Control 10 56.78±9.76 51.46±8.46 162.3±21.5396.7±81.2 0.07±0.81 DM 9 70.67±9.16* 61.75±6.14 312.4±51.6** 874.3±95.8** 0.32±0.21**DM＋TSG 10 mg·kg－1 10 67.59±8.79 59.47±5.87 271.7±41.3* 704.8±82.7* 0.27±0.17*DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 64.78±8.74 53.56±6.13 211.3±42.4＃ 523.6±81.9*＃ 0.19±0.13*＃

Tab 4 Effects of TSG on left ventricular collagen concentration in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

Tab 4 Effects of TSG on left ventricular collagen concentration in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

*P＜0.05 vs control；＃P＜0.05 vs DM

Treatment n Collgen/mg·g－1Tissue Control 10 2.1±0.4 DM 9 3.5±0.7*DM＋TSG 10 mg·kg－1 10 3.1±0.5 DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 2.7±0.4＃

2.6 血漿炎癥因子的變化 糖尿病心肌病大鼠外周血外周血TNF-α、IL-6、IL-1β分泌增加，與正常對組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。不同劑量TSG干預組炎癥因子表達不同程度下降，尤以TSG高劑量干預組效果明顯，與糖尿病模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見Tab 6。

2.7 心肌組織中TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白的變化 糖尿病心肌病心肌組織TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表達明顯增加，與正常對組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。不同劑量TSG干預組TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表達不同程度下降，與糖尿病模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見Fig 1。

Tab 5 Effects of TSG on mycocardial non-esterified fatty acids，FATPs and FA-β-oxidase concentration in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

Tab 5 Effects of TSG on mycocardial non-esterified fatty acids，FATPs and FA-β-oxidase concentration in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；＃P＜0.05 vs DM

Treatment n NEFA/μmol·g－1Pro FATPs/mg·g－1Pro FA-β-oxidase/mg·L－1·g－1Pro Control 10 49±18 2.98±0.64 21.7±7.8 DM 9 101±23** 1.37±0.52** 10.2±6.2**DM＋TSG 10 mg·kg－1 10 61±19* 1.88±0.71* 12.1±5.7*DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 71±21＃ 2.24±0.73*＃ 15.9±6.3*＃

Tab 6 Effects of TSG on serum TNF-α，IL-6 and IL-1β level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

Tab 6 Effects of TSG on serum TNF-α，IL-6 and IL-1β level in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；＃P＜0.05 vs DM

Treatment n TNF-α/μg·L－1 IL-6/μg·L－1 IL-1β/μg·L －1 Control 10 1.18±0.77 6.78±1.29 0.07±0.81 DM 9 2.04±1.52** 41.31±15.82** 0.32±0.21**DM＋TSG 10 mg·kg－1 10 1.79±1.13* 31.38±12.21* 0.27±0.17*DM＋TSG 20 mg·kg－1 10 1.57±1.01＃ 23.54±10.72*＃ 0.19±0.13*＃

Fig 1 Effects of TSG on mycocardial TNF-α，IL-6 and IL-1β expressions in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

2.8 心肌組織中SIRT1和AMPK的變化 與正常組比較，糖尿病模型組大鼠心臟組織SIRT1蛋白表達明顯下降，TSG干預后干預能增加糖尿病大鼠心臟組織中SIRT1蛋白的表達，以TSG大劑量干預組效果明顯。與正常組比較，糖尿病模型組大鼠心肌組織中AMPK蛋白無明顯變化，但是pAMPK蛋白表達明顯下降，TSG干預后心臟組織中pAMPK蛋白均明顯升高。見Fig 2。

3 討論

糖尿病患者心力衰竭發(fā)生率高且預后較差，提示存在心臟基礎性病變，使心肌易發(fā)生缺血而不易恢復，眾多證據提示確實存在真正的特異性糖尿病心肌病，與缺血性損害不同。研究提示心肌組織中氧化應激、凋亡、炎癥、能量代謝紊亂、線粒體損傷和心肌細胞纖維化被認為是糖尿病心肌病發(fā)生發(fā)展的可能機制［6］。

糖尿病患者心肌活檢中發(fā)現心肌的形態(tài)學改變主要是心肌肥厚、心肌細胞肥大、肌原纖維缺失、間質纖維化、微血管基底膜增厚、小動脈壁中基質增多和心肌內微血管病變。在無心臟病的糖尿病患者中發(fā)現早期即有心肌纖維化，1型和2型糖尿病患者左室功能減退時，心內膠原纖維明顯增多。而心臟膠原纖維增生可導致心肌組織緊張度增加，是心室收縮和舒張功能損傷的重要病理因素［7］。本研究發(fā)現糖尿病大鼠模型組心肌膠原含量明顯增加，而TSG干預能降低膠原含量。

有研究認為糖尿病其實是一種慢性炎癥性疾病，在糖尿病狀態(tài)下，血多炎癥因子如C反應蛋白（CRP）、TNF-α、IL-6、IL-1β等細胞因子分泌增加。炎癥因子的釋放參與糖尿病心肌病變的發(fā)生發(fā)展［8］。本研究結果顯示，高脂飲食和鏈脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病模型組大鼠外周血外周血TNF-α、IL-6、IL-1β分泌增加，同時也發(fā)現在心肌組織中TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表達明顯增加，TSG能抑制這些炎癥因子的產生。

Fig 2 Effects of TSG on mycocardial SIRT1and AMPK expressions in experimental diabetic cardiomyopathy（±s）

高血糖和胰島素抵抗的直接效應導致糖尿病患者的左室功能減退，與心肌能量底物的供應和利用改變有密切關系。正常情況下心肌在有氧灌注和正常做功負荷是利用游離脂肪酸作為主要的能源，在做功增加時，心臟增加糖酵解和丙酮酸氧化。由于糖尿病患者運送到心肌的葡萄糖減少，心肌缺血是依靠糖酵解的ATP生成受損。游離脂肪酸及其氧化產物積聚對心肌細胞直接產生毒性，導致糖尿病心肌病形成［9］。本研究結果發(fā)現高脂飲食喂養(yǎng)的糖尿病大鼠心肌組織游離脂肪酸含量增加，而脂肪酸代謝相關酶（FATPs，FA-β-oxidase）的含量與正常對照組大鼠比較明顯下降，提示脂肪酸轉運和氧化能力下降，而TSG干預后心肌組織游離脂肪酸和脂肪酸代謝相關酶含量明顯改善。

能量代謝異常是糖尿病心肌病變發(fā)生、發(fā)展的重要原因之一，AMPK是一種重要的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在哺乳動物組織包括心肌組織中都有表達。AMPK可調節(jié)血漿葡萄糖、脂肪酸氧化及糖原合成等，是全身能量平衡的關鍵調節(jié)因素，稱為“能量代謝總開關”，在能量代謝和能量平衡等方面起著樞紐作用［10］。SIRT1是一種具有NAD2依賴的蛋白去乙酰化酶活性的多功能轉錄調節(jié)因子，對細胞能量變化和細胞氧化還原狀態(tài)的變化起著重要的調節(jié)作用［11］。當熱量限制或禁食時，在腦、心臟、脂肪、腎臟、肌肉以及肝臟中水平上調。過表達SIRT1的轉基因小鼠對胰島素敏感，同時減少食物攝入和自發(fā)性活動，從而減少能量消耗；在各種胰島素抵抗和糖尿病模型中，SIRT1的轉基因小鼠能夠改善糖耐量，增加脂聯素水平。熱量限制能夠通過激活SIRT1從而對2型糖尿病有防治作用。研究發(fā)現敲除SIRT1可加重小鼠心肌缺血/再灌注損傷，SIRT1的激活劑resveratrol可通過上調SIRT1活性而對氧化應激所致的心肌細胞損害有保護作用［12］。以上研究提示SIRT1是防治糖尿病能量代謝異常及心肌細胞損傷的重要調節(jié)因素。本研究結果提示糖尿病模型組大鼠心肌組織中AMPK蛋白無明顯變化，而心臟組織中SIRT1和pAMPK蛋白表達明顯下降，TSG干預后能升高SIRT1和pAMPK蛋白表達表達。抑制AMPK和SIRT1活性將導致缺血缺氧心肌組織中糖攝取、糖酵解增加等能量反射消失，ATP和肌酸激酶等高能磷酸物含量明顯減少，左室收縮功能受損，心肌細胞凋亡和壞死加劇。本研究結果提示TSG對糖尿病大鼠心肌細胞的能量代謝有改善作用，但其具體機制尚需進一步探討。

（致謝：本實驗在糖尿病心腦血管病變湖北省重點實驗室完成，感謝實驗室工作人員對本實驗的支持。感謝實驗室余薇博士對本實驗的幫助。）

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Protective effects of tetrahydroxystilbeneglucoside on cardiac dysfunction in experimental diabetic cardiomyopathy

LI Cai-rong1，GAN Shou-yi2，HUANG Hong-xia2，CAI Fei3
（1.Dept of Medicine，Hubei University of Science and Technology；2.Dept of Cardiovascular Medicine，Xianning Centre Hospital；3.Hubei Province Key Laboratory on Cardiovascular，Cerebrovascular，and Metabolic Disorders，Hube University of Science and Technology，Xianning Hubei 437100，China）

Aim To study the protective effect of tetra-hydroxystilbeneglucoside（TSG）on cardiac injury and the mechanism involved in silent mating type informa-tion regulation 2 homolog 1（SIRT1）and adenosine monophosphate-activated protein kinase（AMPK）in the diabetic rats.Methods Type 2 diabetic rats were sac-rificed after administration with TSG for 8 weeks.Blood glucose，blood lipids，liverfunction，creatine ki-nase（CK），lactate dehydrogenase（LDH）as well as myocardial nonesterified fatty acids（NEFA）were deter-mined by using biochemical test.The concentration of myocardial fatty acid transport proteins（FATPs）and-fatty acid β-oxidase（FA-β-oxidase），and the levels of tumor necrosis factor alpha（TNF-α），interleukin-6 （IL-6），interleukin-1β（IL-1β）in serum were also measured by ELISA method and radio immunoassay re-spectively.The protein expressions of TNF-α，IL-6，IL-1β，SIRT1 and AMPK were detected by Western blot.Results Treatment of TSG reduced the contentof blood lipids，NEFA and collagen without affecting the content of blood glucose and insulin.The levels of TNF-α，IL-6 and IL-1β in serum as well as the protein expressions of TNF-α，IL-6 and IL-1β of cardia were also inhibited by administration with TSG.Treatment of TSG caused a significantly increased concentration of myocaidial FATPs and FA-β-oxidase，and dramatically restored the decreased protein expressions of SIRT1 and pAMPK in diabetic rats.Conclusion The protec-tive mechanisms of TSG against diabetic rats are in-volved in the alleviation of inflammatory mediator injury and improving energy metabolism.

tetrahydroxystilbeneglucoside；diabetic cardiomyopathy；silent mating type information regula-tion 2 homolog 1（SIRT1）；adenosine monophosphate-activated protein kinase（AMPK）；fatty acid β-oxidase；tumor necrosis factor alpha

時間：2016－2－26 10：20 網絡出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160226.1020.044.html

10.3969/j.issn.1001－1978.2016.03.022

A

1001－1978（2016）03－0410－06

R-332；R322.11；R392.12；R587.1；R977.3；R977.6

2015－11－13，

2015－12－25

湖北省教育廳項目資助（No D20162802）；湖北省衛(wèi)生廳項目（No WJ2015Z122）；湖北科技學院培育項目（No PY1007）；湖北科技學院糖尿病專項基金（No ZX1303）

李彩蓉（1977－），女，碩士，副教授，研究方向：糖尿病微血管并發(fā)癥的臨床和實驗，E-mail：xnlcr＠163.com；蔡 飛（1976－），男，博士，教授，研究方向：糖尿病微血管并發(fā)癥的臨床和實驗，通訊作者，E-mail：xncf＠163.com

◇復方藥物藥理學◇