臨床微生物學檢驗在醫(yī)院感染檢測中的應(yīng)用

張其鳳

【摘要】醫(yī)療中感染問題一直是困擾醫(yī)學界的一個難題，院內(nèi)的交叉感染是引發(fā)多種感染性疾病、減慢康復速率、增加患者死亡率的主要根源。由于醫(yī)院中免疫抑制劑的應(yīng)用、放化療的大力開展以及內(nèi)科介入療法的廣泛應(yīng)用，使得院內(nèi)感染人數(shù)日益增多。臨床上微生物的檢驗主要針對傳染源、傳播途徑、易感人群這三個方面，切斷這三個方面中的任何一個方面都能有效降低院內(nèi)感染的概率?，F(xiàn)針對臨床微生物檢驗對有效控制醫(yī)院感染的價值進行討論。

【關(guān)鍵詞】臨床微生物；檢驗；感染檢測

【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2016）02-0213-01

引言：醫(yī)院感染的發(fā)生包括3個重要的環(huán)節(jié)，即傳染原的存在、傳播途徑和易感人群，每個環(huán)節(jié)都和微生物學檢查有著極為密切的關(guān)系。醫(yī)院感染的發(fā)生主要有兩種類型，即外源性感染（系指由患者本身以外的微生物引起的感染）、內(nèi)源性感染（系指由患者本身攜帶的微生物引起的感染）。要對不同類型的感染作出正確的診斷，必須進行微生物學檢查。因此臨床微生物學檢驗在醫(yī)院感染的診斷、監(jiān)測，醫(yī)院感染的流行病學調(diào)查、消毒滅菌效果評價以及抗菌藥物的合理使用等方面，具有極其重要的作用。

1.常用微生物檢測技術(shù)

目前常用的微生物檢測技術(shù)有顯微技術(shù)、染色技術(shù)、分離純化技術(shù)、微生物鑒定技術(shù)、細菌診斷技術(shù)、聚合酶技術(shù)等幾大類。

1.1 顯微技術(shù)

顯微技術(shù)是微生物檢測中常用的技術(shù)之一，包括普通光學顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等多種設(shè)備，在不同的檢測需求中所運用的檢測設(shè)備并不相同。顯微技術(shù)是微生物檢測中最為簡便，操作最為容易的檢測技術(shù)之一，但檢測結(jié)果準確度和檢測控制較差，直接觀測的結(jié)果有可能會產(chǎn)生極大的誤差。

1.2 染色技術(shù)

染色技術(shù)則是對微生物細胞進行染色后，對微生物進行觀察檢測的一種技術(shù)，不過由于染色后微生物標準基本是死的，其形態(tài)和結(jié)構(gòu)會在染色過程中發(fā)生一定變化，無法切實反應(yīng)出活細胞的真實情況，因此通常只作為輔助檢測手段。在實際操作中，整個流程也較為繁瑣，染色、脫色都需要嚴格控制，否則將會影響檢測結(jié)果的準確性。

1.3 分離純化技術(shù)

自然環(huán)境中的微生物通常是雜居混生的，在微生物檢測中需要對混生微生物群體進行分離純化，以對純微生物進行檢測的技術(shù)，分離純化技術(shù)常用于菌種鑒定中，分離純化技術(shù)是微生物檢測的一項重要技術(shù)，是微生物檢測的重要基礎(chǔ)。

1.4 其它技術(shù)

在微生物常規(guī)檢測中，通常對微生物進行形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性方面的觀察，再利用化學反應(yīng)來測定微生物的代謝物，以鑒別一些形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物，以更好的進行微生物分類鑒定。近年來，在環(huán)境監(jiān)測中，微生物檢測技術(shù)運用方法較為廣泛，如運用細菌總數(shù)和糞便污染指示菌監(jiān)測水質(zhì)，運用發(fā)光細菌檢測環(huán)境有毒物質(zhì)，運用水中藻類生長量監(jiān)測水質(zhì)或物質(zhì)霉性等等，這些方法都已經(jīng)有了較為成熟的操作手段和檢驗標準，具有較強的實踐價值。。

2.臨床微生物檢驗技術(shù)的運用

2.1重視原始標本直接涂片的診斷價值

原始標本涂片檢查不僅對微生物檢驗全過程起著導向作用，還可快速為診斷提供有價值的信息。在細菌培養(yǎng)過程中，受細菌生長緩慢且培養(yǎng)特異性的制約，不能快速回報結(jié)果，可通過細菌培養(yǎng)前對標本進行涂片鏡槍，包括未染色濕片位相顯微鏡觀察和染色標本片檢查，結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)，快速提供診斷信息，對一些感染性疾病特別是急重癥感染有重要的實用價值。例如無菌體液如血液、胸腹水、腦脊液等的陽性標本可直接根據(jù)涂片細菌形態(tài)和染色特征快速回報臨床，指導其經(jīng)驗用藥，顯微鏡形態(tài)學在細菌鑒定中體現(xiàn)的價值遠甚于此，但是由于目前自動化儀器以及分子生物學技術(shù)的廣泛應(yīng)用，臨床似乎有忽視形態(tài)學檢查的傾向，同時，由于缺少模式菌株形態(tài)學圖譜，以及鑒定鏡下形態(tài)需要豐富的經(jīng)驗，更使得顯微鏡形態(tài)學檢查在各醫(yī)院開展困難重重，這就需要每一位檢驗工作者從態(tài)度上給予高度重視，平時苦練基本功，善于總結(jié)歸納。此外，相關(guān)機構(gòu)應(yīng)盡快建立形態(tài)學檢查的標準方法，使臨床有據(jù)可依，真正體現(xiàn)顯微鏡形態(tài)學的應(yīng)有價值。

2.2發(fā)展快速準確的診斷技術(shù)

對于發(fā)病率和病死率很高的感染性疾病，特別對那些體外難培養(yǎng)的病原微生物，臨床迫切需要快速且準確的診斷方法。目前血清免疫學、多重聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、基因芯片和多肽質(zhì)譜分析等技術(shù)在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用，提高了疑難病原確診率。由于條件限制一些前沿技術(shù)很難在基層醫(yī)院開展，如何更有效地提高此類醫(yī)院對感染性疾病的快速診斷水平，是擺在每一位微生物檢驗工作者面前的一個嶄新課題。

2.3做好細菌藥敏試驗標準化

加強藥敏試驗標準化和規(guī)范化是獲得藥敏試驗準確性的關(guān)鍵。首先，準確的藥敏試驗需要合格的藥敏試劑和標準的試驗方法。目前國內(nèi)許多醫(yī)院的微生物室采用K-B紙片擴散法進行藥敏試驗，該方法是美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）公認的藥敏試驗方法，但較易受紙片質(zhì)量、M-H瓊脂厚度和菌液濃度等因素的影響，所以欲得到準確的藥敏結(jié)果，必須進行嚴格的室內(nèi)質(zhì)量控制，保證藥敏紙片以及M-H瓊脂等的在控狀態(tài)，同時也應(yīng)充分了解K-B法的局限性，對于不能使用此法進行檢測的菌株，應(yīng)參照CLSI推薦的最低抑菌濃度（MIC）法檢測；其次，臨床微生物檢驗工作者應(yīng)注重自身業(yè)務(wù)能力的培養(yǎng)，隨著臨床對細菌耐藥性認識的不斷深入及新的抗感染治療藥物的層出不窮，古老的微生物學重新煥發(fā)了光彩，如何更好地了解細菌藥敏試驗，需要微生物檢驗工作者不斷地增加知識儲備，積極參加本專業(yè)學術(shù)交流，掌握細菌藥敏發(fā)展的新動向，積極參加室間質(zhì)量評價，提高檢驗技術(shù)水平。

結(jié)束語

微生物檢驗技術(shù)正朝著簡便、高效、快速、自動化方向發(fā)展，許多新的檢測技術(shù)還在不斷涌現(xiàn)出來，除了上面介紹的技術(shù)，還有代謝學技術(shù)、傳感器技術(shù)、流式細胞術(shù)、基因探針技術(shù)、生物芯片技術(shù)等等。每種檢測技術(shù)都有其優(yōu)缺點，研究檢測人員應(yīng)該根據(jù)不同的檢測目標，不同的實驗環(huán)境及條件，選擇適當?shù)臋z測方法，進一步地，還可以將不同的技術(shù)結(jié)合起來比對、使用，以提高檢測的準確性。

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