白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗技術(shù)研究

江竹 李川

【摘要】目的：對白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗技術(shù)進(jìn)行研究。方法：選擇2015年1月至2015年11月間收治的白血病/淋巴瘤患者20例，采用流式細(xì)胞術(shù)對患者的免疫分型進(jìn)行檢驗，討論流式細(xì)胞術(shù)在白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗中的應(yīng)用價值。結(jié)果：入選的20例患者中ALL11例，其中B-ALL6例、T-ALL5例，AML9例；B-ALL患者HLA-DR陽性表達(dá)率最高，為100%，CD21、CD38、CD22依次為94.2%、91.3%、59.8%；T-ALL患者CD25陽性表達(dá)率最高，為100.0%，CD1、CD71、CD38依次為76.2%、65.3%、52.9%；AML患者M(jìn)PO陽性表達(dá)率最高，為91.2%，CD15、CD68、HLA-DR、CD64依次為86.6%、81.2%、83.2%、65.7%；AML合并淋系抗原2例，CD25、CD24陽性率為7.6%、1.6%。結(jié)論：白血病/淋巴瘤患者應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行免疫分析，對疾病的診斷及治療具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】白血病；淋巴瘤；免疫分型；流式細(xì)胞術(shù)

【中圖分類號】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1671-8801（2016）02-0205-01

白血病/淋巴瘤現(xiàn)已成為臨床治療中的多發(fā)疾病，隨著生活環(huán)境的污染、飲食結(jié)構(gòu)及生活習(xí)慣的改變，白血病/淋巴瘤的發(fā)生不但在逐年升高，且發(fā)病人群也逐漸趨于年輕化。白血病/淋巴瘤的免疫分型檢驗可為疾病的診斷及治療提供更加完善的臨床依據(jù)，并對治療效果進(jìn)行有效評價，流式細(xì)胞術(shù)在白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗中具有較高的利用率。現(xiàn)以40例白血病/淋巴瘤患者為對象，對流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用價值進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2015年1月至2015年11月間收治的白血病/淋巴瘤患者20例?；颊吣挲g在16-74歲之間，平均年齡為（42.7±24.6）歲；其中男性患者12例，女性患者8例。

1.2檢驗方法

1.2.1樣本采集

抽取患者靜脈血5ml，真空肝素抗凝采血管盛裝；淋巴瘤患者可做穿刺活檢，應(yīng)用EDTA三或二鉀進(jìn)行抗凝處理；樣本對號標(biāo)記、合理儲存；檢驗時如血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血、凝固現(xiàn)象則棄用，重新進(jìn)行樣本采集，樣本采集完成至檢驗不可超過1d。

1.2.2免疫分型

采用四色免疫分型法進(jìn)行檢測：100ul樣本內(nèi)混入20ul常用免疫分型單克隆抗體，在20攝氏度的環(huán)境下避光孵育15分鐘；續(xù)加溶血劑，完全融合后繼續(xù)避光孵育10分鐘；以濃度為10mmol/L的弱堿性磷酸鹽溶液為緩沖液，樣本2000r/min條件下離心5min，去除上層血清，分離單核細(xì)胞；將分離后的單核細(xì)胞制成濃度為107/L的細(xì)胞懸濁液，完成檢驗樣本配置，放置流式細(xì)胞儀中等待檢測；NK淋系白血病單抗為CD16、CD57，B淋系白血病單抗為CD21、CD22、CD24，T淋系白血病單抗為CD71、CD1、CD25，髓系白血病單抗為CD15、CD64、CD68、MPO（髓過氧化物酶），非系列特異性白血病單抗為CD9、CD38、CD45、HLA-DR；儀器檢驗前調(diào)試，使變異系數(shù)小于2%，以CD45/SSC為設(shè)門，淋巴、髓系抗原超過20%、高度特異性抗原超過10%作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3數(shù)據(jù)處理

文中數(shù)據(jù)采用spss17.0軟件進(jìn)行處理，計數(shù)資料采用%表示，資料采用卡方檢驗，計量資料采用 ±S表示，資料采用t值檢驗，P<0.05，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 入選的20例患者流式細(xì)胞術(shù)免疫分型結(jié)果為ALL11例，所占比例為60.0%，AML9例，所占比例為40.0%。

2.2 11例ALL患者中，6例B-ALL，所占比例為54.55%；5例T-ALL，所占比例為45.45%；B-ALL患者的HLA-DR的陽性表達(dá)率為100.0%，CD21的陽性表達(dá)率為94.2%，CD38的陽性表達(dá)率為91.3%，CD22的陽性表達(dá)率為59.8%；T-ALL患者CD25的陽性表達(dá)率為100.0%，CD1、CD71的陽性表達(dá)率分別為76.2%、65.3%，CD38的陽性表達(dá)率為52.9%。

2.3 9例AML患者中，髓系白血病特異性抗原MPO的陽性表達(dá)率最高，為91.2%，其次為CD15，其陽性表達(dá)率為86.6%，CD68的陽性表達(dá)率為81.2%，HLA-DR的陽性表達(dá)率為83.2%，CD64的陽性表達(dá)率最低，為65.7%；AML患者中有2例患者伴隨T淋系及B淋系抗原表達(dá)，CD25的陽性表達(dá)率為7.6%，CD24的陽性表達(dá)率為1.6%。

3 討論

白血病/淋巴瘤是一種致死率極高的全身性癌癥，疾病的早期診斷及有效治療方案的實施，對維持患者機(jī)體功能，延長患者生存時間具有重要意義[1]?，F(xiàn)今臨床上所采用的診斷方法多缺乏特異性，無法為臨床診斷、治療提供更多的臨床依據(jù)。

免疫分型在白血病/淋巴瘤中具有較高的臨床應(yīng)用價值，可利用單抗對白細(xì)胞細(xì)胞漿中或表面的抗原進(jìn)行分析[2]，尋找細(xì)胞來源，明確細(xì)胞分化階段，進(jìn)而為臨床治療、診斷提供確切的依據(jù)，甚至可對治療后的臨床效果進(jìn)行有效評估[3]。流式細(xì)胞術(shù)是一種快捷、精確、準(zhǔn)確性高的免疫分型方式。流式細(xì)胞術(shù)是以標(biāo)記后的單抗作為分子探針，根據(jù)細(xì)胞克隆過程中抗原的表達(dá)方式，對細(xì)胞克隆的特點及所處階段進(jìn)行分析，進(jìn)而對白細(xì)胞的分化程度、所屬類別進(jìn)行劃分[4]。

采用流式細(xì)胞術(shù)對白血病/淋巴瘤患者進(jìn)行免疫分析，可為患者制定具有針對性的治療方案，對提高患者生存率、延長患者生存時間具有重要意義[5]。

參考文獻(xiàn)：

[1]李娜.淋巴系統(tǒng)白血病細(xì)胞免疫分型的臨床研究[D].吉林大學(xué)，2012.

[2]周麗蘭.流式細(xì)胞術(shù)免疫分型在非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的研究[D].昆明醫(yī)學(xué)院，2011.

[3]朱明清.白血病和淋巴瘤免疫分型的標(biāo)準(zhǔn)化方案[A].中華醫(yī)學(xué)會、中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會.中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C].中華醫(yī)學(xué)會、中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會：，2012：2.

[4]孫曉非，何麗容，馮海林，嚴(yán)蘇麗，夏忠軍，陳曉勤.多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)在淋巴細(xì)胞白血病和非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯診斷的應(yīng)用[J].癌癥，2003，11：1232-1236.

[5]劉鑫，龐鐵光.流式細(xì)胞術(shù)在白血病和淋巴瘤診斷中的應(yīng)用[J].內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，03：347-350.