不同商品等級甘肅白條黨參質(zhì)量比較研究

李成義 劉書斌 王明偉 魏學(xué)明 強正澤 張櫻山

摘要：目的 比較不同商品等級白條黨參藥材的質(zhì)量，為黨參藥材合理利用提供依據(jù)。方法 采集甘肅不同商品等級54批白條黨參樣品，采用高效液相色譜法測定黨參藥材中黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量，采用比色法測定黨參多糖含量，按2010年版《中華人民共和國藥典》方法測定醇溶性浸出物含量，運用單因素方差和因子分析對數(shù)據(jù)進行綜合評價。結(jié)果 黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與商品等級均呈負相關(guān)。主成分因子排序結(jié)果顯示樣品并不以其商品等級相應(yīng)順序排序，二等品多居于排名前列。結(jié)論 不同商品等級白條黨參質(zhì)量存在差異，二等品相對一、三等品質(zhì)量較優(yōu)。

關(guān)健詞：黨參；商品等級；質(zhì)量評價；因子分析

中圖分類號：R284.1 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5304（2016）05-0091-05

Comprehensive Quality Evaluation of Gansu Baitiao Codonopsis Radix with Different Commercial Grades LI Cheng-yi1， LIU Shu-bin1， WANG Ming-wei1， WEI Xue-ming2， QIANG Zheng-ze1， ZHANG Ying-shan2 （1. Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China； 2. Gansu Province Traditional Chinese Medicine Modern Pharmaceutical Engineering Research Institute， Lanzhou 730010， China）

Abstract： Objective To compare the quality of Baitiao Codonopsis Radix with different commercial grades； To provide the basis for the rational utilization of Codonopsis Radix. Methods Totally 54 batchs of Baitiao Codonopsis Radix with different commercial grades from main producing areas in Gansu were collected. The contents of lobetyolin and atractylenoide Ⅲ in Codonopsis Radix were detected by HPLC. Colorimetric method was used to detect the content of polysaccharide in the Codonopsis Radix. Chinese Pharmacopoeia 2010 Edition was referred to detect the content of extractum. One way ANOVA and factor analysis method were used to comprehensively evaluate the data. Results Lobetyolin and atractylenoide Ⅲ were all negatively correlated with commercial grades. The results of the principal component factor ranking showed that the samples were not sorted by the order of commercial grades， with commercial grade two ranking in the forefront. Conclusion The quality of Baitiao Codonopsis Radix with different commercial grades is different， and the quality of commercial grade two is better than other commercial grades.

Key words： Codonopsis Radix； commodity grade； quality evaluation； factor analysis method

白條黨參在甘肅栽培歷史已逾50年。據(jù)調(diào)查，其主要產(chǎn)地集中在甘肅定西、隴南等地[1]，占全國黨參流通量的80%以上，為甘肅道地藥材。黨參主要含黨參萜類、苷類、聚乙炔醇、甾類、酚酸、多糖等多種化學(xué)成分，有補中益氣、生津養(yǎng)血、健脾益肺功效[2]。其中黨參炔苷對乙醇所致的胃黏膜損傷有很好的保護作用[3]，是黨參保護胃黏膜的活性成分之一；倍半萜內(nèi)酯類化合物蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ具有明顯的抗炎活性[4]，與黨參補脾養(yǎng)胃的傳統(tǒng)功效相符；黨參多糖既是黨參主要的化學(xué)成分，也是藥效活性成分；醇溶性浸出物

為藥典規(guī)定的常測項。以上均可作為黨參研究的指標(biāo)成分。

目前對白條黨參的質(zhì)量評價多集中在生藥學(xué)鑒定方面[5]，或基于1種主要有效成分[6-7]、2種指標(biāo)性成分[3]和基于指紋圖譜研究[8]的單一評價模式，缺乏對不同商品等級白條黨參進行綜合、全面的質(zhì)量評價。本研究通過測定甘肅54批不同商品等級白條黨參樣品的4種指標(biāo)成分含量，并進行統(tǒng)計學(xué)分析，以期探討目前不同商品等級白條黨參藥材的實際質(zhì)量，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），OHAUS Corporation DV SERIES型電子天平（奧豪斯儀器有限責(zé)任公司），HH-S112電熱恒溫水浴鍋（江蘇醫(yī)療器械廠），KQ-250TDB型高頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），Uph-I-5T型優(yōu)普超純水制造系統(tǒng)（上海優(yōu)普超片設(shè)備公司），TU-1901型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

黨參炔苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號111732-201206），蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品（上海標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，批號PCM-8Z-003，純度>99%），乙腈（色譜純），甲醇（色譜純），氯仿、甲醇、乙醇均為分析純，雙蒸水。

于2014年1月在渭源縣、臨洮縣、宕昌縣等地收集54批次白條黨參樣品，遵從不同產(chǎn)地黨參傳統(tǒng)采收期。經(jīng)筆者李成義教授鑒定為桔?？浦参稂h參Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.的干燥根，劃分等級后粉碎，密封保存?zhèn)溆?，樣品信息見?。

2 方法與結(jié)果

2.1 白條黨參等級劃分

參照國家《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》，對各樣品進行外觀形狀觀察，并測定蘆下直徑等相關(guān)指標(biāo)，統(tǒng)一劃分商品等級，具體劃分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

2.2 醇溶性浸出物含量測定

按2010年版《中華人民共和國藥典》（附錄X A）醇溶性浸出物測定法項下熱浸法[2]測定，結(jié)果見表3。

2.3 黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量測定

采用高效液相色譜法測定。黨參炔苷色譜條件：ZORBAX SB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μL），流動相乙腈-水（28∶72），流速1.0 mL/min，進樣量10 μL，柱溫30 ℃，檢測波長269 nm，理論塔板數(shù)>4000，黨參炔苷與相鄰峰分離度均>1.5，分離度良好。蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ色譜條件：ZORBAX SB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μL），流動相甲醇-水（70∶30），流速1.0 mL/min，進樣量10 μL，柱溫30 ℃，檢測波長222 nm，理論塔板數(shù)>4000，蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與相鄰峰分離度均>1.5，分離度良好。測定其峰面積，計算相應(yīng)含量，結(jié)果見表3。

2.4 黨參多糖含量測定

采用苯酚硫酸法[9]測定。精密移取供試品溶液0.5 mL，補水至3.5 mL，加入5%苯酚溶液1.5 mL和濃硫酸5.0 mL混勻，靜置于100 ℃水浴中15 min后，迅速冷卻，在486 nm處測吸光度值并計算多糖含量，結(jié)果見表3。

2.5 不同商品等級白條黨參指標(biāo)成分單因素方差分析

根據(jù)上述測定結(jié)果，采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件，對不同商品等級白條黨參藥材所含的黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、醇溶性浸出物和黨參多糖4種成分采用單因素方差分析進行評價比較。其中，對黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ進行評價時，由于總方差不齊，采用Tamhane's T2進行方差分析，其他評價指標(biāo)采用LSD進行分析。

2.5.1 黨參炔苷含量比較 不同商品等級白條黨參的黨參炔苷含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。其中一等品的黨參炔苷含量最低，平均值為0.447 mg/g；二等品的黨參炔苷平均值為0.480 mg/g；三等品的黨參炔苷最高，為0.517 mg/g?？梢?，商品等級與黨參炔苷含量呈負相關(guān)，商品等級越高，黨參炔苷含量越低。

2.5.2 蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量比較 不同商品等級白條黨參中蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。其中一等品蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量最低，平均值為0.261 mg/g；二等品蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ平均含量為0.271 mg/g；三等品蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ平均含量為0.302 mg/g。含量最高者是最低者的1.16倍?？梢?，蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量與商品等級呈負相關(guān)，商品等級越高，蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量越低。

2.5.3 浸出物含量比較 不同商品等級白條黨參浸出物含量范圍為49.82%～69.45%，其中二等品平均含量最低（60.71%），一等品平均含量最高（61.81%）。個別樣品含量較低，可能與樣品的采集、土壤肥力等因素有關(guān)?？傮w上看，甘肅白條黨參醇溶性浸出物含量普遍高于藥典規(guī)定（55%），說明甘肅白條黨參總體質(zhì)量較好。

2.5.4 黨參多糖含量比較 不同商品等級白條黨參黨參多糖含量為42.76～142.76 mg/g，不同商品等級樣品間的多糖含量無明顯差異。三等品的多糖含量最高產(chǎn)地是最低產(chǎn)地的3.47倍，說明相同等級的不同產(chǎn)地樣品間黨參多糖含量相差較大，這可能與生長環(huán)境、海拔高低、土壤因素等有關(guān)。經(jīng)單因素方差分析得出，不同產(chǎn)地樣品的黨參多糖存在顯著差異，臨洮縣、渭源縣樣品的多糖含量均高于漳縣。這與我們實地調(diào)研結(jié)果相一致。

2.6 相關(guān)性分析

對表3中各指標(biāo)成分含量數(shù)據(jù)進行相關(guān)性分析，Pearson相關(guān)系數(shù)見表4。結(jié)果表明，白條黨參中黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量呈顯著正相關(guān)，浸出物與黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ呈顯著負相關(guān)，黨參多糖與蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量呈負相關(guān)，但黨參炔苷含量與黨參多糖無相關(guān)性。

2.7 白條黨參藥材主成分分析

主成分分析是通過多個數(shù)值變量間的相互關(guān)系，采用統(tǒng)計學(xué)降維分析原理，將多個變量簡化為幾個綜合變量，最大限度地保留原樣本集所含的原始信息，使新變量成為原變量的線性組合，是一種適用于多指標(biāo)大樣本的綜合分析方法[10]。采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件對黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、浸出物、黨參多糖的檢測結(jié)果進行主成分分析，結(jié)果見表5～表7。

由表5可知，前2個成分特征值均>1，說明前2個因子在影響黨參質(zhì)量評價指標(biāo)中起主導(dǎo)作用，2個主成分累積貢獻率達75.50%，能夠較客觀地反映黨參藥材內(nèi)在質(zhì)量，故選取前2個主成分進行分析。

由表6可見，黨參各因子載荷系數(shù)能綜合反映各成分對第1、2主成分的影響。其中，黨參炔苷的因子載荷量在第1主成分中最大，說明其對黨參質(zhì)量的影響最大，驗證了藥典采用黨參炔苷作為指標(biāo)性成分具有一定依據(jù)。另外，黨參多糖載荷系數(shù)為0.969，是影響第2主成分的主要因子，黨參炔苷與黨參多糖成分則呈正相關(guān)。結(jié)合文獻[8-9]分析，這些成分之間的相關(guān)性可能與聚乙炔醇類成分之間糖苷鍵的相互轉(zhuǎn)化有關(guān)，提示黨參多糖可能參與了黨參炔苷成分的生源合成。

根據(jù)各主要因子的權(quán)重系數(shù)進行累加，權(quán)重系數(shù)的計算依據(jù)其方差貢獻率的大小，即各主成分的貢獻率與2個主成分的總貢獻率之比，第1主成分的權(quán)重F1=47.257%÷75.502%=0.626，則第2主成分權(quán)重F2為0.374。根據(jù)公式F=0.626F1+0.374F2，得出各個黨參樣品的總因子得分F并排序，得分越高，表明該藥材質(zhì)量越好。結(jié)果見表7。

3 討論

為準(zhǔn)確對不同商品等級白條黨參質(zhì)量進行評價，結(jié)合實地調(diào)研情況，本研究采集6縣18個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的黨參進行多指標(biāo)綜合分析和質(zhì)量評價。每縣至少保證3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，能代表該主產(chǎn)縣區(qū)的總體黨參質(zhì)量。藥材采集后統(tǒng)一劃分商品等級，并通過通風(fēng)陰涼處晾曬干燥的方法處理，避免因樣本量少、儲藏時間、加工方式等因素對分析結(jié)果造成影響。

相關(guān)分析結(jié)果顯示，不同商品等級白條黨參中黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量呈顯著正相關(guān)，浸出物與黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量均呈顯著負相關(guān)。這與劉氏等[6]、王氏等[11]研究表明黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ均可作為初步評價黨參質(zhì)量的指標(biāo)性成分，及魏氏等[9]研究表明黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量與商品等級呈負相關(guān)的結(jié)果一致。商品等級越高，黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量越低，浸出物含量越高，究其原因可能為：①黨參炔苷、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ主要存在于根的韌皮部內(nèi)，隨著藥材根部粗度增加（商品等級越高），皮部所占比例降低，含量也隨之降低。②主產(chǎn)區(qū)藥農(nóng)在黨參種植中大量使用壯根靈等生物調(diào)節(jié)劑，影響黨參內(nèi)在次生代謝產(chǎn)物分布。

采用主成分分析法對白條黨參進行綜合評價，較單一成分評價更為系統(tǒng)、客觀，能較全面地反映黨參藥材質(zhì)量情況。通過主成分因子總積分進行排序發(fā)現(xiàn)，排名不以商品等級對應(yīng)順序排序，較多二等品排名靠前，前21名中二等品占47.62%，一等品排名總體偏后。另外，黨參多糖含量排序依次為：二等品>三等品>一等品。由此得出，現(xiàn)行商品等級已不能對白條黨參藥材質(zhì)量進行合理評價。

目前甘肅白條黨參多采用一、二、三等3個等級進行商品等級劃分。普遍認為藥材越粗越長的商品等級越高，質(zhì)量越好，價格也越高。筆者建議在進行藥材商品等級劃分時，除考察藥材的外觀性狀外，還應(yīng)綜合考慮有效成分含量，不同商品等級白條黨參在有效成分含量上存在一定差異。故在黨參藥材的資源利用過程中，應(yīng)根據(jù)實際用途合理選擇黨參藥材的等級，以保證黨參優(yōu)質(zhì)優(yōu)價。若以黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ為指標(biāo)成分，二等品的成分含量最高，可優(yōu)先考慮選擇二等品，不僅能提高產(chǎn)率，降低生產(chǎn)成本，還可提高藥材的綜合利用率。

參考文獻：

[1] 趙汝能.甘肅中草藥資源志：下冊[M].蘭州：甘肅科學(xué)技術(shù)出版社， 2007：303.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：264-265.

[3] 楊靜，蘇強，劉恩荔.不同產(chǎn)地黨參蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和黨參炔苷含量測定[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，41（8）：698-702.

[4] 王崢濤，徐國鈞，服部征雄，等.黨參化學(xué)成分的分離鑒定[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報，1988，19（1）：61.

[5] 楊扶德，羅文蓉，王炯.不同產(chǎn)地黨參的質(zhì)量比較研究[J].甘肅中醫(yī)， 2007，20（9）：48-50.

[6] 劉書斌，張櫻山，高慧琴，等.甘肅不同產(chǎn)地黨參中表征成分黨參炔苷的含量分析[J].甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014，31（5）：15-19.

[7] 張承軍，王建良，李川國，等.甘肅產(chǎn)黨參中黨參炔苷含量的動態(tài)研究[J].西部中醫(yī)藥，2014，27（9）：7-9.

[8] 封士蘭，胡芳弟，劉欣，等.HPLC研究甘肅產(chǎn)白條黨參指紋圖譜[J].中成藥，2005，27（7）：745-748.

[9] 魏學(xué)明.黨參商品等級及質(zhì)量研究[D].蘭州：甘肅中醫(yī)學(xué)院，2012.

[10] 孫振球.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)（第二版）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：354-355.

[11] 王愛娜，秦雪梅，張勇，等.高效液相色譜法測定不同產(chǎn)地黨參中蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量[J].中國藥學(xué)雜志，2005，40（18）：1436-1437.