不同刺激量針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠的影響

崔　曉，周　瑾，張　梅，劉珍珍，楊佳敏，齊丹丹，郭孟瑋，2，趙雅芳，2，李曉泓，任曉暄，2，張露芬，2*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；2.國家中醫(yī)藥管理局針灸生物學(xué)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，北京 100029)

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不同刺激量針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠的影響

崔曉1，周瑾1，張梅1，劉珍珍1，楊佳敏1，齊丹丹1，郭孟瑋1，2，趙雅芳1，2，李曉泓1，任曉暄1，2，張露芬1，2*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；2.國家中醫(yī)藥管理局針灸生物學(xué)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，北京 100029)

摘要：目的觀察不同的針刺刺激量施于關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠子宮組織中收縮素受體(OTR)及肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)含量的影響。方法將處于動(dòng)情間期3月齡的SD雌性大鼠32只，隨機(jī)分為鹽水組、寒凝類痛經(jīng)模型組24只,造模成功后將寒凝類痛經(jīng)模型組又分為模型組、刺激量A組和刺激量B組，每組8只。除鹽水組外，模型組、刺激量A組和刺激量B組均采用全身冷凍法結(jié)合苯甲酸雌二醇注射法造模。鹽水組和模型組不予針刺，刺激量A組予以粗針、深刺、行手法；刺激量B組予以細(xì)針、淺刺、不施手法。采用熒光定量PCR方法檢測大鼠子宮組織中縮宮素受體(OTR)的含量。采用ELISA(酶聯(lián)免疫法)測量大鼠子宮組織中MLCK的含量。結(jié)果與鹽水組比較，模型組的子宮收縮波個(gè)數(shù)、波峰峰值、活動(dòng)度及MLCK水平均升高 (P<0.01)；與模型組比較，刺激量A組的子宮收縮波個(gè)數(shù)明顯減少(P<0.05)、MLCK含量明顯降低 (P<0.01)，刺激量B組的OTR mRNA相對(duì)表達(dá)量降低 (P<0.05)；與刺激量A組比較，刺激量B組收縮波個(gè)數(shù)增多 (P<0.05)、OTR mRNA相對(duì)表達(dá)量降低(P<0.01)。結(jié)論不同刺激量針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠的效應(yīng)有所不同，粗針、深刺、行手法的效應(yīng)較強(qiáng)于細(xì)針、淺刺、不行手法的針刺效應(yīng)，提示針刺的刺激量也是決定針刺療效的因素之一。

關(guān)鍵詞：針灸療法；穴，關(guān)元；寒凝類痛經(jīng)；OTR；MLCK

痛經(jīng)是目前臨床常見的婦科疾病之一，也是以在行經(jīng)前后或行經(jīng)期間出現(xiàn)腹痛，痛引腰骶，下腹墜脹等為主要表現(xiàn)的月經(jīng)病之一。其發(fā)病所引發(fā)的不適會(huì)嚴(yán)重影響多數(shù)女性患者的生活和工作質(zhì)量，因此其越來越受醫(yī)學(xué)者的關(guān)注。現(xiàn)代針灸療法在治療痛經(jīng)疾病中療效確卓[1-2]，成為痛經(jīng)主要的治療手段之一和重點(diǎn)研究方向。由于針灸在治療疾病方面的機(jī)制尚不清楚，現(xiàn)對(duì)針刺關(guān)元穴從不同刺激量入手，觀察其對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠子宮相關(guān)物質(zhì)的影響，探討不同刺激量對(duì)針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響差異及部分機(jī)制。

1材料

1.1動(dòng)物采用清潔級(jí)(SD)大鼠，雌性，鼠齡3個(gè)月，體質(zhì)量(240±20)g，性成熟未交配。飼養(yǎng)條件：室內(nèi)溫度(23±1)℃，濕度(45±5)%，日光燈光照，普通清潔級(jí)鼠飼料，自由飲用自來水。在飼養(yǎng)過程中對(duì)大鼠進(jìn)行陰道篩查，選擇處于動(dòng)情間期的大鼠32只，納入實(shí)驗(yàn)。

1.2儀器、試劑及耗材BC/BD-379HB臥式冰柜:青島海爾集團(tuán)；BT223S電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；電熱恒溫水浴箱，北京市醫(yī)療設(shè)備廠；MDF-u50A型超低溫冰箱，日本三洋公司；FT-100張力換能器，成都泰盟科技有限責(zé)任公司；PRISM7700 型熒光定量 PCR儀，美國應(yīng)用生物公司；苯甲酸雌二醇注射液，寧波市三生藥業(yè)有限公司，批號(hào):120207；縮宮素注射液：上海禾豐制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)：120302；自制美蘭染色溶液；20%烏拉坦注射液：批號(hào)T20080530。

2方法

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后，對(duì)大鼠進(jìn)行陰道動(dòng)情周期篩查,每日定時(shí)用細(xì)棉簽蘸以生理鹽水濕潤后輕輕插入大鼠陰道約0.5 cm，稍微轉(zhuǎn)動(dòng)后取出，將帶有陰道內(nèi)容物的細(xì)棉簽在載玻片上均勻轉(zhuǎn)動(dòng)涂片，在空氣中干燥。美蘭染色10 min，用清水將美蘭輕輕沖掉，然后在顯微鏡下觀察陰道涂片的組織學(xué)變化，根據(jù)細(xì)胞形態(tài)、種類及數(shù)量篩選出動(dòng)情間期大鼠。將處于動(dòng)情間期的32只雌性SD 大鼠，按照隨機(jī)數(shù)字法分為鹽水對(duì)照組 8 只，寒凝證類痛經(jīng)模型組24只，造模結(jié)束后將寒凝類痛經(jīng)模型組分為模型組、刺激量 A 組(粗針、深刺、行手法) 與刺激量B組(細(xì)針、淺刺、不施手法)，每組各8 只。

2.2模型制備根據(jù)前期本課題組實(shí)驗(yàn)研究，采用動(dòng)情間期SD大鼠全身冷凍法配合苯甲酸雌二醇注射法可成功建立寒凝類痛經(jīng)大鼠模型[3-5]。其制備方法為:除鹽水組外，其余各組大鼠采用全身冷凍法制備寒凝證模型，即第1～5天將大鼠(每8只1籠) 放入-25 ℃冰柜冷凍4 h，2 h后打開冰柜換氣5 s，同時(shí)給予苯甲酸雌二醇注射，第1天及第10天日注射 0.5 mg /只，余日均0.2 mg /只，鹽水組每日給予同等劑量的生理鹽水。模型組及針刺組于末次給藥1 h后，腹腔注射縮宮素2 U/只，鹽水組在皮下給予生理鹽水1 h 后，腹腔注射生理鹽水2 U/只。2.3穴位選取與定位根據(jù)大鼠形態(tài)、解剖以及生理特點(diǎn)，參照張露芬主編《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》穴位標(biāo)準(zhǔn)定位，“關(guān)元”：在大鼠臍(兩髂棘連線的中點(diǎn))下約25 mm處。2.4針刺方法針刺組和模型組在第10天注射縮宮素后，刺激量A組用Φ 0.25 mm×40 mm毫針針刺大鼠關(guān)元穴4～5 mm，且刺入即刻和留針10 min時(shí)分別施平補(bǔ)平瀉手法30 s；刺激量B組用Φ 0.18 mm×13 mm毫針針刺大鼠關(guān)元穴1～2 mm，不行手法。2組均留針20 min。模型組和鹽水組不予針刺處理。

2.5指標(biāo)檢測

2.5.1子宮收縮強(qiáng)度第10天注射苯甲酸雌二醇后，將大鼠予以肌注20%烏拉坦溶液，大鼠麻醉后，手術(shù)切開腹部，尋找子宮“Y”型交叉處，在一側(cè)子宮的分叉上1 cm處穿線，線的另一端連接于張力傳感器上，加0.1 g的負(fù)荷，用BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄儀記錄子宮的收縮波，首先記錄其在5 min內(nèi)的基礎(chǔ)波形，然后將2 U縮宮素滴在子宮上，繼續(xù)標(biāo)記，針刺組需分別標(biāo)記針刺即刻、針刺時(shí)、針刺20 min結(jié)束，停止標(biāo)錄，記錄子宮收縮波個(gè)數(shù)、子宮收縮波峰值及子宮活動(dòng)度(子宮收縮波個(gè)數(shù)×波峰峰值)。

2.5.2熒光定量法檢測子宮OTR水平的表達(dá)1)子宮組織提?。喝〈笫蟮淖訉m，稱重，放入EP管中，置液氮凍存5 min后，置于-80 ℃冰箱內(nèi)保存待測。2)RNA提?。篟NA 提取按 Trizol 提取試劑盒操作說明書進(jìn)行。EP管于室溫內(nèi)解凍1 h后,于自動(dòng)振蕩器上震蕩1 min后常溫放置10 min；加入0.2 mL氯仿，劇烈震蕩15 s，室溫孵育2～3 min；12 000 r/min離心15 min；取上清液至新 EP管內(nèi),加入0.5 mL異丙醇，顛倒混勻后，常溫靜置10 min，12 000 r/min離心10 min，棄上清液；75% 冷乙醇洗滌沉淀1次，7 500 r/min離心5 min，棄乙醇，空氣或真空干燥10 min；加 DEPC 處理水溶解RNA 10 min，提取的RNA純度由OD260/280鑒定。3)cDNA 制備：根據(jù)Promega ImProm-IITMReverse Transcription System試劑盒加入隨機(jī)引物及模板引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，在PCR儀上設(shè)置反應(yīng)條件為：25 ℃ 5 min；42 ℃1 h；70 ℃15 min，終止反應(yīng)取出。冰浴冷卻后置-20 ℃ 保存。4)熒光定量 PCR反應(yīng)：根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中OTR及β-actin基因序列，以Primer Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)引物，由北京生工生物工程(上海)股份有限公司合成(OTR引物上游5’-TTGCTGGGCGGTCTTCAT-3’下游5’-TCATCTTCACCGTGCGGATTT-3’產(chǎn)物長度269 bp；內(nèi)參β-actin引物上游5’-TCATGAAGTGTGACGTTGACATCCGTAAAG-3’下游5’-CGTAGAAGCATTTGCGGTGCACGATGGAGG-3’產(chǎn)物長度283 bp)。按以下反應(yīng)體系進(jìn)行:25 μL PCR反應(yīng)體系中含 Taq酶0.2 μL，10 xbuffer 2.5 μL,cDNA 4μL，dNTP 0.5 μL,上游引物0.5 μL,下游引物0.5μL,去離子水16.8 μL。擴(kuò)增條件為 95 ℃ 3 min 預(yù)變性,94 ℃ 30 s變性，(退火溫度)×30 s退火(OTR 58 ℃、β-actin 59 ℃)，72 ℃ 1 min延伸，共 40 個(gè)循環(huán)，最后是72 ℃延伸7 min。

2.6子宮中MLCK陽性水平表達(dá)的檢測采用ELISA(酶聯(lián)免疫法)測量大鼠子宮組織中MLCK的表達(dá)水平。嚴(yán)格按試劑盒說明書操作程序。

3結(jié)果

3.1不同刺激量針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠子宮收縮強(qiáng)度的影響見表1。

組 別收縮波個(gè)數(shù)/個(gè)波峰峰值/g活動(dòng)度/(個(gè)/g)鹽水組 6.00±3.63 0.13±0.05 0.75±0.41 模型組 12.75±4.43##0.36±0.25##4.23±2.42##刺激量A組7.88±2.36△ 0.32±0.21# 2.14±0.81##刺激量B組10.63±2.26#▲0.37±0.21##4.09±2.61##

注：與鹽水組比較，#P<0.05,##P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與刺激量A組比較，▲P<0.05

3.2不同刺激量針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠子宮OTR、MLCK的影響見表2。

組 別OTRmRNA相對(duì)表達(dá)量(2-△△Ct)MLCK/(pg/mg)鹽水組 4.59±0.92 9.13±1.69 模型組 3.50±10.84 12.69±1.75##刺激量A組4.69±1.40 10.49±0.93△△刺激量B組2.23±1.47##△▲▲11.29±1.32##

注：與鹽水組比較， ##P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與刺激量A組比較，▲▲P<0.01

4討論

痛經(jīng)是臨床上較為常見的婦科病之一[6]，而從中醫(yī)辨證角度分析，寒濕凝滯導(dǎo)致胞宮氣血瘀滯是目前臨床痛經(jīng)發(fā)病的主要病機(jī)之一[7-8]，本課題前期大量研究證實(shí)全身冷凍法加苯甲酸雌二醇聯(lián)合縮宮素可成功制備寒凝類痛經(jīng)模型大鼠，且該模型所表現(xiàn)的表征特點(diǎn)均較為符合中醫(yī)寒凝證的證候特征[9-10]。故本實(shí)驗(yàn)選擇寒凝類痛經(jīng)模型大鼠為研究媒介，探討不同刺激量對(duì)針刺療效的影響。

關(guān)元穴是任脈與足三陰經(jīng)的交會(huì)穴，具有培元固本、溫陽散寒、調(diào)補(bǔ)沖任的功效，臨床上多用于生殖系統(tǒng)疾病?！额惤?jīng)圖翼》中提到“此穴又名大中極，乃男子藏精，女子蓄血之處……主治積冷，諸虛百損，臍下絞痛，漸入陰中等。”此穴又為小腸之募穴，可集聚小腸經(jīng)氣血，傳導(dǎo)任脈水濕，可通利任脈，通則不痛?，F(xiàn)代臨床和實(shí)驗(yàn)研究[11-12]均表明，關(guān)元穴可有效改善經(jīng)期伴隨的一系列不適癥狀。因此本實(shí)驗(yàn)選擇針刺關(guān)元穴作為干預(yù)手段，初步探討不同刺激量對(duì)針刺療效的影響。

痛經(jīng)明顯的病理表現(xiàn)即為子宮平滑肌的異常收縮，這也是疼痛產(chǎn)生的主要原因之一。而在這一病理過程中，子宮平滑肌細(xì)胞上的縮宮素受體(OTR)可通過與縮宮素結(jié)合升高胞內(nèi)Ca+濃度，發(fā)揮收縮子宮平滑肌的作用。繼而Ca+濃度的改變可調(diào)控MLCK活性，使其磷酸化，引發(fā)肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白相互作用，從而起到使子宮平滑肌收縮的作用[13-14]。在這一連鎖反應(yīng)當(dāng)中，縮宮素受體(OTR)與肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)均是關(guān)鍵因素之一，隨著MLCK和OTR增加，肌絲運(yùn)動(dòng)速度增強(qiáng)，平滑肌收縮增強(qiáng)[15-16]。故本實(shí)驗(yàn)觀察OTR與MLCK陽性表達(dá)水平的變化特點(diǎn)，用以揭示不同刺激量下針刺對(duì)寒凝類痛經(jīng)的影響機(jī)制，并進(jìn)一步闡釋針刺刺激量對(duì)針刺效應(yīng)的影響。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：針刺關(guān)元穴可以明顯減少寒凝類痛經(jīng)模型大鼠的子宮收縮波個(gè)數(shù)，有效抑制子宮活動(dòng)度的異常增強(qiáng)。不同的刺激量下，子宮的收縮波、收縮波波峰峰值、子宮活動(dòng)度、子宮MLCK的含量均有不同程度的降低，提示針刺關(guān)元穴對(duì)子宮收縮強(qiáng)度具有一定的良性調(diào)節(jié)作用，并且刺激量A組的效應(yīng)表現(xiàn)優(yōu)于刺激量B組。然而在本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中OTR mRNA的相對(duì)表達(dá)量與實(shí)驗(yàn)結(jié)論呈現(xiàn)相反的表現(xiàn)趨勢(shì)，這種異常表現(xiàn)可能與子宮內(nèi)在調(diào)節(jié)機(jī)制有關(guān)，有關(guān)報(bào)道[17]曾提示，長時(shí)間的收縮素(OT)刺激會(huì)出現(xiàn)OTR脫敏現(xiàn)象，故而在機(jī)體調(diào)節(jié)中，也可能會(huì)因?yàn)殚L時(shí)間疼痛反應(yīng)的刺激，外加本實(shí)驗(yàn)造模過程中注射縮宮素，誘發(fā)此現(xiàn)象產(chǎn)生，導(dǎo)致OTR mRNA相對(duì)表達(dá)量呈現(xiàn)異常表達(dá)。也有可能因?yàn)樽訉m內(nèi)膜和子宮平滑肌均存在收縮素受體(OTR)，而不同的環(huán)境刺激會(huì)誘導(dǎo)縮宮素與不同位置的受體結(jié)合,故而不同的針刺條件下也可能誘發(fā)不同的調(diào)節(jié)途徑，導(dǎo)致OTR mRNA相對(duì)表達(dá)量表現(xiàn)不同[18],從而出現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)治療組OTR mRNA的差異結(jié)果。

綜上所述，分析認(rèn)為不同刺激量下針刺關(guān)元穴對(duì)寒凝類痛經(jīng)模型大鼠的效應(yīng)有所不同，粗針、深刺、行手法的療效較細(xì)針、淺刺、不行手法的針刺效應(yīng)佳，提示針刺的刺激量也是決定針刺療效的因素之一。

參考文獻(xiàn)：

[1]張素榮.針灸治療原發(fā)性痛經(jīng)的臨床療效觀察[J].臨床合理用藥雜志,2014,36(3):125-126.

[2]齊丹丹,張梅,郭孟瑋,等.不同針刺刺激量對(duì)寒凝證類痛經(jīng)模型大鼠中樞阿片受體影響的研究[J].針灸臨床雜志,2015,31(5):67-70.

[3]劉珍珍,張梅,齊丹丹,等.艾灸三陰交、關(guān)元對(duì)寒凝證類痛經(jīng)大鼠子宮收縮強(qiáng)度和OTR的影響[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2015,34(9):33-36.

[4]王琪,劉宏,陳丹,等.卡前列腺素誘導(dǎo)的小鼠離體痛經(jīng)模型優(yōu)化及其與縮宮素誘導(dǎo)模型的比較[C]//2013年全國醫(yī)藥學(xué)術(shù)交流會(huì)暨臨床藥學(xué)與藥學(xué)服務(wù)研究進(jìn)展培訓(xùn)班論文集.北京,2013.

[5]韓玉琢.中醫(yī)治療原發(fā)性痛經(jīng)臨床研究概況[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012,28(4):746.

[6]王婷婷,須義貞.痛經(jīng)中醫(yī)辨證治療[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,15(7):104-107.

[7]張玉珍.中醫(yī)婦科學(xué)[M].2版.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:18-19.

[8]申松希,張玲,朱世鵬,等.寒凝證類痛經(jīng)大鼠模型血液流變學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察[J].吉林中醫(yī)藥,2013,33(4):395-397.

[9]張玲,申松希,朱世鵬,等.寒凝證動(dòng)物模型的建立[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,37(3):248-250.

[10]宋云娥,薛曉倩,謝洪武,等.艾灸原發(fā)性痛經(jīng)熱敏高發(fā)穴關(guān)元穴改善月經(jīng)期常見伴隨癥狀的臨床初步研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2012,5(5):1228-1230.

[11]馬宗國,江南,邵欣,等.針刺三陰交 關(guān)元穴調(diào)經(jīng)止痛治療原發(fā)性痛經(jīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J].四川中醫(yī),2010,28(8):15.

[12]張文超,程忠平,徐麗珍,等.MLC及MLCK在子宮肌瘤組織中的表達(dá)及意義[J].中國婦幼保健,2013(18):2982.

[13]CHEN Chen,TAO Tao,WEN Cheng,et al.Myosin light chain kinase (MLCK) regulates cell migration in a myosin regulatory light chain phosphorylation-independent mechanism[J].The Journal of Biological Chemistry,2014,289(41):28478-28488.

[14]李德來,鄧為民,李宏釗.肌球蛋白輕鏈激酶對(duì)大鼠平滑肌細(xì)胞增殖的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2014,34(14):3952.

[15]GUO Sunwei,MAO Xiaoyan,MA Qingliang,et al.Dysmenorrhea and its severity are associated with increased uterine contractility and overexpression of oxytocin receptor (OTR) in women with symptomatic adenomyosis[J].Fertility and Sterility,2013,99(1):231-240.

[16]MAGALHAES J K,CARVALHO J C,PARKES R K,et al.Oxytocin pretreatment decreases oxytocin-induced myometrial contractions in pregnant rats in a concentration-dependent but not time-dependent manner[J].Reproductive Sciences (Thousand Oaks,Calif.),2009,16(5):501-508.

[17]徐影,趙艷暉,鄒穎剛,等.OTR、ER在子宮腺肌病中的表達(dá)及與痛經(jīng)的關(guān)系[J].中國婦幼保健,2012,27(12):1788-1790.

Different acupuncture stimulus at“Guanyuan(RN4)”on dysmenorrheal rats model with cold syndrome

CUI Xiao1,ZHOU Jin1,ZHANG Mei1,LIU Zhenzhen1,YANG Jiamin1,QI Dandan1,GUO Mengwei1,2,ZHAO Yafang1,2,LI Xiaohong1,REN Xiaoxuan1,2,ZHANG Lufen1,2*

(1.Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;2.Acupuncture Biology Ⅲ Laboratory of State Administration of TCM,Beijing 100029,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the analgesia mechanism of different acupuncture stimulus at “Guanyuan(RN4)” on dysmenorrheal rats model with cold syndrome by observing the concnet of contraction receptor (OTR) and myosin light streptokinase (MLCK) of uterine tissue in rats.MethodsThe 32 female SD rats at diestrus with 3 months aged were randomized into 4 groups,including a saline control group，a cold stagnation of dysmenorrheal model control group,an A stimuli group and a B stimuli group,with 8 rats in each group.Except the saline control group rats given intraperitoneal injection 0.9% Nacl,in the rest groups rats were treated with the whole body freezing method combined with estradiol benzoate injection mold.ResultsExcept the saline control group and model control group,the acupuncture groups acupunctured the RN4 point for 20 min after modeling,the A stimuli group needled acupoint with thick needle and insert deeper with manipulation;the B stimuli group with fine needle and insert shallowly without manipulation.Observe the OTR by Polymerase Chain Reaction (PCR) and MLCK by ELISA in uterine of 8 rats in each group.ConclusionDifferent acupuncture stimulus at RN4 on experimental cold syndrome of dysmenorrheal model rats have different effect,inserting deeper with thick needle and exerting manipulation is better than fine needle and inserting shallowly without manipulation.It indicate that different acupuncture stimulus is one of the vital factors to determine the acupuncture therapeutic efficacy.

Keywords：acupuncture therapy;point,Guanyuan,RN4;dysmenorrheal with cold syndrome;OTR;MLCK

(收稿日期:2015-10-09)

文章編號(hào)：2095-6258(2016)02-0241-04

中圖分類號(hào)：R246.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

*通信作者：張露芬，電話-13641280192，電子信箱-zhlufen@aliyun.com

作者簡介：崔曉(1989-)，女，碩士研究生，主要從事針灸的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究。

基金項(xiàng)目：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)資助項(xiàng)目(2012CB518506)；國家中醫(yī)藥管理局針灸特色療法評(píng)價(jià)重點(diǎn)研究室。

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.02.007