CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達(dá)及其意義

韓鴻雁　李曉兵　許春偉　張鳳霞　喬西平　陳　寧　韓　雙

225300 泰州市第二人民醫(yī)院(韓鴻雁);100071 解放軍307醫(yī)院(李曉兵,許春偉,張鳳霞,喬西平,陳　寧,韓　雙)

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CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達(dá)及其意義

韓鴻雁李曉兵許春偉張鳳霞喬西平陳寧韓雙

225300 泰州市第二人民醫(yī)院(韓鴻雁);100071 解放軍307醫(yī)院(李曉兵,許春偉,張鳳霞,喬西平,陳寧,韓雙)

【摘要】目的探討CD10和Bcl-6在Castleman病中的表達(dá)及其意義。方法收集經(jīng)病理診斷的Castleman病10例，反應(yīng)性淋巴組織增生13例，濾泡性淋巴瘤13例，其中包括手術(shù)切除標(biāo)本和活檢穿刺標(biāo)本，均應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測各組的CD10和Bcl-6的表達(dá)情況。結(jié)果CD10免疫組化染色結(jié)果顯示，Castleman病與反應(yīng)性淋巴組織增生差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)；Castleman病與濾泡性淋巴瘤差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)。Bcl-6免疫組化染色結(jié)果顯示，Castleman病與反應(yīng)性淋巴組織增生及濾泡性淋巴瘤差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)。結(jié)論CD10和Bcl-6可作為Castleman病的診斷及其與反應(yīng)性淋巴組織增生和濾泡性淋巴瘤鑒別診斷的免疫學(xué)標(biāo)志物。Castleman病的發(fā)病過程可能與Bcl-6基因異常有關(guān)；Bcl-6基因異?？赡苁荂astleman病形態(tài)學(xué)改變的基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】Castleman??；CD10；Bcl-6；病因與發(fā)病機(jī)制；診斷及鑒別診斷

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:377～379)

Castleman病(castleman's disease,CD)在1954年由Castleman等[1]描述為類似胸腺瘤的縱膈腫塊。CD的臨床表現(xiàn)具有異質(zhì)性，單一淋巴結(jié)或者全身淋巴結(jié)均可被累及，常發(fā)生于縱膈、腋窩和腹部，也可發(fā)生在咽部、胸膜、腎臟、胰腺和神經(jīng)系統(tǒng)[2-5]。單中心型CD是最常見的類型，在所有CD中大約占70%的比例，多中心型CD臨床較少見，它的臨床表現(xiàn)與但中型相比，更加復(fù)雜多變，多數(shù)病例呈現(xiàn)系統(tǒng)性癥狀，且預(yù)后較差。有報(bào)道稱UCD也具有潛在的惡變可能[6]。目前沒有特異性的免疫組化指標(biāo)可用于CD的診斷以及與其他疾病的鑒別診斷，所以探索可能的免疫組化指標(biāo)是非常有必要的。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)染色檢測CD10和BCL-6在Castleman病、反應(yīng)性淋巴組織增生(reactive lymphoid hyperplasia，RLH)及濾泡性淋巴瘤(follicular lymphoma，F(xiàn)L)三者中的表達(dá)情況，探討CD10和BCL-6在Castleman病中的作用及其意義。

1材料與方法

1.1材料

收集解放軍307醫(yī)院病理科2000年-2014年經(jīng)病理診斷的Castleman病10例(患者男女比為6∶4，年齡12～63歲，中位年齡42.5歲)，反應(yīng)性淋巴組織增生13例(其中12例為濾泡型，1例為漿細(xì)胞型，男女比為7∶6，年齡4～70歲，中位年齡58歲)，濾泡性淋巴瘤13例(男女比為10∶3，年齡43～77歲，中位年齡56歲)，包括手術(shù)切除標(biāo)本和活檢穿刺標(biāo)本。

1.2方法

標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，4 μm厚切片，常規(guī)HE染色，光鏡觀察。免疫組化染色采用Envision兩步法。兔抗人CD10單克隆抗體，鼠抗人BCL-6單克隆抗體，Envision兩步法檢測試劑盒均購自于北京中杉金橋公司。操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3結(jié)果判定

Bcl-6陽性區(qū)域?yàn)榘?，CD10陽性區(qū)域是細(xì)胞膜/質(zhì)。陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野，取平均值。按陽性細(xì)胞數(shù)占生發(fā)中心細(xì)胞比例分：<5%為(-)，5%～25%為(﹢)，26%～50%(﹢﹢)，>50%為(﹢﹢﹢)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用Fisher確切概率法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05(SPSS 16.0軟件)。

2結(jié)果

2.1CD10

CD患者中CD10表達(dá)均為生發(fā)中心陰性，RLH中CD10陽性率為61.54%(8/13)，F(xiàn)L中CD10陽性率為92.31%(12/13)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：CD10在CD與RLH中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)；CD10在CD與FL中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)，見表1。

2.2Bcl-6

CD患者中Bcl-6表達(dá)均為生發(fā)中心陰性，RLH中Bcl-6陽性率為84.62%(11/13)，F(xiàn)L中Bcl-6陽性率為76.92%(10/13)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：Bcl-6在CD與RLH中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)；Bcl-6在CD與FL中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)，見表1。

表1　CD10和Bcl-6在CD、RLH和

3討論

3.1CD10、Bcl-6在CD診斷與鑒別診斷中的作用及意義

目前仍未發(fā)現(xiàn)Castleman病特異性的診斷指標(biāo)。在病理和臨床的診斷工作中，常因?yàn)镃D的形態(tài)變異程度比較寬泛，然而鑒別診斷方法有限，特別是當(dāng)CD與惡性淋巴瘤或者其他類型的淋巴組織增生性疾病鑒別時(shí)，更容易產(chǎn)生組織病理學(xué)上診斷的分歧。該病難以早期診斷，并且極易誤診。①反應(yīng)性淋巴組織增生：淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)保存，在淋巴結(jié)的皮質(zhì)區(qū)濾泡較顯著，濾泡大小、形狀差異顯著，并伴有長形、成腳型和啞鈴型的形狀，反應(yīng)性生發(fā)中心境界清楚，無或僅有中毒的包膜和包膜周圍脂肪炎細(xì)胞浸潤，有輕微或無網(wǎng)織纖維支架的變化，濾泡反應(yīng)中心由淋巴細(xì)胞、組織細(xì)胞核王莊細(xì)胞組成，有少量或沒有不規(guī)則細(xì)胞或異形的胞核，反應(yīng)中心吞噬現(xiàn)象活躍，其中可見中度至明顯的分裂活性；反應(yīng)中心外分裂像不可見或者罕見，無非典型分裂像。②濾泡性淋巴瘤：正常結(jié)構(gòu)完全破壞，皮、髓質(zhì)均布滿濾泡，濾泡大小和形態(tài)有輕到中度的差異，濾泡呈衰減狀，包膜和包膜周圍脂肪大量浸潤，可有或無包膜外腫瘤性濾泡形成，濾泡周圍可有致密的網(wǎng)織纖維出現(xiàn)。濾泡由多型性和不規(guī)則細(xì)胞核的瘤細(xì)胞組成，無吞噬現(xiàn)象，分裂像比較缺乏，濾泡外其數(shù)量差異無顯著性；可出現(xiàn)非典型的分裂像，濾泡內(nèi)外的細(xì)胞類型相似。免疫組化染色及基因重排分析有助于CD的鑒別診斷[7]。CD的診斷和鑒別診斷一定要結(jié)合各方面檢查結(jié)果做出綜合性的考慮分析。

CD10是1種分子量在100kD左右的鋅依賴金屬蛋白酶，也被稱為急性淋巴母細(xì)胞性白血病共同抗原，它主要是在細(xì)胞膜上發(fā)揮其生物學(xué)功能，可滅活生物活性肽。CD10除了表達(dá)于在前B細(xì)胞和GCB細(xì)胞外，還表達(dá)與某些上皮的細(xì)胞，往往將CD10作為GC細(xì)胞的標(biāo)記物來使用[8]。此外，還可以作為1種分子標(biāo)記物來劃分急性白血病的分型，并對惡性淋巴瘤的次級(jí)分類起到重要作用。本研究中CD10在10例CD患者均為生發(fā)中心陰性，在RLH中表達(dá)為61.54%(8/13)，在FL中表達(dá)為為92.31%(12/13)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：CD10在CD與RLH之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)；在CD與FL之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)，結(jié)果提示CD10免疫組織化學(xué)染色在CD的診斷以及與RLH和FL鑒別診斷時(shí)可作為輔助指標(biāo)和依據(jù)。

Bcl-6表達(dá)于淋巴濾泡生發(fā)中心B細(xì)胞，也可表達(dá)于來源于GCB細(xì)胞的一些淋巴瘤中，Bcl-6在GC外的細(xì)胞中不表達(dá)。本研究中Bcl-6在10例CD患者均為生發(fā)中心陰性，在RLH中表達(dá)為84.62%(11/13)，在FL中表達(dá)為76.92%(10/13)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示：Bcl-6在CD與RLH之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001)；BCL-6在CD與FL之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000)。提示Bcl-6免疫組織化學(xué)染色在CD的診斷以及與RLH和FL鑒別診斷時(shí)可作為輔助的指標(biāo)和依據(jù)。

3.2Bcl-6在CD發(fā)病過程中的作用及意義

CD臨床較少見，導(dǎo)致了其臨床研究局限，目前對這種疾病的理解還不全面。其發(fā)病機(jī)制尚不明確，診治較困難。大量證據(jù)傾向免疫調(diào)節(jié)異常導(dǎo)致了淋巴組織中B細(xì)胞和漿細(xì)胞的過量增殖。目前的研究大多認(rèn)為CD可能與病毒感染如HHV-8、細(xì)胞因子調(diào)節(jié)異常，如IL-6表達(dá)升高，抗原呈遞細(xì)胞功能的異常及血管增生等有關(guān)[9]。 Bcl-6是1種轉(zhuǎn)錄抑制因子，位于3q27染色體，也稱之為LAZ3或BCL25基因，編碼一個(gè)鋅指蛋白，具有阻止細(xì)胞分化、凋亡，并促進(jìn)細(xì)胞增殖發(fā)育的作用。Bcl-6是淋巴系統(tǒng)重要的調(diào)節(jié)因子。在B細(xì)胞的發(fā)育過程中，Bcl-6參與調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞的分化、細(xì)胞周期發(fā)育的調(diào)控以及免疫反應(yīng)等重要功能，這些提示Bcl-6在B細(xì)胞的發(fā)育、成熟、生發(fā)中心的形成和淋巴細(xì)胞源性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。此外Bcl-6還可以阻斷BCR結(jié)合導(dǎo)致的B細(xì)胞活化過程及Blimp/PRDM1介導(dǎo)的B細(xì)胞向漿細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程。Bcl-6蛋白可通過抑制P53蛋白表達(dá)來避免生發(fā)中心細(xì)胞凋亡，保證生發(fā)中心形成和維持。目前認(rèn)為CD的發(fā)病與免疫調(diào)節(jié)異常有關(guān)；漿細(xì)胞型被認(rèn)為與感染和炎癥有關(guān)；還有人認(rèn)為CD是腫瘤前期病變。HV型CD有退行性轉(zhuǎn)化的生發(fā)中心，PC型CD病理上呈炎癥樣改變，臨床上有炎癥病變的征象。Bcl-6基因結(jié)構(gòu)的改變可能會(huì)影響到癌基因、抑癌基因、免疫系統(tǒng)發(fā)育基因以及與炎癥有關(guān)的趨化因子基因，這些基因的改變可引發(fā)上述一系列病理改變。Dent等[10]研究發(fā)現(xiàn)去除Bcl-6基因的小鼠B細(xì)胞和T細(xì)胞發(fā)育正常，但是不能形成生發(fā)中心，同時(shí)還伴有免疫缺陷和炎癥性疾病。本實(shí)驗(yàn)中Bcl-6在10例CD淋巴結(jié)活檢標(biāo)本生發(fā)中心均為陰性，與RLH及FL均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示CD的發(fā)病或許與BCL-6基因異常導(dǎo)致的調(diào)控失常有關(guān)，同時(shí)Bcl-6基因異?？赡苁荂D病理形態(tài)學(xué)改變的基礎(chǔ)，需要進(jìn)一步研究去證實(shí)。

參考文獻(xiàn)

[1]Castleman B,Towne VW.Case records of the Massachusetts General Hospital:Case No.40231〔J〕.N Engl J Med,1954,250(23):1001-1005.

[2]Moloney F,Twomey M,Hinchion J,et al.Castleman disease:an unexpected cause of a solitary pleural mass〔J〕.Case Rep Radiol,2013,2013:130515.

[3]Cecka F,Ferko A,Jon B,et al.Pancreatic Castleman disease treated with laparoscopic distal pancreatectomy〔J〕.Hepatobiliary Pancreat Dis Int,2013,12(3):332-334.

[4]隋燕霞,王鴻雁,楊喆,等.Castleman病合并腎臟損害5例臨床病理學(xué)分析〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2013,29(8):859-862.

[5]Turek G,Reszec J,Kochanowicz J,et al.A case of a solitary form of Castleman disease:ten-year follow-up〔J〕.Neurol Neurochir Pol,2013,47(2):179-183.

[6]Eszes N,Tamasi L,Csekeo A,et al.Unicentric mixed variant Castleman disease associated with intrabronchial plasmacytoma〔J〕.Diagn Pathol,2014,9:64.

[7]王琳,應(yīng)建明,薛麗燕,等.Castleman病基因重排分析及其在鑒別診斷中的應(yīng)用〔J〕.診斷病理學(xué)雜志,2013,20(7):397-400.

[8]Dogan A,Bagdi E,Munson P,et al.CD10 and BCL-6 expression in paraffin sections of normal lymphoid tissue and B-cell lymphomas〔J〕.Am J Surg Pathol,2000,24(6):846-852.

[9]韓瀟,周道斌.Castleman病的發(fā)病機(jī)制和治療進(jìn)展〔J〕.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2009,31(5):639-643.

[10]Dent AL,Shaffer AL,Yu X,et al.Control of inflammation,cytokine expression,and germinal center formation by BCL-6〔J〕.Science,1997,276(5312):589-592.

(編輯：吳小紅)

Expression and Significance of CD10 and BCL-6 in Castleman Disease

HANHongyan,LIXiaobing,XUChunwei,etal.

TaizhouSecondPeopleHospital,Taizhou,100071

【Abstract】ObjectiveTo explore the expression and significance of CD10 and BCL-6 in Castleman disease.Methods10 cases of Castleman disease,13 cases of reactive lymphoid hyperplasia and 13 cases of follicular lymphoma were selected.Which including surgical resection specimens and biopsy specimens.CD10 and BCL-6 expression were detected by immunohistochemical staining.Results Expression of CD10 was detected by immunohistochemical staining,there were statistically significant difference between Castleman's disease and reactive lymphoid hyperplasia (P=0.003);and there were statistically significant difference between Castleman's disease and follicular lymphoma (P<0.0001).Expression of Bcl-6 by immunohistochemical staining showed that there was statistically significant difference between Castleman's disease and reactive lymphoid hyperplasia and follicular lymphoma (P<0.0001).ConclusionCD 10 and Bcl-6 can be used as immunological markers in the diagnosis of Castleman's disease and differential diagnosis with reactive lymphoid hyperplasia and follicular lymphoma;The pathogenesis of Castleman’s disease may be associated with Bcl-6 gene abnormalities；Bcl-6 gene abnormality may be the basis of morphological changes in Castleman's disease.

【Key words】Castleman's disease;CD10;BCL-6;Etiology and pathogenesis;Diagnosis and differential diagnosis

(收稿日期2015-04-20修回日期 2015-10-08)

中圖分類號(hào)：R734.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-5930(2016)03-0377-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.03.009

通訊作者：李曉兵