KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性與石家莊市社區(qū)體檢人群肥胖超重現(xiàn)狀的相關(guān)性

張明明　劉　欣　張翠改　王　超　李亞麗　段瑞生　宋光耀

(河北省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北　石家莊　050051)

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KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性與石家莊市社區(qū)體檢人群肥胖超重現(xiàn)狀的相關(guān)性

張明明劉欣張翠改1王超2李亞麗3段瑞生4宋光耀5

(河北省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北石家莊050051)

〔摘要〕目的探討含鉀通道四聚化結(jié)構(gòu)域15(KCTD15)基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性與石家莊市社區(qū)人群肥胖的相關(guān)性。方法應(yīng)用2012～2013年河北省人民醫(yī)院體檢中心體檢人群調(diào)查資料，對(duì)97 588例18歲以上人群的超重、肥胖現(xiàn)狀及影響因素進(jìn)行流行病學(xué)分析。應(yīng)用直接測(cè)序法對(duì)其中4 500例人員(肥胖組人員3 500例、對(duì)照組人員1 000例)EDTA抗凝血KCTD15基因的多態(tài)性情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果體檢人群中男性體重指數(shù)(BMI)(27.61±11.48)kg/m2，女性BMI(24.76±11.58)kg/m2；男性腰圍(WC)(88.57±16.47)cm，女性WC(77.14±14.36)cm，女性BMI及WC隨年齡的增加而增大。男性BMI以35～44歲為最高，WC以55～64歲為最高。 超重、肥胖的現(xiàn)患率分別為41.97%和18.14%，男性(48.87%、22.10%)高于女性(33.84%、13.49%)(P<0.05)。基因多態(tài)性分析顯示，肥胖人群KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)GG及AG基因型明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；Logistic回歸分析顯示，基因型是BMI的獨(dú)立影響因素。結(jié)論石家莊市社區(qū)體檢人群超重和肥胖發(fā)生率明顯升高，這些人員肥胖超重與KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性有關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕體重指數(shù)；超重，肥胖；基因多態(tài)性；含鉀通道四聚化結(jié)構(gòu)域15基因

肥胖超重與猝死、高血壓、腦梗死、腦卒中、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化等心腦血管疾病、糖尿病、高脂血癥等疾病關(guān)系密切，超重和肥胖已經(jīng)成為危害人類健康的重要問題〔1〕，是引起糖尿病及其他心腦血管疾病的主要原因之一，而體重指數(shù)(BMI)是評(píng)估超重和肥胖的常用指標(biāo)。研究證明肥胖是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的疾病，遺傳因素在肥胖的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用〔1〕。國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)含鉀通道四聚化結(jié)構(gòu)域(KCTD15)基因與肥胖、代謝綜合征有關(guān)〔2，3〕，但該基因的SNP位點(diǎn)rs11084753與肥胖相關(guān)的報(bào)道很少。為了解石家莊市社區(qū)人群超重與肥胖發(fā)病率的分布特征及危險(xiǎn)因素，本研究分析2012～2013年在河北省體檢中心體檢的石家莊社區(qū)成年人超重及肥胖患病情況，進(jìn)行流行病學(xué)及基因多態(tài)性分析。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象2012年1月至2013年12月在河北省人民醫(yī)院體檢中心體檢的石家莊本地區(qū)人群共97 588例(≥18歲)，其中男52 784例，女44 804例，年齡18～76〔平均(46.59±7.85)〕歲，所有人員均為石家莊本地或在石家莊定居5年以上漢族居民。

1.2一般情況調(diào)查與方法測(cè)量身高、體重、腰圍(WC)、心率、血壓等，由體檢醫(yī)師填寫肥胖流行病學(xué)調(diào)查表，內(nèi)容包括：籍貫、居住時(shí)間、飲食習(xí)慣、體力活動(dòng)、吸煙史、飲酒史、既往病史、家族史等；體檢醫(yī)師均經(jīng)過統(tǒng)一培訓(xùn)。

1.3診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)2002年中國(guó)成人BMI分類建議標(biāo)準(zhǔn)〔4〕：體重指數(shù)(BMI)<24 kg/m2為正常體重、24 kg/m2≤BMI<28 kg/m2為超重，BMI≥28 kg/m2為肥胖。

1.4KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性分析在BMI≥28 kg/m2的肥胖人群中隨機(jī)選取3 500例，同時(shí)選取性別、年齡匹配的正常對(duì)照組1 000例，直接測(cè)序法對(duì)KCTD15基因的rs11084753位點(diǎn)進(jìn)行多態(tài)性分析。

1.4.1基因組DNA提取乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血400 μl按照天根血液基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)說明書提取基因組DNA。

1.4.2PCR擴(kuò)增KCTD15基因片段引物設(shè)計(jì)采用生物學(xué)軟件Primer5.0，并與GenBank進(jìn)行比對(duì)。引物序列為上游5＇-GAACAACCCAAATCCCCATC-3＇，下游5＇-ACAGGCACCCACCACCAC-3＇。PCR反應(yīng)體系：共20 μl，包括：DNA模板1 μl，上下游引物各1 μl，KOD plus 0.5 μl，Buffer 2 μl，dNTP混合物1 μl，雙蒸水13.5 μl。PCR反應(yīng)采用降落聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，反應(yīng)條件見參考文獻(xiàn)〔5〕。

1.4.3核苷酸序列分析將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物純化后直接測(cè)序。為保證測(cè)序結(jié)果的可靠性，均雙向測(cè)序。測(cè)定結(jié)果用DNAMAN軟件(V6.0.3.99漢化版)與GenBank公布的KCTD15基因序列進(jìn)行比對(duì)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)；使用單因素及多因素Logistic回歸分析基因型和肥胖的關(guān)系。

2結(jié)果

2.1不同性別、年齡的體檢人群BMI及WC情況體檢人群中男性BMI(27.61±11.48)kg/m2，女性BMI(24.76±11.58)kg/m2；男性WC(88.57±16.47)cm，女性WC(77.14±14.36)cm，女性BMI及WC隨年齡的增加而增大，各年齡組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。以75～76歲組達(dá)到最高，75～76歲組與其他各年齡組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。男性的BMI以18～34歲組為最低，35～44歲組為最高，以后隨年齡的增加有所下降，35～44歲組與其他各年齡組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；WC以55～64歲組為最高，其他年齡組略有下降，以18～34歲組為最低。55～64歲組與其他各年齡組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表1。

2.2超重、肥胖現(xiàn)患率情況體檢人群中超重、肥胖現(xiàn)患率分別為41.97%、18.14%。男性的超重率48.87%、肥胖率22.10%，女性的超重率為33.84%、肥胖率為13.49%，男性明顯高于女性(均P<0.05)；男性的超重率在各年齡組間差異顯著(均P<0.05)，以35～44歲組為最高，18～34歲組為最低，45～54歲組位居第二，55～64歲組更次之，65歲以后明顯下降，35～44歲組與其他各年齡組間差異顯著(均P<0.05)、45～54歲組與其他各年齡組間差異(均P<0.05)；女性超重率在各年齡組間差異顯著(均P<0.05)，而且女性的超重率隨年齡的增加而逐漸升高，以65～74歲組最高，75歲以后略有下降，65～74歲組與其他各年齡組間差異顯著(均P<0.05)。男性的肥胖率隨年齡的增加而逐漸下降，以35～44歲組為最高，75～組最低，35～44歲組與其他各年齡組間差異顯著(均P<0.05)；而女性的肥胖率則隨年齡的增加逐漸升高，以75～76歲組為最高，達(dá)22.32%，為18～34歲年齡組(5.41%)的4倍多，是35～44歲年齡組(10.44%)的2倍多。各年齡組間差異顯著，75～76歲組與其他各年齡組間的差異顯著(均P<0.05)。見表2。

2.3KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性分析PCR產(chǎn)物純化后送往北京三博遠(yuǎn)志公司進(jìn)行雙向測(cè)序。測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)存在等位基因A和G，基因型分為AA、AG、GG三種類型(圖1)。

表1　2012～2013年體檢人群各年齡組BMI、WC情況

與其他年齡組比較：1)P<0.05，表2同

表2　2012～2013年體檢人群超重、肥胖的現(xiàn)患率情況〔n(%)〕

圖1　KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性分析的測(cè)序結(jié)果

2.4KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)基因多態(tài)性分析結(jié)果rs11084753位點(diǎn)在正常人群中的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P=0.231)。等位基因G在肥胖組的頻率為0.23，明顯高于等位基因G在對(duì)照組中的頻率0.095(P<0.05)。肥胖組的AG及GG基因型明顯高于對(duì)照組(P<0.05)(表3)。

表3　KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)基因型和等位基因頻率的分布情況〔n(%)〕

與對(duì)照組比較：1)P<0.05

2.5KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性與BMI的關(guān)系將所有進(jìn)行基因多態(tài)性分析的人員作為整體進(jìn)行分析，以BMI作為應(yīng)變量(Y)，以性別、年齡、WC、心率、血壓、KCTD15基因型(AA=0，AG=1，GG=2)為自變量(X)進(jìn)行單因素及多因素Logistic回歸分析，發(fā)現(xiàn)基因型GG(β=0.975,SE=0.345,Wald=9.412,df=1,OR=3.57，95%CI1.837～7.469,P=0.002)是肥胖的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

3討論

肥胖與高脂血癥、腫瘤、糖尿病、高血壓、肝臟疾病等密切相關(guān)，它們之間相互影響，相互促進(jìn)。肥胖已經(jīng)成為誘發(fā)和加重心腦血管疾病的重要致病因素，截至2010年，全國(guó)18歲及以上居民超重率達(dá)到30.6%，肥胖率達(dá)到12%〔6〕。且我國(guó)目前農(nóng)村的超重及肥胖率也處于上升趨勢(shì)〔7～9〕。因此，研究和分析與肥胖相關(guān)的因素及相互關(guān)系對(duì)改善居民整體健康狀態(tài)有重要意義。

本研究發(fā)現(xiàn)2012～2013年兩年在我院體檢中心體檢的近10萬體檢人群中，超重和肥胖的現(xiàn)患率分別為41.97%、18.14%，超重率接近于體檢人數(shù)的1/2，肥胖率為體檢人群的1/6，遠(yuǎn)超過2010年公布的全國(guó)水平?？梢姡嘏c肥胖現(xiàn)患率已經(jīng)成為威脅石家莊社區(qū)居民身體健康的重要危險(xiǎn)因素之一。從分布特點(diǎn)來看，男性的超重率、肥胖率均明顯高于女性；男性超重率和肥胖率均以35～44歲為最高，45～54歲僅次之，隨年齡的增加略有下降，可見男性超重、肥胖有年輕化的趨勢(shì)，中青年已經(jīng)成為男性肥胖的主要人群。其原因可能與不良飲食習(xí)慣過多、體力活動(dòng)和體育鍛煉過少有關(guān)。而隨著年齡的增加，多種因素造成不良習(xí)慣減少，也就出現(xiàn)了肥胖率隨年齡的增加而有所下降。而女性的超重率和肥胖率隨年齡的增加而逐漸升高，超重率以65～74歲達(dá)到最高(45.37%)，而肥胖率以75歲以后為最高，達(dá)22.32%，為18～34歲年齡組(5.41%)的4倍。由此可見超重和肥胖已經(jīng)嚴(yán)重威脅到女性中老年人的身心健康，中老年女性的肥胖現(xiàn)狀更應(yīng)該得到注視。此外，本研究發(fā)現(xiàn)女性BMI的變化趨勢(shì)與WC的變化趨勢(shì)基本一致；但男性WC的變化趨勢(shì)與BMI略有不同：男性的BMI和WC均以18～34歲組為最低，BMI以35～44歲為最高，以后隨年齡的增加下降，而WC以55～64歲為最高，其他年齡組則有所降低。究其原因可能與工作、勞動(dòng)的強(qiáng)度，經(jīng)濟(jì)狀況及進(jìn)行體育鍛煉的時(shí)間等有關(guān)。

KCTD15基因位于19q13.11，編碼含鉀通道四聚化結(jié)構(gòu)域15。KCTD15主要作用是調(diào)節(jié)能量平衡與能量動(dòng)態(tài)平衡，可能會(huì)通過中樞神經(jīng)影響肥胖〔2〕。研究證實(shí)KTCD15基因與肥胖發(fā)生有關(guān)〔10〕。KCTD15基因的rs11084753、rs29941位點(diǎn)突變與肥胖有關(guān)〔11〕。本研究證明KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)的多態(tài)性與肥胖密切相關(guān)。但這種關(guān)系還需要進(jìn)一步深入研究進(jìn)行確定。

本研究發(fā)現(xiàn)石家莊地區(qū)超重和肥胖的患病率處于一個(gè)較高的水平，對(duì)社區(qū)人群的身體健康有存在明顯危害。本研究還發(fā)現(xiàn)KCTD15基因rs11084753位點(diǎn)多態(tài)性與肥胖關(guān)系密切，但具體情況還需要深入分析。

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〔2014-10-09修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢(mèng)園)

〔中圖分類號(hào)〕R589.2

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)06-1351-04；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.06.031

通訊作者：宋光耀(1958-)，男，主任醫(yī)師，教授，博士，博士生導(dǎo)師，主要從事內(nèi)分泌疾病的基礎(chǔ)與臨床研究。

1體檢中心2科研中心3三優(yōu)中心

4神經(jīng)內(nèi)科5內(nèi)分泌科

第一作者：張明明(1976-)，女，副主任技師，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事內(nèi)分泌疾病的基因研究。