周圍型肺鱗癌和腺癌MSCT征象與CD147和VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性研究

吳強(qiáng)

（宜昌市夷陵醫(yī)院放射科，湖北 宜昌 443100）

?胸部影像學(xué)?

周圍型肺鱗癌和腺癌MSCT征象與CD147和VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性研究

吳強(qiáng)

（宜昌市夷陵醫(yī)院放射科，湖北 宜昌 443100）

目的：探討周圍型肺鱗癌和腺癌MSCT征象與CD147和VEGF-C表達(dá)的關(guān)系。方法：收集42例經(jīng)病理證實(shí)且術(shù)前行MSCT掃描的周圍型肺鱗癌和腺癌，運(yùn)用免疫組織化學(xué)PV法檢測(cè)其CD147和VEGF-C的表達(dá)，分析CT征象與CD147、VEGF-C陽性表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果：CD147、VEGF-C的表達(dá)與腫瘤的大小、深分葉征、棘突征和肺門縱隔淋巴結(jié)腫大均為正相關(guān)。此外CD147與胸膜外脂肪線消失正相關(guān)；VEGF-C與血管集束征正相關(guān)。結(jié)論：CD147、VEGF-C的表達(dá)與腫瘤大小、深分葉征、棘突征和肺門縱隔淋巴結(jié)腫大呈正相關(guān)，為提高對(duì)周圍型肺鱗癌和腺癌CT征象形成的分子生物學(xué)機(jī)制的認(rèn)識(shí)提供幫助。

肺腫瘤；腺癌；體層攝影術(shù)，螺旋計(jì)算機(jī)

肺癌現(xiàn)已成為我國成年人惡性腫瘤的主要死亡原因，早期診斷與規(guī)范精準(zhǔn)治療是提高肺癌生存率的主要途徑。而MSCT能準(zhǔn)確、全面反映周圍型肺癌生長(zhǎng)特性和轉(zhuǎn)移征象，是目前診斷肺癌的最佳影像學(xué)檢查方法。周圍性肺癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移受到多個(gè)基因和生物學(xué)分子的調(diào)控；文獻(xiàn)報(bào)道[1-2]CD147又稱細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)物和VEGF-C在非小細(xì)胞肺癌的侵襲與轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。本研究運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)42例周圍型肺鱗癌和腺癌CD147、VEGF-C的表達(dá)水平并與其術(shù)前MSCT征象對(duì)照，旨在探討周圍型肺鱗癌和腺癌CT征象與CD147、VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2003年7月—2007年3月經(jīng)胸外科行手術(shù)切除、術(shù)前行CT檢查并經(jīng)病理證實(shí)的42例術(shù)前未經(jīng)化療、放療的周圍型非小細(xì)胞肺癌患者，其中男33例，女9例。年齡28～78歲，平均58.2歲。病理組織學(xué)類型：鱗癌32例，腺癌10例。分化程度：高中分化28例，低分化14例。全部標(biāo)本均為石蠟切片，切片厚度4 μm。

1.2 試劑

兔抗人CD147多克隆抗體，兔抗人VEGF-C多克隆抗體及PV系列工作液試劑盒均從北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司購買。

1.3 CD147和VEGF-C免疫組化測(cè)定方法

免疫組化采用PV法染色，按照廠家提供的說明書進(jìn)行操作。

1.4 CD147和VEGF-C結(jié)果判定

CD147以細(xì)胞膜和/或細(xì)胞質(zhì)呈黃色為陽性，VEGF－C陽性染色主要為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。每張切片隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野（400倍），每個(gè)視野計(jì)數(shù) 100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞數(shù)。CD147、VEGF-C分別按照許良中和楊文濤[3]和Tang等[4]的評(píng)判方法和標(biāo)準(zhǔn)來判定結(jié)果。

1.5 CT掃描技術(shù)

使用GE公司 light speed Qx/i CT機(jī)，常規(guī)肺部掃描，厚層5mm，層距5mm。肺窗觀察腫瘤邊緣征象及肺野變化，縱隔窗觀察腫瘤邊緣征象、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、縱隔和肺門淋巴結(jié)情況。CT征象評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[5]，淋巴結(jié)腫大以淋巴結(jié)短徑≥10mm作為CT診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析，用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)對(duì)等級(jí)資料進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。統(tǒng)計(jì)學(xué)意義水平設(shè)為P≤0.05。

2 結(jié)果

CD147和VEGF-C在周圍型肺鱗癌和腺癌中的表達(dá)與CT征象之間的關(guān)系見表1。在本組周圍型肺鱗癌和腺癌病例CT征象中，腫瘤直徑＞3.0cm、深分葉征、棘突征及肺門縱隔淋巴結(jié)腫大與CD147和VEGF-C的陽性表達(dá)均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。而與毛刺征、空洞征均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。CD147的表達(dá)與胸膜外脂肪線消失有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），VEGF-C的表達(dá)與血管集束征有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，圖1～8）。

表1 CT征象與CD147和VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

3 討論

惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移是受多因素影響的復(fù)雜過程，包含腫瘤細(xì)胞的無序增殖、從原發(fā)灶分離、黏附和降解腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)向周圍組織浸潤(rùn)和/或進(jìn)入血管和淋巴系統(tǒng)向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等多個(gè)步驟。其中腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)的降解和新生淋巴管和血管的形成均為惡性腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié)。文獻(xiàn)報(bào)道CD147可刺激其周圍的纖維母細(xì)胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶 （MMPs），通過水解Ⅳ型膠原蛋白破壞腫瘤細(xì)胞周圍的基底膜和在RNA及蛋白質(zhì)兩種水平上調(diào)節(jié)VEGF的產(chǎn)生而影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[6-7]。VEGF-C既可特異性作用于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)腫瘤淋巴管生成，促進(jìn)腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移；也可促進(jìn)腫瘤血管生成及腫瘤血行轉(zhuǎn)移。其表達(dá)水平與腫瘤血管生成及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[8-9]。CD147、VEGFC現(xiàn)已證實(shí)為在腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過程中具有重要作用的生物學(xué)分子。肺癌的浸潤(rùn)生長(zhǎng)所表現(xiàn)出的形態(tài)特征在腫瘤個(gè)體之間具有一定的共性，可能是受到一種或數(shù)種相同生物學(xué)分子作用的結(jié)果。CT掃描是目前公認(rèn)的早期發(fā)現(xiàn)和診斷肺癌最有價(jià)值的影像學(xué)檢查方法，能全面反映肺癌的發(fā)生部位、大小、形態(tài)、瘤體內(nèi)部表現(xiàn)、鄰近組織結(jié)構(gòu)的改變及轉(zhuǎn)移等。將周圍性肺癌的影像學(xué)特征與免疫病理相結(jié)合，分析周圍型肺癌CT掃描表現(xiàn)出的一些具有相對(duì)共性特征與CD147、VEGF-C之間聯(lián)系，可以進(jìn)一步拓展對(duì)周圍型肺癌CT征象形成的生物學(xué)分子機(jī)制的認(rèn)識(shí)。

圖1～4 同一病例右上肺腺癌，圖1：CD147陽性（+++），圖2：VEGF-C陽性（++），圖3，4：CT肺窗和縱隔窗，示腫瘤呈深分葉，邊緣呈棘狀突起和毛刺，并有縱隔淋巴結(jié)腫大。Figure 1～4. Same case.Right upper lung adenocarcinoma.Figure 1:CD147 positive(+++),Figure 2:VEGF-C positive(++),Figure 3,4: CT lung and mediastinum window,shows the tumor deep lobulationin,spinous protuberant,spiculation and mediastinal lymph node enlargement.

圖5～8 同一病例左上肺鱗癌，圖5：CD147陽性（++），圖6：VEGF-C陽性（+++），圖7，8：CT肺窗和縱隔窗，可見腫瘤邊緣毛刺、棘突及胸膜外脂肪線消失，且見空泡征。Figure 5～8. Same case.Left lung squamous cell carcinoma.Figure 5:CD147 positive(++).Figure 6:VEGF-C positive(+++),Figure 7,8:Of CT lung and mediastinum window,shows the tumor edge spiculation,spinous protuberance and extrapleural fat line disappeared,and bronchus encapsulated air sign.

3.1 瘤體大小與CD147、VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示腫瘤直徑＞3.0cm組，CD147、VEGF-C的表達(dá)明顯高于直徑≤3.0cm組。表示瘤體＞3.0cm的肺癌組織中CD147、VEGF-C這兩種蛋白質(zhì)的含量較瘤體＜3.0cm時(shí)明顯增加，說明瘤體越大，CD147、VEGF-C在腫瘤組織中的陽性表達(dá)率越高，CD147、VEGF-C在腫瘤組織中的陽性表達(dá)與瘤體大小呈正相關(guān)。

3.2 瘤體邊緣表現(xiàn)與CD147、VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

肺癌瘤體邊緣CT多表現(xiàn)為以下幾種形式：①深分葉征：為瘤體邊緣呈凹凸不平的多個(gè)半弧形，弦距與弦長(zhǎng)之比≥0.4。②棘突征：在CT縱隔窗表現(xiàn)為自腫瘤邊緣突向肺野，形態(tài)介于分葉與毛刺之間呈尖角樣的棘狀突起。③毛刺征：在CT肺窗為自腫瘤邊緣向周圍肺伸展，呈毛刷狀或暈狀。本研究顯示有深分葉征、棘突征的病例CD147、VEGF-C的陽性表達(dá)顯著增高。形成深分葉的病理原因可能由于瘤體各部分生長(zhǎng)速度快慢不一，也可能與腫瘤生長(zhǎng)過程中受肺的結(jié)締組織間隔和血管支氣管阻擋引起腫瘤生長(zhǎng)局部受限有關(guān)；表明位于腫瘤邊沿分葉部位的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)更活躍，增殖速度更快。對(duì)周圍型非小細(xì)胞肺癌的診斷有非常重要的價(jià)值。棘突征代表腫瘤細(xì)胞在血管周圍的結(jié)締組織內(nèi)浸潤(rùn)和沿淋巴管蔓延，是腫瘤發(fā)育的先端部位，被認(rèn)為是分葉的一部分。CD147、VEGF-C的表達(dá)增高表明 CD147、VEGF-C可能參與了腫瘤細(xì)胞的快速增殖和向周圍組織浸潤(rùn)蔓延。本研究結(jié)果分別與孫鵬[10]和王雪芹等[11]在研究肺腺癌CT征象與CD147、VEGF-C表達(dá)的結(jié)果一致。毛刺征在高分辨CT掃描檢出率較高。一般認(rèn)為肺腫塊周圍見毛刺影高度提示惡性。但本研究結(jié)果未顯示CD147、VEGF-C的表達(dá)與毛刺征形成的相關(guān)性；與孫鵬和王雪芹等的研究結(jié)果不一致，可能與本組肺鱗癌病例較多或其他因素影響，尚待進(jìn)一步研究闡明。

3.3 瘤體內(nèi)部結(jié)構(gòu)影像學(xué)變化與CD147、VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

CT平掃時(shí)在肺癌瘤體內(nèi)常見空洞征、空泡征、空氣支氣管征與鈣化等，本文選取空洞征作為研究對(duì)象。肺癌空洞CT表現(xiàn)為厚壁或厚薄不均，壁厚約0.5～3.0cm，內(nèi)壁凹凸不平或有壁結(jié)節(jié)，外壁為波浪狀或分葉狀，空洞多為偏心性?？斩幢诘暮穸群捅诮Y(jié)節(jié)對(duì)良、惡性病變的鑒別有一定的意義。本研究結(jié)果顯示CD147、VEGF-C與空洞的形成無相關(guān)性。

3.4 瘤體鄰近組織表現(xiàn)與CD147、VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

血管集束征和胸膜外脂肪線消失是周圍型肺癌瘤體鄰近組織常見的CT征象。血管集束征形成的病理基礎(chǔ)是由于瘤組織向周圍血管支氣管鞘或小葉間隔浸潤(rùn)生長(zhǎng)和瘤體內(nèi)部纖維化以及瘢痕形成致使瘤體周圍肺結(jié)構(gòu)塌陷皺縮牽拉鄰近血管向瘤體集中所致[12-13]。本研究結(jié)果顯示CD147與血管集束征無明顯相關(guān)性，但VEGF-C的表達(dá)與該征象形成呈正相關(guān)。VEGF-C是特異性促進(jìn)腫瘤淋巴管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，因此作者推測(cè)血管集束征的組成可能有新生淋巴管的參與，特別是近肺門側(cè)的血管集束征，這有待進(jìn)一步病理研究證實(shí)。周圍型肺癌可侵犯鄰近胸膜和胸膜外脂肪引起鄰近胸膜肥厚、凹陷和/或胸膜外脂肪線變窄模糊甚至消失,其中以胸膜外脂肪線消失為最主要表現(xiàn)。出現(xiàn)此征象提示瘤細(xì)胞已浸潤(rùn)壁層胸膜，其臨床TNM分期已達(dá)T3期，因而它能為判斷周圍型肺癌的惡性度及臨床分期提供有價(jià)值的依據(jù)。本研究結(jié)果顯示CD147與胸膜外脂肪線的消失有顯著相關(guān)性。而VEGF-C的表達(dá)與此征象無明顯相關(guān)性。表明CD147的高表達(dá)與周圍型肺癌臨床分期密切相關(guān)。

3.5 縱隔淋巴結(jié)腫大與CD147、VEGF-C表達(dá)的關(guān)系

CT是判斷肺門縱隔淋巴結(jié)腫大的重要檢查方法，通常將淋巴結(jié)短徑≥10mm作為判斷淋巴結(jié)腫大的標(biāo)準(zhǔn)，考慮有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能。本研究結(jié)果顯示有肺門縱隔淋巴結(jié)腫大組的CD147、VEGF-C的表達(dá)高于無肺門縱隔淋巴結(jié)腫大組，兩者有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明CD147、VEGF-C兩者參與了促進(jìn)淋巴結(jié)腫大轉(zhuǎn)移的過程。

綜上所述，周圍型肺鱗癌和腺癌的深分葉征、棘突征、肺門縱隔淋巴結(jié)腫大與CD147、VEGF-C的陽性表達(dá)有明顯相關(guān)性。表明CD147、VEGF-C參與和促進(jìn)了上述CT征象的形成過程，為進(jìn)一步提高對(duì)周圍型肺癌CT征象形成的分子生物學(xué)機(jī)制的認(rèn)識(shí)提供了幫助。

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Correlation study of MSCT and CD147 and VEGF-C expression in peripheral lung squamous cell carcinoma and adenocarcinoma

WU Qiang
(Department of Radiology,Yichang City Yiling Hospital,Yichang Hubei 443100,China)

Objective:To investigate the relationship between the expression of VEGF-C and CD147 and MSCT in peripheral lung squamous cell carcinoma and adenocarcinoma.Methods:Forty-two cases of peripheral lung squamous cell carcinoma and adenocarcinoma were collected,which were confirmed by pathology and MSCT scan before operation.The expression of CD147 and VEGF-C were detected by immunohistochemistry PV,and analyze the correlation between the expression of CT and CD147 and VEGF-C.Results:The expression of VEGF-C and CD147 was positively correlated with the tumor size,deep sub leaf sign,the protrusion of the spine and the mediastinal lymph nodes in the hilar and mediastinal lymph nodes.In addition,CD147 was positievely correlated with the disappearance of the extrapleural fat lines;VEGF-C was positively correlated with vascular bundle sign.Conclusion:CD147, VEGF-C expression were positively correlated with the tumor size, depth lobulation, spinous protuberance and hilar and mediastinal lymph nodes, which could improve the understanding of molecular mechanism on the formation of peripheral pulmonary squamous cell carcinoma and adenocarcinoma of the CT signs.

Lung neoplasms;Adenocarcinoma;Tomography,spiral computed

R734.2；R814.42

A

1008－1062（2016）11－0784－04

2016－01－11；

2016－05－06

吳強(qiáng)（1964-），男，湖北宜昌人，副主任醫(yī)師。E-mail：ylyyfsk520@126.com

吳強(qiáng)，宜昌市夷陵醫(yī)院放射科，443100。E-mail：ylyyfsk520@126.com