• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    現(xiàn)代基因定位技術簡介

    2016-04-10 06:00:02于偉東
    生物學教學 2016年7期
    關鍵詞:雜種體細胞探針

    于偉東

    (內(nèi)蒙古赤峰市元寶山區(qū)平煤高級中學 024076)

    基因定位(gene mapping)是指利用一定的方法將一個基因確定到染色體上的實際位置。基因定位與基因組作圖、基因克隆的關系十分密切。將基因定位在染色體的某一位置上之后,其本身就可作為基因組作圖時的一個界標。

    同時,當在基因組圖譜上確定某一基因所在的位置后,就可以按圖來分離克隆基因。因此,基因定位是基因組研究的一個重要組成部分。

    1 體細胞雜交定位

    離體培養(yǎng)的親緣關系較遠的動物體細胞相互融合后,雜種細胞往往會排除一種親本細胞的染色體。例如,人和小鼠的體細胞在細胞質(zhì)和細胞核均合二為一后,這種雜種細胞每分裂一次,就排除人的一些染色體。經(jīng)過若干次分裂后,雜種細胞在丟失了人的一部分染色體后達到相對穩(wěn)定的狀態(tài)。這時雜種細胞包含了小鼠的全套染色體和人的一條或幾條染色體。當一些雜種細胞所含的人的染色體,加在一起涵蓋了人的全部染色體,即22條常染色體以及X和Y染色體時,這些雜種細胞就構成了整套雜種細胞系,可用于人的基因定位。

    例如,利用染色體缺失進行定位。此法無需從患者體內(nèi)獲得染色體異常的相關細胞,而是用人工方法在體外造成雜種細胞內(nèi)特定染色體的不同位置發(fā)生斷裂,形成各種類型的末端缺失,獲得一套特定染色體缺失的雜種細胞。然后,通過檢測缺失雜種細胞內(nèi)基因產(chǎn)物的存在與否進而對許多基因進行區(qū)域定位。1986年,復旦大學遺傳研究所利用該法,將編碼乙醇脫氫酶基因首先定位在染色體的相應位置上。

    2 原位雜交定位

    原位雜交定位是分子水平和染色體水平相結合的基因定位方法。將待定位基因的特定DNA序列、該基因轉錄產(chǎn)生的RNA分子或RNA分子經(jīng)反轉錄產(chǎn)生的cDNA作為探針,在標記放射性同位素或非放射性的化學物質(zhì)后,與變性的染色體DNA分子雜交,該探針就會同染色體DNA中與其互補的核苷酸序列結合成為雙鏈。

    通過放射自顯影技術或顯色技術,可顯示標記過的探針在染色體上的相應位置,從而達到基因定位的目的。

    3 輻射雜種細胞基因定位

    這是雜種細胞基因定位法的發(fā)展,其基本原理是:人-鼠雜種細胞中的人染色體是經(jīng)射線處理后殘留下來的帶有著絲粒的染色體片段,不同的雜種細胞帶有人的不同染色體的不同長度的片段。在進行基因定位時,如果待測基因出現(xiàn)在殘留的某個長片段上,而在比該長片段更短一些的片段上卻消失不見了,就可把該基因定位在長片段變成短片段時所丟失的那個區(qū)域內(nèi),這樣的基因定位更為精細。為此,需要建立一系列含有不同長度的人的各條染色體的雜種細胞。目前常用的方法是:先利用PCR技術來確定哪條染色體或哪條染色體片段的DNA中,含有待定位的基因,然后用電腦軟件分析數(shù)據(jù),將待測基因定位在染色體的某一位置上。

    4 克隆基因定位法

    采用已克隆基因的cDNA探針與保留在雜種細胞內(nèi)的人染色體DNA按順序進行分子雜交,以此來確定克隆基因所在的染色體。

    例如,要定位人體白蛋白基因,需要應用人體白蛋白基因cDNA作為探針,分別與經(jīng)過HindⅢ酶切后的人體細胞和中國倉鼠卵巢細胞(CHO)雜交。雜交后的人體細胞DNA顯示6.8 kb帶型,CHO細胞的DNA顯示3.5 kb帶型。進一步在含有人體4號染色體的人-CHO雜種細胞中,用HindⅢ酶切后,再與白蛋白基因的cDNA探針雜交,如果出現(xiàn)6.8 kb和3.5 kb帶型者,為陽性雜種細胞;而不含有人體第4號染色體的雜種細胞中只顯示3.5 kb帶型,為陰性細胞。由于人體白蛋白基因的cDNA探針的特異性,HindⅢ雜交帶只出現(xiàn)在含有人體4號染色體的雜種細胞中,所以將此基因定位在4號染色體上。

    猜你喜歡
    雜種體細胞探針
    湖羊及其雜種生產(chǎn)性能和瘤胃微生物差異研究
    中國飼料(2022年5期)2022-04-26 13:42:38
    浙江:誕生首批體細胞克隆豬
    新型冠狀病毒入侵人體細胞之謎
    科學(2020年4期)2020-11-26 08:27:10
    多通道Taqman-探針熒光定量PCR鑒定MRSA方法的建立
    BOPIM-dma作為BSA Site Ⅰ特異性探針的研究及其應用
    內(nèi)皮前體細胞亞型與偏頭痛的相關性分析
    非洲菊花托的體細胞胚發(fā)生及植株再生
    透射電子顯微鏡中的掃描探針裝置
    物理實驗(2015年9期)2015-02-28 17:36:47
    掃描近場光電多功能探針系統(tǒng)
    不同氮效率茄子基因型及其雜種F1的氮素吸收特性
    徐闻县| 珠海市| 崇义县| 濉溪县| 乌苏市| 门源| 邵东县| 隆子县| 海原县| 中卫市| 禹城市| 视频| 阳西县| 沁阳市| 徐汇区| 台山市| 札达县| 社会| 兰坪| 肥西县| 广饶县| 北流市| 岐山县| 玉龙| 建德市| 阜南县| 娄底市| 凤庆县| 弥渡县| 文昌市| 潜江市| 秭归县| 洛宁县| 克山县| 盐山县| 疏勒县| 渝北区| 肥西县| 咸宁市| 莆田市| 航空|