亮氨酸氨基肽酶在肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值

王萌，仝穎娜，劉曉彬，管明秀，周云麗

(天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院,國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心,天津市腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300060)

?

亮氨酸氨基肽酶在肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值

王萌，仝穎娜，劉曉彬，管明秀，周云麗

(天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院,國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心,天津市腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300060)

目的探討亮氨酸氨基肽酶(LAP)在肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)452例肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤(惡性組)、124例肝膽系統(tǒng)良性腫瘤患者(良性組)及124例健康體檢者(對(duì)照組)血清LAP，應(yīng)用ROC曲線分析LAP對(duì)肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤的診斷價(jià)值。結(jié)果惡性組、良性組、對(duì)照組血清LAP分別為(88.1±60.7)、(55.1±33.9)、(45.0±7.2)U/L，各組兩兩比較P均<0.05。肝細(xì)胞癌、膽管細(xì)胞癌和膽管癌患者血清LAP分別為(70.6±27.9)、(117.1±105.9)、(101.5±57.2)U/L，三者兩兩比較P均<0.05。血清LAP對(duì)肝細(xì)胞癌診斷的敏感度和特異度分別為58.6%、75.8%，對(duì)膽管細(xì)胞癌分別為69.6%、85.1%，對(duì)膽總管癌分別為93.0%、90.7%。血清LAP診斷肝細(xì)胞癌的ROC曲線下面積(AUC)為0.649，診斷膽管細(xì)胞癌的AUC為0.801，診斷膽管癌的AUC為0.863。結(jié)論肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤患者血清LAP水平升高，有助于肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤尤其是膽管惡性腫瘤的診斷。

亮氨酸氨基肽酶；肝細(xì)胞癌；膽管細(xì)胞癌；膽總管癌

近年來(lái)，肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤發(fā)病率逐漸增加，其癥狀隱匿、惡性程度高、手術(shù)切除率低、預(yù)后很差，因此早期發(fā)現(xiàn)、早期治療非常關(guān)鍵[1]。亮氨酸氨基肽酶(LAP)廣泛分布于肝、膽、胰等組織中，參與組織蛋白和某些肽類的降解更新，在各種生物過程中起重要作用[2,3]。2014年6～11月，我們檢測(cè)了肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤患者血清LAP水平變化，探討其在肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤診斷中的價(jià)值。

1　材料與方法

1.1臨床資料收集天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院收治的肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤患者452例(惡性組)，男248例、女204例，年齡(55.0±1.5)歲；肝細(xì)胞癌169例，膽管細(xì)胞癌135例，膽總管癌148例。肝膽系統(tǒng)良性腫瘤124例(良性組)男67例、女57例，年齡(51.5±0.5)歲；肝血管瘤68例，肝細(xì)胞腺瘤23例，血管平滑肌脂肪瘤15例，上皮樣血管內(nèi)皮瘤5例，膽管腺瘤2例，膽囊腫病5例，膽管囊腺瘤3例，膽管乳頭狀瘤2例，膽管錯(cuò)構(gòu)瘤1例。以上患者均經(jīng)腫瘤醫(yī)院組織病理學(xué)和影像學(xué)檢查確診。健康體檢者124例(對(duì)照組)，男65例、女59例，年齡(42.5±1.0)歲。各組性別、年齡具有可比性。

1.2血清LAP檢測(cè)方法清晨采集所有研究對(duì)象禁食12 h的空腹外周靜脈血，靜置2 h后3 000 r/min離心5 min，取上清。ALP試劑購(gòu)自美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司，采用貝克曼庫(kù)爾特AU5821全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，按說(shuō)明書操作。

2　結(jié)果

2.1各組組血清LAP水平比較惡性組、良性組、對(duì)照組血清LAP水平分別為(88.1±60.7)、(55.1±33.9)、(45.0±7.2)U/L，各組兩兩比較P均<0.05。肝細(xì)胞癌、膽管細(xì)胞癌和膽管癌血清LAP水平分別為(70.6±27.9)、(117.1±105.9)、(101.5±57.2)U/L，三者兩兩比較P均<0.05。

2.2血清LAP對(duì)肝膽系統(tǒng)惡性腫瘤的診斷價(jià)值LAP對(duì)肝細(xì)胞癌診斷的敏感度和特異度分別為58.6%、75.8%，對(duì)膽管細(xì)胞癌分別為69.6%、85.1%，對(duì)膽總管癌分別為93.0%、90.7%。血清LAP診斷肝細(xì)胞癌的AUC為0.649，診斷膽管細(xì)胞癌的AUC為0.801，診斷膽管癌的AUC為0.863。

3　討論

不同組織來(lái)源的LAP分子結(jié)構(gòu)并不完全相同，但均存在一個(gè)HEXXH(X)(18)E鋅離子結(jié)合活性中心，都屬于金屬蛋白酶[4～6]，具有相似的功能。LAP 廣泛分布于人體各組織內(nèi)[7～9]，在肝臟中最豐富，是一種膜結(jié)合性酶，主要定位于毛細(xì)膽管上皮細(xì)胞；肝小葉結(jié)構(gòu)破壞、腫瘤壓迫等各種阻礙膽汁流通的因素均可刺激LAP合成增加，滯留的膽鹽作為去垢劑，使酶LAP與脂膜分離，經(jīng)肝竇進(jìn)入血循環(huán)或從膽管系統(tǒng)反流入血，故血清LAP水平對(duì)肝組織損傷和膽汁淤積程度的反映最為準(zhǔn)確、可靠[10～12]。另外，研究發(fā)現(xiàn)，LAP主要分布于膽小管區(qū)域，膽管感染、肝小葉結(jié)構(gòu)破壞、腫瘤壓迫等各種阻礙膽汁流通的因素均可使毛細(xì)膽管上皮細(xì)胞LAP的合成增加，經(jīng)肝竇進(jìn)入血循環(huán)或從膽管系統(tǒng)反流入血，導(dǎo)致血清LAP水平升高，故LAP水平可反映肝膽系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。宋方根等[11]研究報(bào)道，血清LAP的定量測(cè)定對(duì)于肝內(nèi)外膽汁淤積的鑒別診斷有價(jià)值，并能反映膽汁淤積，在臨床上可用于鑒別診斷黃疸。

國(guó)內(nèi)外有研究報(bào)道[13～15]，原發(fā)性肝癌時(shí)血清LAP水平顯著升高。本研究也證實(shí)，相對(duì)于良性組及對(duì)照組，肝細(xì)胞癌、膽管細(xì)胞癌及膽總管癌患者血清LAP水平均顯著升高。但是，本研究通過ROC曲線分析結(jié)果表明，LAP在肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值不高，對(duì)膽總管癌的敏感度及特異度較高，對(duì)膽管惡性腫瘤診斷的敏感度和特異度最高。這均說(shuō)明LAP對(duì)于膽管惡性腫瘤的診斷尤其是膽管系統(tǒng)的惡性病變有較高的診斷價(jià)值。但是，由于LAP并非肝臟中所特有的酶，因此僅靠單一酶活性改變對(duì)肝癌及膽管腫瘤作出診斷是非常困難的，尋找有效的可用于肝癌及膽管腫瘤診斷的酶具有十分重要的意義。

[1] Siegel R, Ma J, Zou Z, et al. Cancer statistics, 2014[J]. CA Cancer J Clin, 2014,64(1):9-29.

[2] Zhang S, Yang X, Shi H, et al. Overexpression of leucine aminopeptidase 3 contributes to malignant development of human esophageal squamous cell carcinoma[J]. Jour Molecu Hist,2014,45(3):283-292.

[3] Tian SY, Chen SH, Shao BF, et al. Expression of leucine aminopeptidase 3 (LAP3) correlates with prognosis and malignant development of human hepatocellular carcinoma (HCC)[J]. Intern Jour Clinic Exp Path, 2014,7(7):3752-3762.

[4] Wang ZX, Jiang CP, Cao Y, et al. Preoperative serum liver enzyme markers for predicting early recurrence after curative resection of hepatocellular carcinoma[J]. HBPD Int,2015,14(2):178-85.

[5] 黎海東.肝臟酶譜診斷肝病在臨床的應(yīng)用[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012, 22(16):3568-3569..

[6] Huang WQ, Zhong LF, Meng ZZ, et al. The Structure and Enzyme Characteristics of a Recombinant Leucine Aminopeptidase rLap1 from Aspergillus sojae and Its Application in Debittering[J]. Applied Biochem Biotechnology,2015,177(1):190-206.

[7] Gowda S, Desai PB, Hull VV, et al. A review on laboratory liver function tests[J]. Pan Afri Med J,2009,3(9):17.

[8] Wu GP, Cao MJ, Chen Y, et al. Leucine aminopeptidase from red sea bream (Pagrus major) skeletal muscle: purification, characterization, cellular location, and tissue distribution[J]. J Agric Food Chem, 2008,56(20):9653-9660.

[9] Huang WQ, Zhong LF, Meng ZZ, et al. The Structure and enzyme characteristics of a recombinant leucine aminopeptidase rlap1 from aspergillus sojae and its application in debittering[J]. Applied Biochem Biotechnology, 2015,177(1):190-206.

[10] 嵇鳴. 連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定血清亮氨酸氨基肽酶的活性及臨床應(yīng)用[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(7):406-408.

[11] 宋方根. 亮氨酸氨基肽酶和膽汁酸在膽汁郁積診斷中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南,2011,9(36):354-355.

[12] 鄭平燕. 血清亮氨酸氨基肽酶與腺苷脫氨酶在乙型肝炎病毒感染性肝病生化指標(biāo)檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J]. 現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2015,27(4):477-478.

[13] 謝丹. 血清 AFU、LAP 及 GGT 聯(lián)合檢測(cè)在早期原發(fā)性肝癌患者診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J]. 南昌大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2014,54(11):69-71.

[14] 楊婷婷. 四項(xiàng)生化指標(biāo)檢驗(yàn)應(yīng)用于肝硬化和病毒性肝炎的價(jià)值評(píng)價(jià)[J]. 國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2015,21(14):2053-2054.

[15] Abouzied MM, Eltahir HM, Fawzy MA, et al. Estimation of leucine aminopeptidase and 5-nucleotidase increases alpha-fetoprotein sensitivity in human hepatocellular carcinoma cases[J]. APJCP,2015,16(3):959-963.

周云麗(E-mail: zhouyunli@tjmuch.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.18.022

R735.5

B

1002-266X(2016)18-0062-02

2016-01-07)