陜西 賈文俊
品味基因工程 透視思維誤區(qū)
陜西 賈文俊
縱覽近年高考和模擬試題,教學(xué)中的易錯點一直備受各類命題者的青睞?!盎蚬こ獭敝饕键c集中在基因工程的概念、操作工具、操作步驟和應(yīng)用方面,在歷年的高考中出現(xiàn)頻率較高。
【典例1】(原創(chuàng))下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是( )
A. DNA聚合酶可以將兩個DNA片段連接形成磷酸二酯鍵
B. 質(zhì)粒有適宜的限制酶切點,以便于接入目的基因
C. 目的基因只要導(dǎo)入受體細(xì)胞,就一定會表達
D. 從受體細(xì)胞中提取目的基因的mRNA,利用目的基因的探針檢測屬于翻譯檢測
【解析】本題主要考查考生對基因工程中易混概念的理解能力。DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段的3′端上形成磷酸二酯鍵,將兩個DNA片段連接應(yīng)用DNA連接酶,A錯誤;質(zhì)粒作為常用運載體主要因為其具有能在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制并穩(wěn)定保存,有限制酶切點,有標(biāo)記基因等優(yōu)點,B正確;基因工程中只要受體細(xì)胞表現(xiàn)出運載體所特有的“標(biāo)記基因”所控制的性狀,就說明重組DNA已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞,但不能說明目的基因一定會表達,還需要經(jīng)過進一步檢測,C錯誤;翻譯檢測是指從受體細(xì)胞中分離目的基因編碼的蛋白質(zhì),利用抗原-抗體雜交原理,檢測目的基因的表達情況,D錯誤。
【答案】B
【誤區(qū)點撥】基因工程中許多概念非常相近極易混淆,主要表現(xiàn)在對它們之間的本質(zhì)理解不清。常見易混淆概念主要包括:① 限制性核酸內(nèi)切酶≠DNA連接酶≠DNA聚合酶;②運載體≠載體;③質(zhì)?!龠\載體≠重組質(zhì)粒;④基因工程≠基因重組;⑤目的基因與運載體構(gòu)建重組DNA的結(jié)合產(chǎn)物≠目的基因與運載體的結(jié)合體;⑥受體細(xì)胞≠微生物;⑦目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞≠目的基因的表達;⑧導(dǎo)入檢測≠轉(zhuǎn)錄檢測≠翻譯檢測≠形態(tài)檢測;⑨啟動子(DNA片段)≠起始密碼子(位于mRNA);終止子(DNA片段)≠終止密碼子(位于mRNA)。
【典例2】(改編)用限制酶EcoRV、MboⅠ單獨或聯(lián)合切割(每個酶切位點均被切割)一長度為14 kb(1 kb即1 000個堿基對)的同一DNA分子,得到的DNA片段長度如圖。下列有關(guān)敘述不正確的是 ( )
A. 該DNA分子是環(huán)狀DNA分子
B. 該DNA分子上有2個MboⅠ酶切位點
C. DNA連接酶可以將相同的末端連接起來
D. 聯(lián)合切割多個這樣的DNA分子,每個酶切位點均被切割,可得到4種長度不同的DNA分子
【解析】本題主要考查酶切位點的有關(guān)知識。該DNA分子經(jīng)限制酶EcoRV單獨切割后長度沒變,所以該DNA分子為環(huán)狀DNA分子,A正確;用限制酶Mbo單獨切割該DNA分子,得到長度不同的兩個DNA片段,可見其具有兩個MboⅠ酶切位點,B正確;DNA連接酶可以將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來,C正確;由圖示可知,聯(lián)合切割多個DNA分子,且每個位點均被完全切割后得到2.5 kb、5.5 kb和6 kb三種長度不同的DNA分子片段,D錯誤。
【答案】D
【誤區(qū)點撥】①每種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別特定的核苷酸序列,并在特定位點上切割DNA分子(特異性);②不同的DNA分子用同一種限制酶切割形成的黏性末端都相同;③同一種DNA分子用不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割,產(chǎn)生的黏性末端一般不同。
【典例3】(2014·重慶·改編)如圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下敘述正確的是 ( )
A. ②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶兩種酶參與
B. 圖示此過程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時采用顯微注射法
C. ⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀,就說明植株發(fā)生了自由組合
D. 細(xì)胞④中含有抗蟲基因,植株⑤也不一定會表現(xiàn)出抗蟲性狀
【解析】本題主要考查基因工程的原理及應(yīng)用。②為重組質(zhì)粒,其構(gòu)建過程需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種酶參與,A錯誤;圖示此過程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,B錯誤;抗蟲植株的出現(xiàn)是由于獲得了外源抗蟲基因,屬于人工干擾下的不同物種間的基因重組導(dǎo)致的可遺傳變異,但不屬于自由組合,C錯誤;細(xì)胞④中含有抗蟲基因,說明目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,但目的基因在受體細(xì)胞中不一定能成功表達,因此植株⑤也不一定會表現(xiàn)出抗蟲性狀,D正確。
【答案】D
【誤區(qū)點撥】①目的基因必須與運載體結(jié)合后才能導(dǎo)入受體細(xì)胞,才能穩(wěn)定保存,并進行復(fù)制和表達,不能單獨進入受體細(xì)胞;②切割目的基因與運載體一般情況用同一種限制性核酸內(nèi)切酶;③目的基因與運載體結(jié)合的結(jié)果可能有三種情況:一是目的基因與目的基因結(jié)合;二是質(zhì)粒與質(zhì)粒結(jié)合;三是目的基因與質(zhì)粒結(jié)合(即需要的重組DNA)。④培育轉(zhuǎn)基因動物,受體細(xì)胞一般選用受精卵;而培育轉(zhuǎn)基因植物,受體細(xì)胞可選用受精卵或體細(xì)胞,若受體細(xì)胞是體細(xì)胞,再將含目的基因的體細(xì)胞進行組織培養(yǎng),即可獲得轉(zhuǎn)基因植株;⑤基因工程中目的基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞的依據(jù)是:受體細(xì)胞具有運載體所特有的“標(biāo)記基因”所控制的性狀;導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因成功表達的標(biāo)志是:受體細(xì)胞表現(xiàn)出“目的基因”所控制的性狀。
(作者單位:陜西省寶雞市寶雞中學(xué))