?
特種毛皮動物真菌性皮膚病主要的診斷技術(shù)
由于飼養(yǎng)密度過大、環(huán)境潮濕、飲食不科學(xué)等飼養(yǎng)管理方面的諸多問題,導(dǎo)致近年來狐、貉、貂等特種毛皮動物的真菌性皮膚病逐漸增多,一旦發(fā)生這類疾病,對毛皮的質(zhì)量影響較大,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。其中還涉及到人畜共患病,動物的真菌和螨蟲均可傳染給人,因此這類皮膚病越來越受到人們的重視。準(zhǔn)確的診斷真菌性皮膚病極為重要,因此特種動物真菌性皮膚病的診斷技術(shù)備受臨床執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師的關(guān)注。
伍氏燈又稱濾過性紫外線檢查,用伍氏燈在暗室照射病變區(qū)域皮屑,小孢子菌感染的毛發(fā)可發(fā)出蘋果綠色熒光,而石膏樣小孢子菌和須毛癬菌感染的毛發(fā)無熒光或熒光顏色不同。這種檢測方法因操作簡單、快捷,易于掌握,且屬于無傷害檢測技術(shù),在臨床實踐中被廣泛應(yīng)用,是目前動物醫(yī)院檢測皮膚真菌病的最為主要的方法。
應(yīng)該注意皮膚鱗屑、藥膏、乳油及細菌性毛囊炎在紫外線的照射下可能也會發(fā)出熒光,但其顏色與犬小孢子菌感染的熒光不同。伍氏燈檢查只能作為篩選手段,不能進行確診。另外,在檢查前1周應(yīng)停止使用外用藥膏。
從炎癥部位拔毛,最好取斷裂、被擦損的毛發(fā)或選取伍氏燈下有熒光的毛發(fā),置于載玻片上,滴加10%~20% KOH,加蓋玻片,作用30 min或加熱15 s,待樣本透明后,先用低倍鏡(10倍物鏡)找出擦損、脹大、淡色的毛發(fā),然后用高倍鏡(20~40倍物鏡)檢查真菌孢子和菌絲。如果在毛發(fā)干周邊有發(fā)外孢子型孢子,呈圓形或卵圓形、綠色透明串珠狀,發(fā)干內(nèi)有菌絲則可診斷為皮膚癬菌病。
培養(yǎng)皮膚癬菌的培養(yǎng)基為皮膚癬菌試驗培養(yǎng)基(DTM),也可選用沙氏(沙氏葡萄糖瓊脂)培養(yǎng)基。將毛發(fā)等病料接種于培養(yǎng)基上,25℃培養(yǎng),皮膚癬菌的生長可使DTM變紅,或根據(jù)沙氏培養(yǎng)基上菌落的顏色和形態(tài)以及顯微鏡檢查等做進一步鑒定。
組織病理學(xué)檢查是一種較為準(zhǔn)確的檢查方法。對病料進行PAS染色,孢子表面及菌絲染色后成紅色,毛發(fā)角層內(nèi)的發(fā)鞘的孢子和菌絲較易被發(fā)現(xiàn),便于進行診斷。在表皮角質(zhì)層、毛囊、被毛等處較易出現(xiàn)PAS陽性反應(yīng)。
當(dāng)前免疫學(xué)方法還較少應(yīng)用于動物皮膚真菌病的診斷,由于該法具有特異性強、靈敏性高等優(yōu)點,有一定推廣應(yīng)用前景。相關(guān)研究表明采用間接ELISA法檢測感染真菌的實驗兔體液中的特異性抗體,應(yīng)用免疫標(biāo)記技術(shù)檢測感染患病兔血清中的IgG,結(jié)果顯示出為8個條帶;采用聚丙烯酰胺十二烷基磺酸鈉凝膠電泳法(SDS-PAGE),結(jié)果顯示出3個條帶。
隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,PCR檢測技術(shù)、限制性酶切片段長度多態(tài)性分析(RFLP)、分子探針、隨機擴增DNA多態(tài)性(RAPD)、DNA指紋圖譜等方法已廣泛應(yīng)用于深部真菌病的診斷。此類方法特異性極強、敏感性極高。隨著分子生物學(xué)技術(shù)在臨床的應(yīng)用及發(fā)展,將大幅提高真菌病診斷和鑒定的準(zhǔn)確性。
近年來采用G-TEST法,主要檢測深部真菌感染患者體液中或致病性真菌的多糖與G因子都可以產(chǎn)生陽性反應(yīng),這是一種較新有效診斷真菌疾病的方法。
(黑龍江省蘿北縣畜牧獸醫(yī)局,張卓,梁新江;東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,李蓓,陳永平,陳悅,范宏剛)