奶牛乳房炎的病原分離鑒定與藥敏實驗

李 鑫劉麗婭夏 俊

(1.阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科學院獸醫(yī)研究所,新疆烏魯木齊 830099)

奶牛乳房炎的病原分離鑒定與藥敏實驗

李 鑫1劉麗婭2夏 俊2

(1.阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科學院獸醫(yī)研究所,新疆烏魯木齊 830099)

奶牛乳房炎是奶牛最常見疾病之一,也是最難以預防和控制的常在性疾病。通過對新疆某規(guī)?；膛瞿膛Ｈ榉垦椎牟≡蛛x鑒定及藥敏實驗,進一步對該牛場更好的綜合防控奶牛乳房炎提供技術資料參考。

奶牛乳房炎;分離鑒定;藥敏實驗;防控

新疆某規(guī)?；膛瞿膛＃切陆缚蓴?shù)的優(yōu)秀牛場及奶源地，管理良好，但奶牛常年處于工業(yè)化生產(chǎn)模式，配種、妊娠、產(chǎn)犢、產(chǎn)奶、再配種，高負荷的運轉(zhuǎn)使奶牛的乳房變得極脆弱，易生病。曾采用青霉素、鏈霉素、黃芪多糖等藥物治療，但因混合感染及耐藥菌株的出現(xiàn)，收效甚微。本研究對該場引起奶牛乳房炎病原菌進行分離鑒定及藥敏試驗，對更好的預防和治療奶牛乳房炎起到了重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 乳樣來源 從該規(guī)?；膛霾杉虡?份，編號分別為054366、054603、087077。采集時嚴格無菌操作，先對乳頭進行消毒，棄掉前10～20 ml奶樣后無菌取乳樣5 ml，放入EP管中，貼好編號后冰袋冷凍保存，24 h之內(nèi)進行分菌培養(yǎng)。

1.1.2 試劑 普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，50 ml/L兔鮮血培養(yǎng)基，按實驗室常規(guī)配置。

1.1.3 藥敏紙片 抗菌藥物紙片共12種，包括頭孢曲松、炎毒咳喘王、沙拉沙星、頭孢他啶、慶大霉素、阿米卡星、卡那霉素、青霉素、鏈霉素、林可霉素、克林霉素。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的培養(yǎng)與分離 3份奶樣取少量，分別劃線接種到普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂平板，37℃培養(yǎng)12～24 h。

1.2.2 病原菌鑒定 將分離的不同病菌進行涂片，革蘭染色，鏡檢，觀察菌體的形態(tài)及染色特性。

1.2.3 藥物敏感性試驗 用臨床上常用的、價格較低廉的12種抗生素對分離培養(yǎng)細菌進行藥物敏感性試驗。

2 結(jié)果

2.1 病原菌的培養(yǎng)分離

3份奶樣分別接種普通瓊脂、血瓊脂平板，在37℃培養(yǎng)12h觀察，結(jié)果如下：

054366號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上沒有任何細菌生長。

054603號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上細菌生長情況基本相同，主要有三種菌落，一種是大而無規(guī)則的菌落，一種是中等大小菌落，一種是針尖大小菌落。其中以大而無規(guī)則的菌落占多數(shù)。

087077號樣品：在普通瓊脂平板和血瓊脂平板上細菌生長情況基本相同，主要有三種菌落，一種是大而無規(guī)則的菌落，一種是中等大小菌落，一種是針尖大小菌落。其中以中等大小菌落及針尖大小菌落占多數(shù)，大而無規(guī)則的菌落很少。

2.2 病原菌鑒定（革蘭氏染色）

將分離的三種不同病菌（大、中、?。┻M行革蘭氏染色鑒定。結(jié)果大而無規(guī)則的細菌為革蘭氏陽性桿菌（牛棒狀桿菌、化膿桿菌等）；中等大小細菌為革蘭氏陽性球菌（葡萄球菌、雙球菌）；針尖大小菌落為革蘭氏陽性球菌（鏈球菌）。

2.3 藥物敏感性試驗

用臨床上常用的、價格較低廉的12種抗生素對分離培養(yǎng)細菌進行藥物敏感性試驗。結(jié)果阿米卡星（紅色箭頭所指）對大、中、小三種病菌均存在明顯的抑菌環(huán)，能有效抑制病原菌的生長，效果最好。

3 討論

（1）依據(jù)藥敏試驗結(jié)果，為該規(guī)?；膛鲋贫朔乐畏桨?，具體如下：

治療：使用阿米卡星，藥量及用藥方法參照藥品說明，連用5～7d。

預防：藥物預防：首選蘭州畜牧與獸藥研究所生產(chǎn)的速效乳炎散（中藥），成年/青年母牛全群投藥，每次5d，一年2～3次。

（2）防治建議

①奶牛乳房炎是乳腺受到物理、化學、病菌等因素的刺激所發(fā)生的一種炎癥變化，是一種多因素疫病。但是，除病原微生物外，其他因素隨著奶牛飼養(yǎng)業(yè)的發(fā)展而逐漸改善，病菌就成為當前引起奶牛乳房炎的主要原因。已經(jīng)報道的奶牛乳房炎病原微生物有150多種，包括細菌、真菌、支原體等，但研究證明，引發(fā)奶牛乳房炎的病原主要為金黃色葡萄球菌、鏈球菌和桿菌[5]，由這3種病原菌引起的奶牛乳房炎約占該病發(fā)病總數(shù)的90%以上。單純由某一個病原菌引起的奶牛乳房炎較少，而多數(shù)是由2種～3種甚至是3種以上的病原菌引起的，這也是傳統(tǒng)的治療藥物（如青、鏈霉素）難以取得令人滿意效果的原因。由于規(guī)?；膛銎毡榇嬖趶V泛使用抗生素的情況，使病原菌存在普遍的耐藥性，那么當需要用藥治療或預防流行病時，就需要講究科學“先對病原進行實驗室確診，再進行高效藥物的篩選（藥敏試驗）”。否則使用了對病原菌無效的藥物治療疫病，不但浪費人力、財力、增加了藥物在動物體內(nèi)的殘留量，更重要的是耽誤了疫病防治的最佳時機，使疫情蔓延，造成不必要的、更大的經(jīng)濟損失，況且病重、病程長的奶牛往往很難治愈。

②有臨床型（顯性）乳房炎，就暗示隱性乳房炎一定不少。這在全世界都很普遍，就像犢牛肺炎和腹瀉一樣，不必恐慌，只要科學用藥、疫苗預防，奶牛乳房炎是可控可治的。

③建議貴場加強環(huán)境衛(wèi)生管理，牛舍定期消毒，清潔牛床，保持環(huán)境干燥；擠奶時正確使用擠奶器，盡量縮短擠奶時間，擠奶時用力要均勻，盡量擠凈乳汁；病牛及時予以治療。加強在分娩前后，尤其是產(chǎn)犢初期的飼養(yǎng)管理。分娩前，乳房明顯腫脹時，應減少多汁飼料和精料喂量，分娩后控制飲水并適當增加運動和擠奶次數(shù)。此外，加強干奶期奶牛的飼養(yǎng)管理對奶牛乳房炎的預防及治療也很重要，有資料顯示，干奶期治療奶牛乳房炎不但能治愈現(xiàn)有疾病，也能預防新的感染，還有治愈率比泌乳期高、能夠較長時問使用高濃度抗生素、不存在乳汁中藥物殘留等優(yōu)點。因此，對于奶牛養(yǎng)殖場來說，奶牛乳房炎的預防及治療在奶牛生產(chǎn)的任何時期都應是一項常抓不懈的工作。

[1] 吳凌，劉志忠，夏成，等.荷顛坦奶牛乳房炎鏈球菌的分離與鑒定[J].畜牧與獸醫(yī)，2003，35（3）：35.