白鶴芋組織培養(yǎng)快繁及生產(chǎn)技術(shù)

劉堯　魏立君　楊鳳軍

白鶴芋組織培養(yǎng)快繁及生產(chǎn)技術(shù)

劉堯1魏立君2楊鳳軍1

（1黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)；2大慶油田礦區(qū)服務(wù)事業(yè)部園林綠化公司，黑龍江大慶163000）

我國地大物博，花類品種眾多，不同的地方盛產(chǎn)不同的花種。隨著我國植物組織培養(yǎng)相關(guān)技術(shù)的不斷進(jìn)步，大大提高了花卉的成活率與繁殖速度。本文以白鶴芋的花序?yàn)橥庵搀w，在MS基本培養(yǎng)基中加入不同類別且不同濃度的激素，進(jìn)行組培快繁試驗(yàn)，進(jìn)而探討快速繁殖白鶴芋的有效途徑。

白鶴芋；組培快繁；生產(chǎn)技術(shù)

白鶴芋一般采用種子以及分株法進(jìn)行繁殖，繁殖系數(shù)往往過低，這就明顯限制了發(fā)展速度，同時(shí)，也影響了白鶴芋規(guī)?；蜕唐坊倪M(jìn)程。經(jīng)過多年的摸索與經(jīng)驗(yàn)積累，目前，快速繁殖白鶴芋的主要有效途徑是對(duì)其進(jìn)行組織培養(yǎng)，在已有的相關(guān)資料中，運(yùn)用白鶴芋的莖段、莖尖、葉片以及頂芽為外植體都有成功的先例。

1　材料與方法

在試驗(yàn)中，我們所選用的是已經(jīng)引進(jìn)的白鶴芋屬觀賞植物的新品種，例如，綠巨人、白掌等，進(jìn)行以下組織培養(yǎng)的相關(guān)試驗(yàn)。

1.1使用莖段中的頂芽培養(yǎng)

首先，剝掉外層的葉片，待用自來水沖洗過后，再用70%酒精浸泡大約3min，之后用10%的滅菌凈消毒30min，并用無菌水對(duì)其沖洗4～5次即可。用刀切取莖頂部位，放入到MS＋NAA 0.2mg/L＋6-BA3～5mg的培養(yǎng)基中，進(jìn)行誘導(dǎo)叢生芽操作。

1.2叢生芽的相關(guān)增殖培養(yǎng)

對(duì)叢生芽進(jìn)行增殖培養(yǎng)時(shí)，首先，把已經(jīng)誘導(dǎo)形成的叢生芽切成0.2cm的小塊，切好后分別放入不同濃度NAA的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，1個(gè)月后統(tǒng)計(jì)其所產(chǎn)生的增殖倍數(shù)。

1.3幼花序培養(yǎng)

用刀切取綠巨人帶花序長3～5cm的植株，同時(shí)，將其外部的葉片去除，取出帶有苞葉的幼肉穗花序。首先，用70%的酒精浸泡1min，之后用0.1%HgCl2消毒大約15min，再用無菌水沖洗5次，去除苞葉，并將花序切成一個(gè)個(gè)薄片，最后放入到含有不同NAA濃度的MS培養(yǎng)基中形成誘導(dǎo)胚狀體。在40天后統(tǒng)計(jì)其胚狀體的誘導(dǎo)概率，并將誘導(dǎo)出的胚狀體放入含有不同NAA濃度的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行植株的再生。

1.4組培苗的生根培養(yǎng)

將在增殖培養(yǎng)過程中再生出的無根植株切出，放入到含有不同NAA濃度的MS中進(jìn)行誘導(dǎo)生根的操作，所用的培養(yǎng)基一般都含有0.5%的活性炭。待培養(yǎng)進(jìn)行到1個(gè)月時(shí)，統(tǒng)計(jì)具體的生根率和每株生根數(shù)的平均值。

2　結(jié)果和分析

2.1不同品種的莖頂芽培養(yǎng)效果

在眾多的白鶴芋品種中，可以快速誘導(dǎo)并得出叢生芽的品種有：香水白掌、神燈白掌和洪拉斯白掌，大約經(jīng)過50d的誘導(dǎo)，可以出現(xiàn)我們想要的叢生芽。香水白掌經(jīng)過誘導(dǎo)所形成的植株比較容易誘導(dǎo)出叢生芽；綠巨人屬中等速度，大約需要2個(gè)月；大漢白掌就要更慢一些，大約要4個(gè)月，且誘導(dǎo)難度明顯加大。

2.2不同品種的白鶴芋增殖培養(yǎng)中的具體表現(xiàn)

經(jīng)過一系列的摸索試驗(yàn)得知，綠巨人、大漢白掌在培養(yǎng)中所適宜的增殖培養(yǎng)基應(yīng)為MS＋NAA0.2mg/L＋6-BA3mg/L，增殖倍數(shù)高的同時(shí)其可再生性也大大加強(qiáng)。香水白掌與神燈白掌在MS＋NAA 0.2mg/L＋6-BA 2mg/L的培養(yǎng)基中所取得的效果是最好的。

2.3不同品種的花序在培養(yǎng)過程中所表現(xiàn)出的差異

通常情況下，綠巨人與大漢白掌幼花序的培養(yǎng)需在NAA 0.5mg/L+6-BA3mg/L的培養(yǎng)基中，可以得到高頻率的胚狀體誘導(dǎo)，大約分別可以達(dá)到87%和82%。隨著相關(guān)培養(yǎng)基濃度的不斷提高，綠巨人花序所表現(xiàn)出來的相關(guān)胚狀體誘導(dǎo)率明顯下降，然而大漢白掌花序的胚狀體誘導(dǎo)率并無變化。使用同樣的培養(yǎng)基，不同品種的培養(yǎng)效果具有明顯差異，在對(duì)綠巨人花序胚狀體的誘導(dǎo)起到促進(jìn)作用的同時(shí)，卻抑制了大漢白掌花序胚狀體的誘導(dǎo)。

3　結(jié)論與討論

在相關(guān)的組織培養(yǎng)過程中，白鶴芋花序組培中較容易實(shí)現(xiàn)分化出芽這一目的，經(jīng)組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的幼苗生長旺盛，進(jìn)行繼代接種后，不久幼苗就可以長滿整個(gè)瓶，一般增殖苗的生長高度在2cm以上即可收獲壯苗。在進(jìn)行花序的初代培養(yǎng)時(shí)，所使用的營養(yǎng)液以MS+6-BA5mg/L+NAA0.2mg/L為宜，在進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)的過程中，所使用的營養(yǎng)液以MS+6-BA4～5mg/L+NAA0.1～0.2mg/L為宜；誘導(dǎo)生根所使用的培養(yǎng)基最好為1/2MS+IAA0.5mg/L。由于白鶴芋具有易栽培與觀賞價(jià)值高等特點(diǎn)，因此，高效運(yùn)用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行育苗，不僅能夠在一定程度上提高其自身的數(shù)量，而且對(duì)于帶動(dòng)其它觀賞植物進(jìn)行組培種苗的發(fā)展也有重大意義。本文探究的主要是白鶴芋花序的組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)，旨在為我國的相關(guān)研究項(xiàng)目添磚加瓦。

1陳碧華.‘香水’白鶴芋組織培養(yǎng)快速繁殖的研究[J].福建林學(xué)院學(xué)報(bào)，2000（3）

2高天霞，郝昀.白鶴芋的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].生物學(xué)通報(bào)，1999（8）

3朱根發(fā).白鶴芋屬觀賞植物的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2003（3）

（責(zé)任編輯舒丹丹）