抗疲勞實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

●柴金珍 黃遠(yuǎn)英 邱春媚 楊曉惠 李開瑩 殷光玲

抗疲勞實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

●柴金珍 黃遠(yuǎn)英 邱春媚 楊曉惠 李開瑩 殷光玲

目的：對國內(nèi)外抗疲勞作用研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃屠砘笜?biāo)測定方法進(jìn)行綜述。方法：按抗體力疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、抗腦力疲勞模型、理化指標(biāo)測定方法三個(gè)方面進(jìn)行概述。結(jié)果：抗體力疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯砍?fù)重游泳實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯?，還有爬桿實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⑥D(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⑻_(tái)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、鼠尾懸掛?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、耐缺氧存活?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、肌肉收縮測定實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷龋豢鼓X力疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ瓦€有Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、水迷宮法模型、小鼠睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、避暗箱法?shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?；理化測定指標(biāo)有血乳酸（BLA）、血尿素氮（BUN）、肝糖元/肌糖元、血糖（Glue）、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、ATP酶、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、睪酮(T)、皮質(zhì)酮、丙二醛(MDA)、白細(xì)胞（WBC）和血紅蛋白(HB)等。結(jié)論：研究抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图皽y定的指標(biāo)眾多，建議對具體的抗體力疲勞或者抗腦力疲勞作用實(shí)驗(yàn)研究作一個(gè)統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn)。

抗疲勞作用；實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?；理化指?biāo)

1 前言

《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》規(guī)定，物品具有抗疲勞功能的標(biāo)準(zhǔn)：小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，且按規(guī)定方法測定運(yùn)動(dòng)后小鼠血乳酸、血清尿素、肝糖元/肌糖元三項(xiàng)生化指標(biāo)中任二項(xiàng)指標(biāo)陽性，可判定改受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用[1]。查閱CNKI文獻(xiàn)，中藥抗疲勞的研究文獻(xiàn)眾多，但用于抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵彩菂⒉畈积R，如：負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、爬桿實(shí)驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)、跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、鼠尾懸掛實(shí)驗(yàn)、迷宮實(shí)驗(yàn)、耐缺氧實(shí)驗(yàn)等模型。物品的抗疲勞功能實(shí)驗(yàn)并非完全按《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定的方法進(jìn)行研究，導(dǎo)致物品的抗疲勞功能研究是否有效于或者更好于保健食品規(guī)定的方法，存在一定的異議。同時(shí)，隨著物品抗疲勞作用機(jī)制的不斷研究、完善，抗疲勞功能實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃蜏y定指標(biāo)的統(tǒng)一方法也需要發(fā)展與更新，這樣，未來評價(jià)判斷物品的抗疲勞試驗(yàn)研究將會(huì)更加全面和統(tǒng)一。本綜述旨在對目前抗疲勞研究中所采用的抗疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图吧笜?biāo)作一整理，以期為抗疲勞功能實(shí)驗(yàn)的方法研究提供一定的幫助。

2 抗運(yùn)動(dòng)疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?/h2>

2.1 力竭游泳實(shí)驗(yàn)

（1）負(fù)重游泳試驗(yàn)[2]在末次給藥1h后，將小鼠尾根部負(fù)荷10 %體重的鉛塊，放置于水溫為(25±1)℃，水深不低于30cm游泳箱中游泳，記錄小鼠開始游泳至力竭沉入水面下8s。不能浮出水面為止的時(shí)間，記錄小鼠自游泳開始至死亡的時(shí)間(常溫)。

（2）非負(fù)重游泳試驗(yàn)[3]末次給藥后2 h，將小鼠放于(23±0.5)℃的水箱中，水深15cm，水面積43cm?31cm。小鼠放入至小鼠沉入水中不動(dòng)1min以上，視為游泳時(shí)間。

2.2 爬桿實(shí)驗(yàn)[4]

末次給藥后2 h后，將小鼠放在爬桿架的有機(jī)玻璃棒上，使其肌肉處于緊張狀態(tài)，記錄小鼠由于肌肉疲勞從有機(jī)玻璃上跌落下來的時(shí)間。第3次跌落時(shí)終止實(shí)驗(yàn)，累計(jì)3次的時(shí)間作為爬桿時(shí)間。

2.3 轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)[2]

在正式進(jìn)行轉(zhuǎn)棒測試前3 d，每天將各組小鼠置于轉(zhuǎn)棒疲勞儀中的轉(zhuǎn)速為40 r.min-1轉(zhuǎn)棒上，進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練10 min。于末次給予受試藥1 h后，將各組小鼠置于40 r.min-1轉(zhuǎn)棒上，至小鼠從轉(zhuǎn)棒掉下為止，記錄各組小鼠的疲勞轉(zhuǎn)棒時(shí)間。

2.4 跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)[5-7]

（1）選用體重220～260g大鼠，采用根據(jù)Bed-ford大鼠體重/攝氧量，建立的回歸方程漸增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)模型。按以下程度運(yùn)動(dòng)至力竭。第一級負(fù)荷：坡度0°，速度8.2 m/min，時(shí)間15 min；第二級負(fù)荷：坡度0°，速度15.0 m/min，時(shí)間15min；第三級負(fù)荷：坡度10°，速度19.3 m/min，相當(dāng)于76%最大攝氧量，運(yùn)動(dòng)至力竭。運(yùn)動(dòng)時(shí)使用毛刷刺激其尾部，使其保持在跑道前1/3處，以保證運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度。力竭標(biāo)準(zhǔn)，第三級負(fù)荷運(yùn)動(dòng)中，動(dòng)物未能堅(jiān)持本級負(fù)荷跑速，先后滯跑道后1/3處達(dá)3次以上，刺激驅(qū)趕無效。行為特征為呼吸急深及幅度大、腹臥位、垂頭、刺激后無反應(yīng)。

（2）測定大鼠從開始運(yùn)動(dòng)至力竭運(yùn)動(dòng)所用時(shí)間為大鼠運(yùn)動(dòng)能力。大鼠跑步力竭測試，在電動(dòng)跑臺(tái)上以35 m/min的速度，坡度為0°進(jìn)行力竭跑，判斷力竭標(biāo)準(zhǔn)為四肢無力支持住身體、頭部低垂、電刺激后不能繼續(xù)正常奔跑。

2.5 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)[8]

連續(xù)給藥30d，每日1次，給藥25 d后，除正常對照組外其余各組每天均腹腔注射陽性對照藥品，末次給藥1h后將小鼠放入跳臺(tái)適應(yīng)3 min，然后立即通以36 V交流電，動(dòng)物受到電擊，跳回平臺(tái)開始計(jì)時(shí)，記錄5 min內(nèi)小鼠第1次跳下平臺(tái)的時(shí)間(潛伏期)和5 min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)，24 h重做測驗(yàn)。

2.6 鼠尾懸掛實(shí)驗(yàn)[9]

在實(shí)驗(yàn)小鼠尾端1 cm的部位，將其粘貼在一水平木板上，木板離地10 cm以上，小鼠呈倒掛狀。懸尾兩側(cè)用板隔開小鼠視線，小鼠為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但在活動(dòng)一段時(shí)間后，出現(xiàn)間隔性不動(dòng)，顯示“疲勞、失望”狀態(tài)，計(jì)算6～8 min內(nèi)“不動(dòng)時(shí)間”，并同時(shí)觀察大鼠掙扎幅度及抑郁狀態(tài)。

2.7 耐缺氧存活實(shí)驗(yàn)[10]

取雄性小鼠40只，每組各為1O只，按照設(shè)計(jì)要求分組并給藥，連續(xù)灌胃28d，禁食12 h，末次給藥20 min后將各組小鼠分別放人盛有15 g鈉石灰的150 mL廣口瓶內(nèi)，用凡士林涂抹瓶口，保持密閉，記錄各組小鼠的5，10，15，20 min耗氧量、存活時(shí)間和死亡耗氧量。

2.8 肌肉收縮能力的測定[11-12]

（1）于末次給藥30 min后，給大鼠100 g/L水合氯醛(3.0 g/kg)腹腔注射行麻醉，待麻醉后取腹臥位固定，制作在體左側(cè)坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本和右側(cè)坐骨神經(jīng)一比目魚肌標(biāo)本。選擇約10 cm長的細(xì)線縛于腓腸肌和比目魚肌肌腱，縛線一端連接于張力換能器懸梁臂上，將換能器同樣固定在支架上，令肌肉處于最大等張收縮的前負(fù)荷狀態(tài)；將張力換能器與RM一6240系統(tǒng)相連，保護(hù)刺激電極置于坐骨神經(jīng)干，描記波形并記錄數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)中為了防止神經(jīng)肌肉干燥而涂抹液體石蠟，并將動(dòng)物直腸溫度保持在37 ℃左右。小鼠組同樣于末次給藥30 min后，在小鼠尾部1/3～2/3處負(fù)重(體重的10%)后放入水深為22 cm的水槽中游泳。

（2）將蟾蜍雙毀髓后分離腓腸肌，去血污，在任氏液中浸泡穩(wěn)定10 min后使用。將同1只蟾蜍的2條腓腸肌標(biāo)本隨機(jī)分成對照組和給藥組，給藥組浸在試樣中低速攪拌，浸泡20 min；對照組浸在任氏液中作同樣的處理。將股骨頭固定在屏蔽盒中，肌腱端的細(xì)線連于張力換能器上，使肌肉自然拉直，處于持續(xù)恒定的張力狀態(tài)。張力換能器的信號輸入RM6240B型多道生理信號采集處理系統(tǒng)(以下簡稱采集處理系統(tǒng))，刺激電極，輕觸肌肉表面，進(jìn)行2種模式的電刺激，通過采集處理系統(tǒng)分別記錄每種模式下的肌肉收縮曲線。2種刺激參數(shù)分別為：①強(qiáng)度遞增刺激模式：強(qiáng)度0.5V，強(qiáng)度增量0.2V，波寬0.2ms，延時(shí)20 ms，組間延時(shí)4 S；②連續(xù)單刺激模式：刺激強(qiáng)度為最適刺激強(qiáng)度的1.5倍，波寬0.2 ms，延時(shí)20ms，頻率2.5Hz。

3 抗腦力疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?/h2>

3.1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)[13-14]

Morris發(fā)明了水迷宮實(shí)驗(yàn)來測量空間學(xué)習(xí)和記憶能力，用于評估嚙齒動(dòng)物由于衰老、藥物和外傷等因素所造成對運(yùn)動(dòng)和精神系統(tǒng)的影響。該裝置使用簡便易學(xué)，目前已被認(rèn)為是此類研究的經(jīng)典方法。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)主要包括兩個(gè)實(shí)驗(yàn)，隱蔽平臺(tái)實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)在隔音安靜的房間內(nèi)進(jìn)行，水溫控制在22.5 ℃±0.5℃，前1 d將小鼠放入水中自由游泳2 min以熟悉環(huán)境。水是嚙齒動(dòng)物厭惡的環(huán)境，因此，當(dāng)其達(dá)到平臺(tái)后，會(huì)迅速記憶周邊參照物。隱蔽平臺(tái)實(shí)驗(yàn)時(shí)，從東、西、南、北四個(gè)象限隨機(jī)選擇作為入水點(diǎn)，按順時(shí)針方向?qū)⑿∈竺嫦虺乇诜湃胨?，記錄大鼠從入水至爬上平臺(tái)的時(shí)間(即逃避潛伏期)、游泳路程、平均游泳速度及搜索模式。若120 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則由實(shí)驗(yàn)者用手引導(dǎo)其至平臺(tái)，并停留相同時(shí)間逃避潛伏期記為120 s。實(shí)驗(yàn)7 d后，進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)，將平臺(tái)移除。隨機(jī)選擇一入水點(diǎn)，將小鼠置于水中游泳60 s，期間測量跨平臺(tái)次數(shù)、目標(biāo)象限游泳時(shí)間、目標(biāo)象限游泳時(shí)間與總時(shí)間之比、平均游泳速度、游泳路程及搜索模式。每次完成后用毛巾或烘干器使小鼠體溫維持正常，避免由低體溫所致的應(yīng)激。

水迷宮法[8]連續(xù)給藥30 d，每日1次，25d給藥后，除正常對照組外其余各組每天均腹腔注射1.25 mg/kg東莨菪堿注射液，末次給藥后，次日開始測試5 d，第1次測試前將小鼠放在梯子附近，使其自動(dòng)爬上3次。水迷宮全程共5個(gè)錯(cuò)誤記錄點(diǎn)，第1天從倒數(shù)第2個(gè)錯(cuò)誤點(diǎn)處開始計(jì)時(shí)，第2天從倒數(shù)第3個(gè)錯(cuò)誤點(diǎn)處開始計(jì)時(shí)，第3天從倒數(shù)第4個(gè)錯(cuò)誤點(diǎn)處開始計(jì)時(shí)，第4天和第5天從迷宮起點(diǎn)開始計(jì)時(shí)，每天連續(xù)測試3次，記錄第3次到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間。連續(xù)測試5d，最后累計(jì)每只小鼠在5d測試期間到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間，以此作為學(xué)習(xí)成績。

3.2 小鼠睡眠剝奪模型[2]

采用單平臺(tái)水環(huán)境法(SPM)，即在每個(gè)鼠籠中央設(shè)置一個(gè)直徑約為2.5cm，高約為4.0 cm的平臺(tái)，鼠籠內(nèi)注水，水面低于平臺(tái)1 cm。將一只小鼠放置在平臺(tái)上，小鼠可以在平臺(tái)上站立，也可進(jìn)入正相睡眠即非快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠(NREM)。但當(dāng)小鼠進(jìn)入異相睡眠即快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠(REM) 時(shí)，全身骨骼肌張力明顯降低，頸部肌張力降低引起節(jié)律性低頭、觸水、清醒，從而無法進(jìn)入REM，就此達(dá)到睡眠剝奪的目的。

3.3 避暗箱法[15]

利用小鼠喜好鉆黑洞的習(xí)性，設(shè)計(jì)明、暗相連的兩箱，兩箱間隔板底留一孔洞，暗箱底部鋪設(shè)帶電銅柵。末次用藥后1h開始訓(xùn)練小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。訓(xùn)練前20 min，每組腹腔注射氫溴酸東莨菪堿2mg/kg，造成記憶缺損模型，對照組注射等量的生理鹽水。測定時(shí)將動(dòng)物放入明箱，小鼠一鉆入暗箱立即受到電擊，而返回明箱，從而獲得記憶。記錄小鼠自放入明箱到鉆洞進(jìn)入暗箱的潛伏期以及5 min內(nèi)進(jìn)入暗箱的鉆洞次數(shù)。5 min內(nèi)未鉆洞者，潛伏期按300 s計(jì)算，其結(jié)果均由計(jì)算機(jī)自動(dòng)記錄。

4 生理指標(biāo)

4.1 乳酸（BLA）[16]

末次給予受試樣品30min后，各采血20uL加入40 uL破膜液中，立即充分振蕩破碎細(xì)胞，同時(shí)將采血后動(dòng)物置于溫度為30℃的水中不負(fù)重游泳，10min后停止，游泳后立即采血20uL加入40uL破膜液中振蕩，休息20min后再采血20uL加入40uL破膜液中振蕩，用乳酸儀測定各樣品血乳酸值。

4.2 血清尿素氮（BUN）[17]

在末次訓(xùn)練后稱重，用乙醚適度麻醉，摘眼球采血，加入檸檬酸鈉溶液抗凝，37℃水浴中30 min后，4℃3000 r.min-1離心10min，分離制備血清。血清尿素采用UV-GLDH法測定。

4.3 肝糖元/肌糖元[17]

在末次訓(xùn)練后稱重，用乙醚適度麻醉，迅速取肝臟、雙側(cè)睪丸和深層股四頭肌，剔除筋膜，置于預(yù)冷的生理鹽水中洗凈血污，再用濾紙吸干后置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。組織勻漿的制備：稱取適量組織(0.2～1 g)按m(g)組織塊質(zhì)量/V(mL)勻漿介質(zhì)為1/9的比例加取預(yù)冷的勻漿介質(zhì)(0.9%的NaCl溶液)于燒杯中，迅速剪碎組織塊(以上全部操作在冰水浴中進(jìn)行)。勻漿經(jīng)3000 r.min-1低溫離心15 min，分離提取上清液，在4℃冰箱冷藏即用或20℃冰箱冰凍備用。肝糖原、肌糖原采用化學(xué)比色法測定。

4.4 血糖（Glue）[18]

末次給藥運(yùn)動(dòng)后，輕度麻醉大鼠并用眼眶采血，制備血清血糖。血糖含量測定采用鄰甲苯胺法。

4.5 睪酮（T）、血清皮質(zhì)酮、黃體生成素、卵泡刺激素[17]

同“4.2項(xiàng)”血清睪酮、血清皮質(zhì)酮、黃體生成素和卵泡刺激素采用放射免疫分析法測定。

4.6 白細(xì)胞（WBC）和血紅蛋白(HB)[19]

末次給予樣品30 min后，將小鼠放入30℃水中不負(fù)重游泳90min，取出，分別于游泳后1h、24 h和72 h取小鼠尾血10uL于2mL血細(xì)胞分析儀稀釋液中，用血細(xì)胞分析儀檢測白細(xì)胞和血紅蛋白基礎(chǔ)值。

4.7 丙二醛（MDA）腦組織MDA[20]

末次訓(xùn)練后24 h測定腦組織中MDA。處死時(shí)均采用戊巴比妥鈉65 mg/kg麻醉，斷頭處死，立即開顱，迅速取出全腦，浸入冰生理鹽水中洗凈殘余血液，濾紙吸干，用剪刀剪下約0.3-0.4 g腦組織，用電子天平稱重，按l：9(質(zhì)量分?jǐn)?shù))加入冰冷的生理鹽水，冷環(huán)境中勻漿制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的腦組織勻漿液，低溫離心(2000 r/min)20 min，取上清液于樣品管中待測。采用比色法測定MDA含量。

肝組織中MDA[21]小鼠造模后處死，精確稱取固定部位肝組織，以9 mg/mL NaC1溶液沖洗后用濾紙吸干。準(zhǔn)確稱量0.5 g置于試管中，加入5 mL預(yù)冷的9 mg/mL NaC1溶液于試管中。用組織勻漿機(jī)制成0.1g/mL的勻漿。3500 r/min離心115 min，取上清，測定MDA含量。

血清中MDA[22]末次灌胃1 h后，各組取10只小鼠，置于水深30 cm，水溫25.0±2.0℃的水桶中游泳90min，立即摘眼球取血，分離血清，用分光光度法按照丙二醛測定試劑盒說明檢測MDA含量。

4.8 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—PX)腦組織中GSH-PX[20]

同“4.7項(xiàng)腦組織中MDA”制備組織勻漿，采用化學(xué)比色法測定GSH—Px。

血清中GSH-PX[22]同“4.7項(xiàng) 血清中MDA”制備血清，采用胱甘肽過氧化物酶試劑盒說明檢測GSH-PX活力。

4.9 超氧化物歧化酶（SOD）腦組織中SOD[20]

同“4.7項(xiàng) 腦組織中MDA”制備組織勻漿，采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活力。

肝組織中SOD[21]同“4.7項(xiàng) 肝組織中MDA”制備組織勻漿，測定SOD 的含量。

血清中SOD[22]同“4.7項(xiàng) 血清中MDA”制備血清，用超氧化物歧化酶試劑盒說明檢測總SOD活力。

4.10 肌酸激酶(CK)[19]

末次給予樣品30min后，將小鼠放入30℃水中不負(fù)重游泳90min，取出，休息60min后摘眼球采全血約0.5mL。置4℃冰箱約3h，血凝固后2000r/ min離心15min，取血清用生化分析儀檢測CK含量。

4.11 乳酸脫氫酶（LDH）[23]

小鼠末次灌胃30min后，各組小鼠置于30℃的游泳箱中不負(fù)重游泳50min后采眼球血。用乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒測定酶活力。

4.12 ATP酶[24]

小鼠眼靜脈叢取血后，取心臟、股四頭肌組織，濾紙吸干后，稱重，冰上勻漿處理，按ATP酶試劑盒說明書進(jìn)行。

5 小結(jié)

目前，雖然抗疲勞研究方法眾多，但存在有以下三個(gè)方面的問題需要解決：（一）抗腦力疲勞實(shí)驗(yàn)沒有標(biāo)準(zhǔn)模型?！侗＝∈称窓z驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》中的抗疲勞模型標(biāo)準(zhǔn)適用于評價(jià)抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用，對評價(jià)抗腦力疲勞作用無效。（二）綜合上述抗疲勞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃蜕笜?biāo)可知，抗疲勞作用不止于僅對負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、肝糖元/肌糖元、血尿素氮、血乳酸五個(gè)方面的數(shù)據(jù)測定，這與抗疲勞作用機(jī)制研究不斷取得進(jìn)步有關(guān)[25]。研究得到抗疲勞作用機(jī)制包括：調(diào)節(jié)能量代謝、降低代謝產(chǎn)物、抗氧化作用、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、增強(qiáng)免疫力等。目前，抗疲勞的研究實(shí)驗(yàn)和生化指標(biāo)主要集中于力竭游泳實(shí)驗(yàn)，測定肝糖元/肌糖元、血尿素氮、血乳酸、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、丙二醛、睪丸酮、血清皮質(zhì)酮、白細(xì)胞、血紅蛋白等?？蛊谧饔迷u價(jià)標(biāo)準(zhǔn)有待進(jìn)一步統(tǒng)一。（三）提高耐缺氧耐受力已列為二十七項(xiàng)保健食品功能之一，缺氧實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ褪欠窨梢宰鳛榭蛊?/p>

（作者單位：湯臣倍健股份有限公司）

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The Research Progress of Anti-fatigue Experiment

CHAI Jin-zhen, HUANG Yuan-ying, QIU Chun-mei, YANG Xiao-hui, YING Guang-ling?(By-health Co.,LTD, Guang Zhou,510663, Guang Dong, China )

Objective To review the experimental model、the physical and chemical indicators of the anti-fatigue effect study at home and abroad. Methods According to physical fatigue resistance experiment model, mental fatigue resistance experiment model, determination method of the physical and chemical index, three aspects are summarized. Results In addition to the weight loading swimming experiment model in the physical fatigue resistance experiment model research, there are climbing pole experiment model, stick model, running platform, rat tail suspension experiment model, hypoxia survival model, muscle contraction force measurement model, etc. There are four experiment models in the study of mental fatigue resistance： Morris water maze experiment model, the water maze method model, sleep deprivation experiment model and avoiding the “black box” experiment. A lot of physical and chemical indices are measured in the study of anti-fatigue, such as blood lactic acid (BLA), blood urea nitrogen (BUN), glycogen yuan/muscle glycogen, blood sugar (Glue), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSHPX), ATP enzyme, creatine kinase (CK), lactate dehydrogenase (LDH), testosterone (T), cortisol, malondialdehyde (MDA), white blood cells (WBC) and hemoglobin (HB), etc. Concludes The experimental models and determination of physical and chemical indices of anti-fatigue effect are numerous, so a unified standard about specific physical or mental fatigue resistant fatigue resistance experiment is adviced.

Anti-fatigue effect; experimental model; physical and chemical indicator