動物源食品中同時檢測磺胺類、沙星類藥物殘留量的方法
——高效液相色譜法的研究

江詩韻

（惠州市農產品質量安全監(jiān)督檢測中心，廣東惠州 516008）

動物源食品中同時檢測磺胺類、沙星類藥物殘留量的方法
——高效液相色譜法的研究

江詩韻

（惠州市農產品質量安全監(jiān)督檢測中心，廣東惠州 516008）

研究了高效液相色譜法紫外檢測器同時測定動物源食品雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物含量的方法，采用色譜柱為C18（atlantis），4.6mm×250mm×5μm，流動相為磷酸溶液—乙腈（85+15，v/v），紫外檢測波長為270nm，流速 1.0mL/ min，進樣量50μL，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物在0.1～0.4mg/L 范圍內具有良好的線性關系，在添加濃度為0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg 時，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的回收率80%左右，RSD小于5%。本方法操作簡單、快速、精密度高、線性范圍寬，適用于雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的同時測定。

磺胺；沙星；檢測；高效液相色譜法

“民以食為天，食以安為先”。近年來，食品質量安全事件常有發(fā)生，很多商家為了謀取最大利益，在飼養(yǎng)畜禽動物時濫用抗生素藥物，易造成畜禽產品的嚴重污染，通過食物鏈可在人體內蓄積，導致人體過敏反應并產生抗藥性等副作用[1]。

發(fā)展靈敏高、速度快、價格低的藥物殘留檢測技術是保障食品安全的關鍵之一。隨著時代的進步，科技水平也不斷地提高，目前超高效液相色譜-串聯(lián)質譜儀在同時檢測多種類別藥物殘留方面具有重大貢獻，但由于儀器過于昂貴，不能得到普及，而傳統(tǒng)的儀器分析方法前處理過程復雜、效率低下，不能適用于大通量檢測樣本的分析。目前，磺胺類藥物和沙星類藥物的測定，多采用高效液相色譜法，氣相色譜法，毛細管電泳法，薄層色譜法，酶聯(lián)免疫法，液相色譜-串聯(lián)質譜法等。本實驗建立了高效液相色譜法同時測定動物源食品中磺胺類和沙星類藥物殘留的方法。該方法操作簡單、快速、穩(wěn)定、精密度高。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與裝置

美國AgilentHPLC，1200 series（美國安捷倫科技）；勻漿機，1109812（上海維誠儀器有限公司）；電子天平，BS224感量為0.0001g（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；SKR電子天平，42050804E感量為0.01g（廈門巨林儀器有限公司）；高速冷凍離心機，TGL-16M（湘儀離心機儀器有限公司）；渦旋振蕩器，MS1 MiniShaker（德國IKA公司）；氮吹儀，LB-W（青島路博恒業(yè)環(huán)?？萍加邢薰荆?。

1.2 主要試劑與材料

恩諾沙星/ENR、環(huán)丙沙星/CIP、沙拉沙星/SAR、達氟沙星/DAN、磺胺嘧啶/SD、磺胺間甲氧嘧啶/SMM、磺胺地索辛/SDM、磺胺二甲嘧啶/SM2、磺胺甲氧噠嗪/SMP、磺胺喹惡啉/SQ、磺胺甲噁唑/SMZ；乙腈（色譜純）：德國Merck公司；乙酸（分析純）：天津市富宇精細化工有限公司；磷酸（85%分析純）：天津市福晨化學試劑廠；無水硫酸鈉（分析純）：天津市福晨化學試劑廠。

1.3 標準溶液的配制

標準儲備液：準確稱取11種藥物標準物質，用甲醇溶解定容，配制成100μg/mL的標準儲備液，于-20℃冰箱中保存，可使用6個月。

標準工作液：分別取適量的儲備液，用流動相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v）稀釋制備成2.0μg/mL標準工作液，4℃冰箱中保存，可使用3個月。

1.4 色譜分析條件

色譜柱：Atlantis：C185μm 250mm×4.6mm；紫外檢測波長：270nm；進樣量：50μL；柱溫：35℃；流速：1mL/min；梯度洗脫程序見表1。

表1 洗脫梯度

1.5 前處理方法

稱取5.00g雞肉樣品于50mL帶塞的離心管中，加入15mL 1%乙酸乙腈，進行勻漿機高速勻漿，另取10mL 1%乙酸乙腈于另外一個離心管中，進行清洗勻漿機刀頭，將其倒入前一個離心管中，合并兩次提取液，均勻混合，加入3～5g無水硫酸鈉，4000r/min離心5min，取其上清液10mL于15mL的離心管中，用氮吹儀吹近干，加入2mL流動相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v），溶解殘渣，震蕩混合，轉入1.5mL離心管中，8000r/min離心5min，取其上清液過0.22μm的針筒濾膜于進樣瓶中待用。

2 結果與討論

2.1 檢測器的選擇

本實驗單獨采用紫外檢測器，其中11個峰按先后順序分別是：磺胺嘧啶、環(huán)丙沙星、磺胺二甲嘧啶、達氟沙星、磺胺甲氧嗪、恩諾沙星、磺胺間甲氧嘧啶、沙拉沙星、磺胺甲噁唑、磺胺地索辛、磺胺喹噁啉。

2.2 精密度試驗

取7種磺胺混合標準溶液和4種沙星混合標準溶液，按標準樣品測定法測供試品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)進行4次測定。實驗結果表明，在紫外譜圖中峰面積的RSD＜5%。本法測定的精密度較好，實驗結果見表2。

表2 7種磺胺類和4種沙星類藥物的方法精密度

2.3 回收率和檢出限

在陰性雞肉樣品中添加100～400μg/kg濃度范圍內，磺胺類和沙星類藥物回收率在80%左右，可以滿足日常分析的要求，11種物質在本方法中的回收率和檢出限見表3。

3 結論

本實驗采用高效液相色譜—紫外檢測器法測定雞肉中的7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物，選用1%乙酸乙腈提取樣品，確定儀器的最佳工作條件為流動相：0.05%（v/v）磷酸溶液-乙腈（85+15，v/v）；流速：1.0mL/min；柱溫：35℃；紫外檢測波長：270nm；進樣量：50μL。在此最佳條件下，7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的回收率80%左右，RSD小于5%，相關系數(shù)達到0.999。該方法操作簡單、快速、精密度高、線性范圍寬，適用于雞肉中7種磺胺類藥物和4種沙星類藥物的同時測定。

表3 雞肉種7種磺胺類和4種沙星類藥物添加回收率與檢出限

[1]熊春蘭，郭平，占春瑞，等.高效液相色譜-串聯(lián)質譜法同時測定水產品中類種獸藥殘留[J].分析測試學報，2013，32，（2）：193-198.

Meanwhile Detection Animal food source of SAs and Xa-cin Two Medications Residue-HPLC Research

Jiang Shi-yun

High performance liquid chromatography ultraviolet method for the determination of SAS and Xa-cin chicken content，Reversed-phase chromatography column C18（atlantis），4.6mm×250mm×5μm，Mobile phase for phosphoric acid fluid – acetonitrile（85+15，v/v），Ultraviolet detected wavelength is 270nm，flow rate 1.0ml/min，injection volume of 50μL.SAS and Xa-cin in the range of 0.1ppm～0.4ppm with a good linear relationship on the added 0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg of SAS and Xa-cin Add a recovery rate of 80%，RSD is less than 5%，The method is simple，rapid，high precision，linear range for the determination of SAs and Xa-cin chicken content.

SAs；Xa-cin；Detection；HPLC

S859.84

B

1003–6490（2016）04–0197–02

2016–04–10

江詩韻（1989—），女，廣東汕尾人，助理工程師，主要從事農產品質量安全方面工作。