957例新生兒聽力和聾病易感基因聯(lián)合篩查結(jié)果分析

原晶晶，張帆，張淼，鮑詩平

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，北京 100069)

957例新生兒聽力和聾病易感基因聯(lián)合篩查結(jié)果分析

原晶晶，張帆，張淼，鮑詩平

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，北京 100069)

目的 探討新生兒聽力和聾病易感基因聯(lián)合篩查的臨床意義。方法 選擇2014年1～l2月出生后42 d進(jìn)行聽力復(fù)查的957例新生兒，聽力復(fù)篩采用畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（DPOAE）結(jié)合自動(dòng)判別聽性腦干反應(yīng)(AABR)。新生兒在出生后3 d內(nèi)均已采集足跟血檢測(cè)9個(gè)常見耳聾基因突變位點(diǎn)，包括GJB2基因(35 del G、176 del 16、235 del C、299 delAT)、GJB3基因(538 C＞T)、SLC26A4基因(IVS7-2A＞G、2 168 A＞G)、線粒體DNA 12S rRNA基因(1 555 A＞G、1 494 C＞T)。結(jié)果 聽力復(fù)篩通過904例，未通過53例，復(fù)篩通過率為94.46%。突變攜帶者50例，攜帶率為5.22%。聽力復(fù)篩通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者45例，攜帶率為4.98%；聽力復(fù)篩未通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者5例，攜帶率為9.43%。結(jié)論 新生兒聽力和聾病易感基因聯(lián)合篩查，可發(fā)現(xiàn)部分聽力篩查不能發(fā)現(xiàn)的高危耳聾新生兒和遲發(fā)性耳聾新生兒，并可進(jìn)行婚育及用藥指導(dǎo)。

新生兒；耳聾；聽力篩查；基因

聽力是日常生活中至關(guān)重要的能力，聽覺障礙嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。據(jù)2006年全國(guó)第二次殘疾人抽樣調(diào)查顯示，我國(guó)聽力及言語殘疾人口約為2 780萬，其中7歲以下的聾兒約有80萬[1]。耳聾有遺傳和環(huán)境因素等多種病因，據(jù)報(bào)道兒童期感音神經(jīng)性聾的發(fā)病率為1‰，重度先天性聾中有一半以上是遺傳病因[2-3]。我國(guó)開展普遍的新生兒聽力篩查已經(jīng)超過10年，取得了重大成效。但在新生兒聽力篩查中存在一些局限，并非所有的聽力損失在出生后立即表現(xiàn)。對(duì)于遲發(fā)性耳聾，以及潛在的耳聾高危患兒，如藥物敏感性耳聾或大前庭水管綜合征，現(xiàn)有的篩查方式無法檢出[4-5]。為此，2007年提出了聽力和基因聯(lián)合篩查的理念，旨在從遺傳學(xué)角度早期發(fā)現(xiàn)遲發(fā)型耳聾患者并做到目標(biāo)性隨訪[6]。本研究對(duì)957例新生兒聽力復(fù)篩及聾病易感基因結(jié)果進(jìn)行分析，報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2014年1～l2月在首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科進(jìn)行聽力復(fù)篩的957例正常新生兒為研究對(duì)象。

1.2 方法 本研究按知情同意的原則，所有新生兒行聽力復(fù)篩之前，家長(zhǎng)均被詳細(xì)講解和告知聽力復(fù)篩的相關(guān)知識(shí)，理解同意后進(jìn)行檢查。

1.2.1 聽力篩查方法 聽力復(fù)篩采用畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射（DPOAE）結(jié)合自動(dòng)判別聽性腦干誘發(fā)電位(AABR)。復(fù)篩為出生后42 d左右，復(fù)篩未能通過的新生兒于出生3個(gè)月左右轉(zhuǎn)診至指定的聽力診斷中心行評(píng)估和醫(yī)學(xué)診斷，對(duì)于聽力篩查和基因篩查結(jié)果異常者定期隨訪并提供聽力學(xué)咨詢。

1.2.2 聾病易感基因篩查 所有新生兒在出生后3 d內(nèi)均已采集足跟血作為抽提基因組DNA的血樣，應(yīng)用微陣列芯片法檢測(cè)9個(gè)常見耳聾基因突變位點(diǎn)(博奧生物有限公司)，包括GJB2基因(35 del G、176 del 16、235 del C、299 del AT)、GJB3基因(538 C＞T)、SLC26A4基因(IVS7-2A＞G、2 168 A＞G)、線粒體DNA 12S rRNA基因(1 555A＞G、1 494 C＞T)。

2 結(jié)果

2.1 聽力篩查結(jié)果 957例新生兒中42 d聽力復(fù)篩通過904例，未通過53例，復(fù)篩通過率為94.46%。其中雙耳未通過22例，左耳或右耳未過31例。未通過嬰兒均建議3個(gè)月后定期隨訪，1例雙耳極重度聽力損失，行單側(cè)人工耳蝸植入術(shù)，基因篩查GJB2 176del16伴235delC復(fù)合雜合突變；4例輕度聽力損失，其中1例基因篩查異常；27例雙耳聽力正常，其中2例基因篩查異常；10例家長(zhǎng)自覺聽力正常，未進(jìn)行復(fù)查，其中1例基因篩查異常；11例失訪。

2.2 聾病易感基因突變位點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果 篩查957例新生兒檢測(cè)出突變攜帶者50例，攜帶率為5.22%。在50例突變攜帶者中GJB2基因突變者31例，突變攜帶率3.24%，其中176 del 16雜合突變2例，235del C雜合突變21例，299 del AT雜合突變8例；GJB3基因538C＞T雜合突變3例，突變攜帶率為0.31%；SLC26A4基因突變者17例，突變攜帶率為1.78%，其中2168A＞G雜合突變1例，IVS7-2 A＞G雜合突變16例；線粒體DNA 12S rRNA基因突變者3例，突變攜帶率為0.31%，其中1494C＞T均質(zhì)突變0例，1 555A＞G均質(zhì)突變3例；另外復(fù)合性突變4例，分別為GJB2 235delC雜合突變伴有SLC26A4 IVS7-2A＞G雜合突變1例，GJB2 176del16雜合突變伴有GJB2 235delC雜合突變1例，GJB2 299delAT雜合突變伴有SLC26A4 IVS7-2A＞G雜合突變1例，GJB2 235delC雜合突變伴有SLC26A4 2168A＞G雜合突變1例(表1)。

表1 957例新生兒攜帶遺傳性耳聾突變基因情況

2.3 聽力和聾病基因聯(lián)合篩查結(jié)果 957例受檢者中聽力篩查和基因篩查均通過者859例；聽力篩查和基因篩查均未通過5例；聽力篩查通過但基因篩查未通過45例；聽力篩查未通過但基因篩查通過48例(表2)。聽力復(fù)篩通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者45例，攜帶率為4.98%；聽力復(fù)篩未通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者5例，攜帶率為9.43%。

表2 聽力篩查通過與未通過兒的基因篩查比較(例)

3 討論

兒童先天性聽力損失的早期發(fā)現(xiàn)在改善言語和語言功能上非常有價(jià)值，這為普遍的新生兒聽力篩查提供了理論基礎(chǔ)。新生兒聽力與基因聯(lián)合篩查可預(yù)知與遺傳相關(guān)的遲發(fā)性耳聾和潛在的聽障高危兒，彌補(bǔ)單純聽力篩查的局限性[7]。本研究對(duì)象為產(chǎn)后42 d的新生兒，耳道內(nèi)羊水、胎脂、耵聹等分泌物已基本排出或吸收，初篩使用DPOAE，本科室聽力復(fù)篩采用DPOAE及AABR，兩項(xiàng)聯(lián)合應(yīng)用大大降低了假陽性結(jié)果發(fā)生的可能性[4]。本研究樣本中的聽力復(fù)篩通過率為94.46%，與聶文英等[8]報(bào)道的健康產(chǎn)婦所生新生兒大樣本的聽力復(fù)篩通過率93.97%相符。本研究中新生兒母親為乙肝、丙肝及梅毒感染者，孕前或孕期經(jīng)治療，新生兒篩查結(jié)果未受此影響，而遠(yuǎn)期聽力有無異常仍需進(jìn)一步隨訪。本研究中外地患者所占比例較高，有一定的失訪率，經(jīng)反復(fù)電話隨訪仍有未行聽力復(fù)查者，后期將進(jìn)一步完善隨訪機(jī)制，在院期間強(qiáng)化宣教，普及聽力知識(shí)。

文獻(xiàn)報(bào)道GJB2基因突變是我國(guó)非綜合征型感音神經(jīng)性耳聾的首要致病基因[9-10]，本研究中檢出GJB2基因突變者31例，占致聾基因攜帶人群的62%，突變攜帶率為3.24%。與文獻(xiàn)報(bào)道一致。其中176 del 16雜合突變2例，235del C雜合突變21例，299 del AT雜合突變8例。本研究中GJB2 176del16和235delC復(fù)合雜合突變?yōu)橹虏⊥蛔儯犃Y查也未通過，兩種檢查結(jié)果相互印證。該患兒接受人工耳蝸植入術(shù)，目前恢復(fù)良好。本研究中其他GJB2雜合突變者目前并未出現(xiàn)聽力下降，但GJB2雜合突變具有高度的遺傳易患性，2個(gè)GJB2基因突變者婚配有25%的概率生育耳聾患兒[11]，對(duì)研究中檢出的雜合突變者，可以提供依據(jù)進(jìn)行正確的成年期婚育指導(dǎo)。

本研究共檢出GJB3 538C＞T突變位點(diǎn)雜合突變3例，突變率為0.31%。GJB3基因突變可導(dǎo)致常染色體顯性遺傳性非綜合征耳聾，也可導(dǎo)致常染色體隱性遺傳性非綜合征耳聾[12]?；蛲蛔償y帶者可能是延遲性耳聾患者，雖通過新生兒聽力篩查，且未表現(xiàn)出聽覺異常，但需要密切注意聽力狀況，一旦出現(xiàn)聽力異常，及時(shí)干預(yù)。聽力異常的常染色體顯性遺傳性非綜合征患者，有50%的概率遺傳給后代，常染色體隱性GJB3基因538c＞T雜合子突變攜帶者，應(yīng)避免與其他耳聾基因攜帶人群的婚配，如GJB2基因GJB3基因雙重雜合突變也能導(dǎo)致耳聾的發(fā)生[13]。

SLC26A4基因突變是僅次于GJB2基因突變導(dǎo)致感音神經(jīng)性耳聾的遺傳病因[14-15]。國(guó)內(nèi)研究結(jié)果顯示97.9%的前庭水管擴(kuò)大患者具有SLC26A4基因突變[16]。本研究在新生兒中檢出SLC26A4基因雜合突變17例，突變攜帶率為1.78%。前庭水管擴(kuò)大綜合征是感音神經(jīng)性聾兒童中最常見的內(nèi)耳異常，雙耳受累多見，可從出生后至青春期這一年齡段內(nèi)任何時(shí)期開始發(fā)病，發(fā)病突然或隱匿，聽力下降呈進(jìn)行性或波動(dòng)性。首診時(shí)可為重度、極重度聾，輕、中度聽力損失者較少見，本病為常染色體隱性遺傳。對(duì)SLC26A4基因的篩查，可明確診斷，提示患兒采取嚴(yán)格的防護(hù)措施，避免頭顱外傷、感冒、周圍環(huán)境壓力的急劇改變及用力擤鼻等。

線粒體DNA 12S rRNA基因與氨基糖苷類抗生素易感性有關(guān)[17]，具有母系遺傳特性。本研究發(fā)現(xiàn)的3例1555A＞G純合突變新生兒，均通過了聽力篩查，這類小兒如果使用氨基糖苷類抗生素，即使少量或微量，也可引起耳中毒，且耳聾不可逆轉(zhuǎn)。經(jīng)告知家長(zhǎng)基因檢測(cè)結(jié)果，并給予相關(guān)知識(shí)的講解和用藥指導(dǎo)后，此3例小兒目前聽力良好。同時(shí)，由于線粒體DNA的母系遺傳特點(diǎn)，此基因檢測(cè)結(jié)果對(duì)該家系所有母系成員均起到預(yù)警作用。

在新生兒中開展耳聾基因篩查是對(duì)以往新生兒聽力篩查的有力互補(bǔ)，能較早檢出遲發(fā)性耳聾，早期干預(yù)，對(duì)藥物性聾的敏感者也能早期檢出，起到警示作用，具有重要的臨床意義。本研究中聽力復(fù)篩通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者45例，攜帶率為4.98%；聽力復(fù)篩未通過人群中檢測(cè)出突變攜帶者5例，攜帶率為9.43%，聽力復(fù)篩未通過人群耳聾基因攜帶率明顯高于聽力復(fù)篩通過人群。通過本研究的結(jié)果提示在新生兒中開展耳聾基因篩查聯(lián)合聽力篩查意義重大，可在新生兒期篩查出有致聾因素的易患群，及時(shí)進(jìn)行有效的聽力防護(hù)和干預(yù)；特定的基因診斷有重要的臨床意義，對(duì)篩查出致聾基因的攜帶者，對(duì)其未來的婚配、生育及用藥有重要的指導(dǎo)作用。

筆者在后續(xù)工作中還需進(jìn)一步研究耳聾基因檢出陽性者與普通聽力篩查結(jié)果的比較和印證，對(duì)基因或聽力復(fù)篩異常兒童均進(jìn)行至少5年的聽力隨訪，督促患兒進(jìn)行定期聽力學(xué)檢測(cè)，以便早期發(fā)現(xiàn)聽力異常，早期治療，減少聽力殘疾的發(fā)生。

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Study of universal newborn hearing screening and deafness predisposing gene screening in 957 newborns.

YUAN Jing-jing,ZHANG Fan,ZHANG Miao,BAO Shi-ping.Department of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery, Beijing Youan Hospital,Capital Medical University,Beijing 100069,CHINA

Objective To investigate the clinic significance of universal newborn screening with deafness predisposing genes in newborns.Methods A total of 957 newborns underwent hearing screening at 42 d after birth in our hospital from January 2014 to December 2014.Distortion product otoacoustic emissions(DPOAE)combined with autoauditory brainstem response(AABR)was used in hearing screening.These newborns had been taken blood sample at heel at 3 d after birth for detecting 9 common deafness genes mutation,including GJB2(35 del G,176 del 16,235 del C, 299 delAT),GJB3(538 C＞T),SLC26A4(IVS7-2A＞G,2 168 A＞G)and mitochondria DNA 12S rRNA(1 555 A＞G, 1 494 C＞T).Results In 957 newborns of hearing screening,904 newborns showed“pass”,while 53 showed“refer”. The rate of showing“pass”was 94.46%.Mutation of deafness predisposing genes were detected in 50 cases,and the positive detection rate was 5.22%.Forty-five cases of mutations were detected in the newborns who passed hearing screening,with the positive detection rate of 4.98%.Five cases of mutations were detected in the newborns who did not pass hearing screening,with the positive detection rate of 9.43%.Conclusion Combined screening of neonatal hearing and deafness predisposing genes can detect newborns with high risk of hearing loss and delayed deafness,which has an important guiding effect in marriage,childbearing and medication．

Newborn;Deafness;Hearing screening;Gene

R722.19

A

1003—6350（2016）15—2441—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.15.010

2016-03-06)

北京市豐臺(tái)區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)科學(xué)研究項(xiàng)目（編號(hào)：2014-18）

鮑詩平。E-mail：baoshiping@163.com