P27蛋白在腺性膀胱炎的表達(dá)及其與膀胱癌的關(guān)聯(lián)

楊安卿 黃滔 張朝暉 楚晨龍 趙晨輝 馬斌斌 忻志祥 周文龍 沈周俊

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科，上海 200020)

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P27蛋白在腺性膀胱炎的表達(dá)及其與膀胱癌的關(guān)聯(lián)

楊安卿 黃滔 張朝暉 楚晨龍 趙晨輝 馬斌斌 忻志祥 周文龍 沈周俊

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科，上海 200020)

目的 分析P27蛋白與腺性膀胱炎的癥狀嚴(yán)重程度、預(yù)后復(fù)發(fā)及其與膀胱癌的關(guān)聯(lián)。方法 應(yīng)用免疫組化S-P法分別檢測(cè)20例正常膀胱組織、43例腺性膀胱炎組織及25例膀胱癌組織中P27蛋白的表達(dá)程度，分別其與腺性膀胱炎的癥狀嚴(yán)重程度、預(yù)后復(fù)發(fā)及其與膀胱癌的關(guān)聯(lián)。結(jié)果 P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在正常膀胱組織、腺性膀胱炎組織及膀胱癌組織中分別為80%，48.84%和32%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在膀胱癌患者中，P27蛋白陽(yáng)性者與P27蛋白陰性者術(shù)后復(fù)發(fā)率分別為12.5%和64.71%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 P27蛋白表達(dá)的下降或缺失，更容易誘發(fā)腺性膀胱炎及膀胱腫瘤的發(fā)生，增加膀胱癌患者術(shù)后的復(fù)發(fā)率。

P27蛋白； 腺性膀胱炎； 膀胱癌； 蛋白表達(dá)

腺性膀胱炎是一種膀胱黏膜及黏膜下層黏液腺體異常增殖、化生性病變。其發(fā)病率日益增高，且與膀胱癌關(guān)系密切。P27基因是近年來發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，它的表達(dá)產(chǎn)物廣泛抑制多種細(xì)胞周期蛋白和激酶的活性，影響細(xì)胞周期G1期的調(diào)控，使細(xì)胞停滯在G1期，從而抑制了細(xì)胞增值。P27異常表達(dá)參與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展過程，與膀胱癌的分級(jí)分期密切相關(guān)，并對(duì)臨床具有一定的預(yù)后評(píng)估價(jià)值。本研究通過檢測(cè)腺性膀胱炎、膀胱癌及正常膀胱組織的P27基因蛋白，探討P27蛋白與腺性膀胱炎的發(fā)生發(fā)展、癥狀嚴(yán)重程度及預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步評(píng)估腺性膀胱炎與膀胱癌的關(guān)聯(lián)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選自2010年1月至2012年12月上海瑞金醫(yī)院盧灣分院泌尿外科手術(shù)切除且經(jīng)病理診斷證實(shí)的患者，其中腺性膀胱炎組織43例，女33例，男10例，年齡42～75歲，平均54歲；膀胱腫瘤組織25例，女9例，男16例，年齡45～82歲，平均年齡58歲。另選取20例正常膀胱組織取自癌旁正常組織或前列腺增生TUVP手術(shù)病人，分別評(píng)估其與腺性膀胱炎患者臨床癥狀嚴(yán)重程度及術(shù)后復(fù)發(fā)率的關(guān)系。

1.2 試劑及方法 P27鼠McAb即小鼠抗人單克隆抗體及EnVision試劑(HRP) 選自丹麥DAKO公司，使用4 μm石蠟切片，染色方法采用鏈霉菌康生物素蛋白-過氧化酶免疫組化法(S-P法)。判斷標(biāo)準(zhǔn)：以染色呈棕黃色為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，采用顯微攝像計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)，每張切片檢測(cè)5個(gè)視野，每個(gè)視野200個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞所占總細(xì)胞的百分比，以高倍視野陽(yáng)性著色細(xì)胞數(shù)>50%為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用χ2檢驗(yàn)及相關(guān)性檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 P27蛋白在正常膀胱、腺性膀胱炎、膀胱癌組織中的表達(dá) P27陽(yáng)性染色主要表現(xiàn)為細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。在全部檢測(cè)的20例正常膀胱組織中，有16例P27蛋白表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為80%。43例腺性膀胱炎標(biāo)本中，P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)21例，陽(yáng)性率48.84%，顯著低于正常膀胱組織(P<0.05)。25例膀胱癌標(biāo)本中，P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)8例，陽(yáng)性率32%，顯著低于正常膀胱組織(P<0.01)，但與腺性膀胱炎組織相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.179)。

2.2 腺性膀胱炎組織中P27陽(yáng)性率與術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系 觀察43例腺性膀胱炎患者，術(shù)后隨訪12～18個(gè)月，共有8例患者術(shù)后腺性膀胱炎復(fù)發(fā)，總復(fù)發(fā)率為18.60%。術(shù)前檢查P27蛋白表達(dá)陽(yáng)性21例，其中3例患者術(shù)后腺性膀胱炎復(fù)發(fā)，18例術(shù)后隨訪未見復(fù)發(fā)，在P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)者中，腺性膀胱炎的復(fù)發(fā)率為14.29%。而術(shù)前檢查P27蛋白表達(dá)陰性患者22例，其中5例患者術(shù)后隨訪發(fā)現(xiàn)腺性膀胱炎復(fù)發(fā)，17例患者術(shù)后隨訪未見復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率為22.73%。雖然P27蛋白陰性表達(dá)患者的復(fù)發(fā)率高于P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)者，但兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.482)。

2.3 膀胱癌組織中P27蛋白陽(yáng)性率與術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系 25例膀胱癌患者，術(shù)后隨訪12～18個(gè)月，病理均為移行細(xì)胞癌。共有12例患者復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率48%。術(shù)前檢查P27蛋白表達(dá)陽(yáng)性8例，其中1例患者術(shù)后膀胱癌復(fù)發(fā)，7例患者術(shù)后隨訪未見復(fù)發(fā)，在P27陽(yáng)性表達(dá)者中，膀胱癌的復(fù)發(fā)率為25%。而術(shù)前檢查P27蛋白表達(dá)陰性17例，其中11例患者術(shù)后膀胱癌復(fù)發(fā)，其余6例患者術(shù)后隨訪未見腫瘤復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率為64.71%，顯著高于P27蛋白表達(dá)陽(yáng)性組(P<0.05)。

2.4 P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)與腺性膀胱炎患者癥狀嚴(yán)重程度的關(guān)系 在全部的43例腺性膀胱炎患者中，臨床歸納患者主要不適癥狀為尿頻尿急、排尿不適、下腹疼痛以及血尿，分別以第一不適主訴，對(duì)應(yīng)分為A、B、C、D四組。其中A組21例，B組8例，C組5例，D組9例。本實(shí)驗(yàn)共檢測(cè)出P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)21例，其中A組10例，B組3例，C組3例，D組5例，各組的陽(yáng)性率分別為A組47.62%，B組37.5%，C組60%，D組55.55%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，各組間陽(yáng)性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)與腺性膀胱炎患者癥狀程度無明顯關(guān)聯(lián)。

3 討 論

腺性膀胱炎是否為膀胱癌的癌前病變，目前仍存在爭(zhēng)議[1]。P27基因位于人染色體12P13，是一種調(diào)控細(xì)胞周期并抑制細(xì)胞分裂的重要基因，其基因產(chǎn)物P27蛋白為一種分子量為27KD的熱穩(wěn)定性蛋白，與P21、P57具有同源性，參與抑制Cyclin-CDKs復(fù)合物的活性，抑制細(xì)胞周期的過度增殖，從而調(diào)控細(xì)胞周期，同時(shí)具有促進(jìn)細(xì)胞分化、介導(dǎo)細(xì)胞間粘附及誘導(dǎo)凋亡等功能[2-3]。P27基因在各種組織中出現(xiàn)缺失、突變或重排的事件是非常罕見的[4]，但研究證實(shí)在許多惡性腫瘤組織中P27蛋白水平確實(shí)有明顯降低[5]，而P27 mRNA水平不一定有改變，它的表達(dá)異常主要是轉(zhuǎn)錄水平后的改變。P27蛋白水平的下降或缺失，減低了它對(duì)CDK或cyclin-CDK復(fù)合物活性的抑制效應(yīng)，導(dǎo)致CDK的活化效應(yīng)遞增，使細(xì)胞能夠完成細(xì)胞周期G ～S期的重要轉(zhuǎn)換，驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期的運(yùn)行，而使細(xì)胞增殖、分裂過快、過多，乃至腫瘤形成[6]。目前研究[7-8]表明，P27蛋白低表達(dá)與胃癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、肝癌、鼻咽癌、卵巢癌等密切相關(guān)。P27水平越低，預(yù)示腫瘤預(yù)后越差。P27蛋白低表達(dá)與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展、肌層浸潤(rùn)、早起復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)。

本研究顯示，P27蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在正常膀胱組織、腺性膀胱炎組織及膀胱癌組織中分別為80%、48.84%及32%，其中后兩者顯著低于前者，表明P27蛋白的減弱或缺失，與腺性膀胱炎及膀胱癌的發(fā)生密切相關(guān)。本研究的43例腺性膀胱炎患者中，P27蛋白陽(yáng)性者與P27蛋白陰性者術(shù)后的復(fù)發(fā)率分別為14.29%與22.73%，雖P27蛋白陰性者術(shù)后復(fù)發(fā)率高于P27蛋白陽(yáng)性者，但兩者之間無明顯差異，提示P27蛋白表達(dá)的改變與腺性膀胱炎患者術(shù)后的復(fù)發(fā)率無明顯關(guān)聯(lián)，而這可能原因?yàn)樾g(shù)后隨訪時(shí)間過短，本研究的25例膀胱癌患者中，P27蛋白陽(yáng)性者與P27蛋白陰性者術(shù)后復(fù)發(fā)率分別為12.5%與64.71%，兩者之間有顯著差異，提示P27蛋白的降低或缺失，更容易誘發(fā)膀胱癌的復(fù)發(fā)。本研究統(tǒng)計(jì)了腺性膀胱炎的幾個(gè)主要癥狀，如尿頻尿急、排尿不適、下腹疼痛及肉眼或鏡下血尿，其中各癥狀組中，P27蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率分別為47.62%、37.5%、60%及55.55%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，各癥狀之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示P27蛋白表達(dá)的高低與腺性膀胱炎的主訴癥狀的嚴(yán)重程度無明顯關(guān)聯(lián)。

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