不同品種棗總提物體外抗氧化性能比較

吳小燕， 劉 瓊， 王仁才

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖南長沙 410128)

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不同品種棗總提物體外抗氧化性能比較

吳小燕， 劉 瓊， 王仁才*

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖南長沙 410128)

摘要[目的]分析并比較不同品種棗總提物的體外抗氧化性能。[方法]對湖南衡南地區(qū)的藥棗、小米棗及祁東地區(qū)的藥棗、雞蛋棗、梨棗、子代糖棗、母本糖棗、酸棗共8個品種的棗進(jìn)行水提取，通過考察其總提物羥基自由基清除力、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除力來初步評價其體外抗氧化性能的強(qiáng)弱。[結(jié)果]8個品種棗總提物清除自由基能力差別較大，其中衡南的藥棗清除自由基能力明顯強(qiáng)于其他品種棗，衡南小米棗及祁東梨棗清除自由基能力僅次于衡南藥棗，且8個品種棗總提物對DPPH自由基清除力均高于其對羥基自由基相應(yīng)的清除能力。[結(jié)論]棗總提物具有一定的體外抗氧化性，這為篩選優(yōu)質(zhì)棗品種提供了有利依據(jù)。

關(guān)鍵詞棗總提物；羥基自由基清除力；DPPH 自由基清除力

棗(ZiziphusjujubaMill.)，又名紅棗、大棗等，為鼠李科棗屬小喬木植物的果實[1]。我國棗的種植面積占全世界95%以上[2]?！侗静菥V目》中記載，紅棗有養(yǎng)血、補(bǔ)氣、益脾胃、養(yǎng)顏美容、益智延年、生津止渴等功效[3]。棗中的主要功能成分有多糖類[4-5]、黃酮類[6]、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)等[7]。現(xiàn)代藥理研究已表明，棗中富含的多糖類物質(zhì)具有提高免疫功能[8-9]、明顯的抗補(bǔ)體活性和促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖功能[10]等作用，且其在養(yǎng)心安神、緩和藥性[11]、補(bǔ)氣養(yǎng)血、抗氧化延緩衰老[12]、抗腫瘤[13-14]等方面也具有重要作用。

棗果中黃酮類化合物一般具有較強(qiáng)清除自由基的能力，同時棗黃酮在抗菌、抗腫瘤、降三高等方面有著一定的療效[15-16]；而環(huán)磷酸腺苷具有抗過敏、提高免疫力、改善記憶力、促進(jìn)神經(jīng)再生等功效，同時其作為一種蛋白激酶致活劑[17]，參與體內(nèi)多種生理生化的反應(yīng)[18-20]。目前為止，國內(nèi)外對棗中多糖、黃酮等功能成分的研究技術(shù)已比較成熟，但缺乏對棗總提物的系統(tǒng)研究。筆者以湖南衡陽地區(qū)不同品種棗為研究對象，研究其總提物清除自由基的能力，從而評價其體外抗氧化性，為篩選優(yōu)質(zhì)高效的棗品種提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料原料：供試原料為湖南省衡南縣采集的藥棗、小米棗與祁東縣采集的子代糖棗、母本糖棗、藥棗、雞蛋棗、酸棗、梨棗，共8個棗品種果實。

主要試劑：無水乙醇、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、過氧化氫(H2O2)、水楊酸、硫酸亞鐵，均為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

主要儀器設(shè)備：ZW1105051705紫外可見分光光度計，上海光譜儀器有限公司；電熱恒溫水浴鍋；AUW220D電子天平，日本shimadzu公司；DR-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；冷凍干燥機(jī)。

1.2方法

1.2.1相關(guān)溶液的配制。6 mmol/L水楊酸-乙醇溶液：稱取分析純的水楊酸0.414 4 g，用無水乙醇溶解并定容于500 mL 容量瓶中，搖勻即得。2 mmol/L硫酸亞鐵溶液：稱取分析純的硫酸亞鐵固體0.278 0 g，用蒸餾水溶解并定容于500 mL 容量瓶中，搖勻即得。6 mmol/L雙氧水溶液：移取分析純的H2O2溶液0.34 mL,用蒸餾水定容于500 mL 容量瓶中，搖勻即得。0.2 mmol/L DPPH溶液：稱取分析純的DPPH 0.020 0 g，用無水乙醇溶解并定容于250 mL 容量瓶中，搖勻即得。

1.2.2待測樣品的制備。

1.2.2.1不同品種棗的預(yù)處理。將采樣的新鮮棗置于烘箱中，控制一定溫度，烘干，去核，用粉碎機(jī)粉碎，過60目篩，得不同品種棗粉樣品，用自封袋密封，放于冰箱中冷藏備用。

1.2.2.2不同品種棗總提物的制備方法。分別稱取不同品種棗樣品10.0 g,控制料液比為1∶10 g/mL，加入蒸餾水，置于60 ℃水浴鍋上提取1 h,抽濾，得到濾液，將濾渣依法再提一次，抽濾，合并2次濾液，60 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至20 mL左右，冷凍干燥成粉末。精密稱取干燥成粉末的不同品種棗適量，配成一定濃度梯度的棗總提物溶液，待測定其清除自由基能力。

1.2.3DPPH自由基清除能力的測定。參照刁靜靜等的試驗方法[21]，稍作修改。精密量取2.0 mL不同棗樣品的不同濃度梯度的溶液于試管中，加入0.2 mmol/L的DPPH-乙醇溶液2.0 mL，混合均勻后，于室溫下暗處放置20 min，以樣品提取溶劑為參比調(diào)零，于517 nm波長處測定其吸光度值A(chǔ)i;精密量取 2.0 mL 不同棗樣品的不同濃度梯度的溶液于試管中，加入DPPH的溶劑無水乙醇2.0 mL，混合均勻后，于室溫下暗處放置20 min，后于 517 nm波長處測定其吸光度值A(chǔ)j;精密量取 0.2 mmol/L 的 DPPH溶液2.0 mL，加入蒸餾水2.0 mL，混合均勻后，于室溫下暗處放置20 min，后于517 nm波長處測定其吸光度值A(chǔ)c。各濃度樣液均平行處理3次，取其平均值。按下式計算各樣品溶液對DPPH自由基的清除率：

DPPH清除率(%) =[1-(Ai-Aj)/Ac]× 100

1.2.4羥基自由基清除能力的測定。在25 mL 的比色管中依次移取5 mL 2 mmol/L硫酸亞鐵溶液和 5 mL 的 6 mmol/L 雙氧水溶液 ,混合均勻后用 6 mmol/L水楊酸溶液定容至刻度。在36~37 ℃的恒溫水中反應(yīng)15 min后在分光光度計上測其A0值。在A0值的測定體系中 ,加入1 mL不同濃度梯度的不同品種棗的提取液,在36~37 ℃的恒溫水中反應(yīng)15 min后在分光光度計上測其Ax值。各濃度樣液均平行處理3次，取其平均值。按下式計算各樣品溶液對羥基自由基的清除率：

羥基清除率(%)=(A0-Ax)/A0×100

2結(jié)果與分析

2.1DPPH自由基清除能力DPPH自由基常用來評估抗氧化物的供氫能力，DPPH在接收電子后517 nm波長處吸光度降低，吸光度降低的程度與抗氧化劑的抗氧化能力成正比。從圖1可見，不同品種棗總提物對DPPH的清除率差別較大，在低濃度范圍內(nèi)，各品種棗總提物均隨著濃度的增大其清除自由基能力也逐漸加大，其中衡南的藥棗和祁東的梨棗清除能力最強(qiáng)，而祁東的酸棗在低濃度時清除率最低，各品種棗總提物在濃度達(dá)到2.500 mg/mL以后，其清除能力基本不變。這可能與棗的種植地區(qū)各種綜合環(huán)境及棗品種的差異性有關(guān)。

圖1　不同品種棗DPPH自由基清除能力Fig.1　DPPH free radical scavenging ability of different varieties of jujube

2.2羥基自由基清除能力根據(jù)Fenton方法產(chǎn)生羥基自由基的模型[22],H2O2與亞鐵離子反應(yīng)生成羥基自由基,而水楊酸能有效地捕捉羥基自由基且產(chǎn)生有色產(chǎn)物,若在該體系中加入一定量的水楊酸,生成的有色產(chǎn)物在波長510 nm 處被較強(qiáng)地吸收。若在該體系中加入黃酮類化合物,由于黃酮類化合物具有清除羥基自由基的特點,從而降低甚至完全清除羥基自由基,而使有色物質(zhì)的濃度極大降低。吸光度值降低的程度與清除自由基的能力成正比。從圖2可見，不同品種棗總提物對羥基自由基的清除率差別較大，在低濃度范圍內(nèi)，各品種棗總提物均隨著濃度的增大其清除自由基能力也逐漸加大，其中衡南的藥棗和小米棗清除能力最強(qiáng)，其余6個品種棗清除羥基自由基的能力差別不大。這可能與不同品種棗的種植地區(qū)各種綜合環(huán)境及棗品種差異性有關(guān)。

圖2　不同品種棗羥基自由基清除能力Fig.2　Hydroxyl free radical scavenging ability of different varieties of jujube

3結(jié)論

對湖南衡陽兩大地區(qū)共8個品種棗總提物進(jìn)行了DPPH和羥基自由基清除率的研究，結(jié)果表明，衡南藥棗的水總提物清除DPPH和羥基自由基的能力均高于其他7個品種棗，而衡南的小米棗和祁東的梨棗清除自由基能力相對也較強(qiáng)。通過對2種自由基清除率的測定，結(jié)果表明，8個品種棗對DPPH自由基的清除率均高于其對羥基自由基相應(yīng)的清除率。這為篩選出具有抗氧化能力的優(yōu)良棗品種提供了可靠依據(jù)，可進(jìn)一步促進(jìn)湖南衡陽地區(qū)的棗果資源的開發(fā)與利用。

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Comparison of Antioxidant Activity in vitro of the Total Extracts from Different Varieties of Jujube

WU Xiao-yan, LIU Qiong, WANG Ren-cai*(Hunan Agricultural University, Changsha, Hunan 410128)

Abstract[Objective] To analyze and compare in vitro antioxidant activity of the total extracts from different varieties of jujube. [Method] Eight varieties of jujube including Hengnan medicinal jujube, millet jujube and Qidong medicinal jujube, egg date, pear jujube, offspring sugar jujube, female parent jujube, wild jujube were extracted with water, the antioxidant activity in vitro was evaluated through investigating their hydroxyl radical scavenging and DPPH free radical scavenging abilities. [Result] The free radical scavenging ability of total extracts from 8 kinds of jujube had significant differences, among them, the ability of medicinal jujube from Hengnan was obviously stronger than that of other varieties of jujube, millet jujube of Hengnan and pear jujube took the second place, DPPH free radical scavenging abilities of total extracts from 8 varieties of jujube were all higher than OH free radical scavenging abilities. [Conclusion] The total extracts from jujube has a certain antioxidant activity in vitro, which will provide a favorable basis for selecting high quality jujube varieties.

Key wordsTotal extracts from jujube; Hydroxyl radical scavenging; DPPH free radical scavenging

收稿日期2015-12-16

作者簡介吳小燕(1990- )，女，湖南東安人，碩士研究生，研究方向：功能產(chǎn)品的開發(fā)與評價。*通訊作者，博士，博士生導(dǎo)師，從事藥用植物資源工程研究。

基金項目湖南省自然科學(xué)基金委員會與衡陽市政府自然科學(xué)聯(lián)合基金項目(13JJ8010)。

中圖分類號S 665.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號0517-6611(2016)02-119-02