華蟾素聯(lián)合GP方案治療中晚期非小細胞肺癌的臨床療效和抗腫瘤機理

陳　彬

作者單位:215021 上海交通大學醫(yī)學院附屬蘇州九龍醫(yī)院

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華蟾素聯(lián)合GP方案治療中晚期非小細胞肺癌的臨床療效和抗腫瘤機理

陳彬

作者單位:215021 上海交通大學醫(yī)學院附屬蘇州九龍醫(yī)院

【摘要】目的探討華蟾素聯(lián)合GP化療方案治療中晚期非小細胞肺癌的臨床效果和抗腫瘤機制。方法將接受治療的中晚期非小細胞肺癌患者隨機分為對照組和觀察組，對照組采用GP化療方案進行治療(吉西他濱1 000 mg/m2，d1、d8；順鉑80～100 mg/m2，d2～3)；觀察組患者在對照組治療的基礎上給予靜脈注射華蟾素20 ml/d，d1~10。28天為1個療程。2個療程后分別對2組患者免疫功能，治療有效率，中位生存時間，1、2年生存率和不良反應進行對比分析。結果對照組治療前后CD4和CD8 T淋巴細胞、NK細胞比例及CD4/CD8比值比較無差異 (P>0.05)。觀察組治療后CD4 T淋巴細胞比例，NK細胞比例和CD4/CD8比值較治療前顯著增加，而CD8 T淋巴細胞比例較治療前顯著下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。觀察組臨床治療有效率 (62.22%) 較對照組(40.00%) 明顯提高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。觀察組中位生存時間明顯長于對照組(P<0.05)。觀察組1、2年生存率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組和觀察組患者主要不良反應發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論華蟾素不僅可抑制腫瘤細胞增加，促進腫瘤細胞凋亡，而且可提高患者免疫功能，這一機理可能是其與GP方案連用治療中晚期非小細胞肺癌效果優(yōu)于單純GP方案的原因之一。因此華蟾素聯(lián)合GP方案治療中晚期非小細胞肺癌值得臨床推廣使用。

【關鍵詞】華蟾素；GP方案；中晚期非小細胞肺癌；療效

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:224～227)

肺癌中約85%的患者為非小細胞肺癌[1]。目前大多數(shù)非小細胞肺癌患者就診時往往已經(jīng)處于中晚期，失去了手術治療的機會[2-3]。因此化療或放療是中晚期非小細胞肺癌患者的主要治療方法。但是放療和(或)化療并不能顯著延長患者的生存時間，提高患者治愈率，而且其嚴重的不良反應也嚴重地影響了患者生活質(zhì)量[4]。因此尋求合理有效的治療方案對延長非小細胞肺癌患者的生存以及改善生活質(zhì)量具有重要意義。

近年來，諸多研究顯示中藥有效成分(單體)或者中藥復方具有顯著的抑制腫瘤效果[5-6]。華蟾素是從中華大蟾蜍之陰干全皮經(jīng)嚴格工藝提取而制成的一種注射用滅菌水溶液[7]。大量體內(nèi)外研究顯示華蟾素可抑制癌細胞的DNA和RNA的合成，阻礙細胞的分裂繁殖，誘導癌細胞的凋亡，是其具有較好抗腫瘤效果的原因之一[8-9]。我院將華蟾素和GP化療方案聯(lián)合用于中晚期非小細胞肺癌的治療，取得了顯著的治療效果。

1資料與方法

1.1　一般資料

1.1.1入選標準所有患者均經(jīng)細胞或病理學檢測到可評估的病灶；預計生存期超過4個月；全身功能狀態(tài)(KPS)評分>70分；肝腎功能正常，血常規(guī)以及心電圖正常；并同意隨機分組決定治療方案并簽署知情同意書的Ⅲ期和Ⅳ期非小細胞肺癌患者。

1.1.2排除標準患者有不可測量的病灶，如胸腔和腹腔積液或者骨轉移等；合并急性感染等疾病者；存在心肝腎等主要器官功能衰竭者；存在兩者以上腫瘤患者；存在精神疾病者；孕婦或哺乳期婦女；依從性差，無法完成本研究者。

1.1.3研究對象滿足上述條件的患者按照隨機分組法隨機分為對照組和觀察組。對照組45例，其中男性26例，女性19例；年齡39～76歲，平均年齡(59.4±10.7)歲；細胞學類型：腺癌21例，鱗癌14例，腺鱗癌10例；臨床分期：Ⅲ期28例，Ⅳ期17例。觀察組45例，其中男性24例，女性21例；年齡40～75歲，平均年齡(60.1±11.5)歲；細胞學類型：腺癌19例，鱗癌16例，腺鱗癌10例；臨床分期：Ⅲ期25例，Ⅳ期20例。對照組和觀察組患者在年齡、性別、細胞學類型和臨床分期等方面指標比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2　治療方法

對照組采用GP方案(吉西他濱和順鉑)進行化療，吉西他濱1 000 mg/m2，加入生理鹽水250 ml中靜脈滴注第1、8天，30～60 min內(nèi)滴完，順鉑80～100 mg/m2，第1～3天靜脈滴注。觀察組患者在對照組治療基礎上給予靜脈滴注華蟾素20 ml，1次/天，連續(xù)治療15天。華蟾素注射液與化療藥物同周期使用。2組患者在治療期間給予水化、利尿，預防性給予托烷司瓊、地塞米松、胃復安止吐治療。2組患者均28 d為1個周期，治療3個周期。

1.3　免疫功能分析

對照組和觀察組患者在治療前和治療后3個月均從靜脈采集血液3 ml，采用紅細胞裂解液裂解紅細胞后，將1×106個細胞(制備3管)重懸于100 μl的含1%BSA 的PBS緩沖液，4 ℃封閉30 min，1 000 rpm/min離心3 min后棄上清，細胞重新重懸于100 μl的含1%BSA 的PBS緩沖液。3管細胞分別加入CD3-FITC和CD4-PE、CD3-FITC和CD8-PE以及CD56-PE流式抗體，4 ℃孵育封閉30 min，然后離心棄上清，細胞用PBS緩沖液洗滌2次，采用BD FACSCalibur 進行分析。最后計算平均值，比較治療前后患者免疫功能變化。

1.4　療效及評定標準

臨床治療有效率：根據(jù)最新制定的“新的實體瘤療效評價標準[10]”分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)和進展(PD)。有效率=(CR+PR)/總例數(shù)×100。中位生存時間(MST)表示恰好有50%的研究對象個體尚存活的時間。1、2年生存率指經(jīng)過1、2年時段仍然存活的研究對象個體的百分率。不良反應按WHO標準分為0～Ⅳ級[11]。

1.5　統(tǒng)計分析

2結果

2.1　2組患者治療前后免疫功能比較

對照組治療后CD3+CD4+、CD3+CD8 T淋巴細胞比例、CD3+CD4+/CD3+CD8比值和NK細胞比例較治療前無顯著性差異(P>0.05)。觀察組治療后CD3+CD4+淋巴細胞、CD3+CD4+/CD3+CD8比值和NK細胞比例較治療前顯著性升高，而CD3+CD8+T淋巴細胞的比例較治療前顯著性下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1。

圖1　對照組和觀察組患者治療前后免疫功能比較

2.2　2組療效比較

對照組臨床治療有效率為40.00%，觀察組為62.22%。觀察組臨床治療有效率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1　對照組和觀察組患者臨床治療有效率比較/例

2.3　2組患者生存時間和生存率比較

對照組和觀察組患者隨訪5～24個月，平均隨訪時間(13.4±8.9)個月。根據(jù)隨訪資料對2組患者情況構建生存曲線，結果如圖2所示，對照組和觀察組患者的中位生存時間分別為10.5個月和14.0個月，觀察組中位生存時間明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組患者的1年和2年生存率分別為44.44%和8.89%，而觀察組患者的1年和2年生存率分別為62.22%和17.78%。觀察組患者1年和2年生存率明顯高于對照組，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

圖2　對照組和觀察組患者生存曲線比較

2.4　2組患者不良反應比較

對照組和觀察組的主要不良反應表現(xiàn)為骨髓抑制和胃腸道反應，2組患者均以Ⅰ～Ⅱ級不良反應為主，患者均可耐受。2組患者不良反應發(fā)生率比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　對照組和觀察組不良反應比較(例，%)

3討論

中晚期非小細胞肺癌患者大多數(shù)已經(jīng)失去手術治療的機會，多采用化療進行治療。GP方案是FDA批準的治療非小細胞肺癌的一線治療方案，大量的臨床研究顯示其臨床治療有效率為21%～41%，中位生存時間為8.0～11.1個月，1年生存率為32%～39%[12]。本研究采用GP方案治療非小細胞肺癌，臨床治療有效率為40%，中位生存時間為10.5個月，1年生存率為44.44%，而2年生存率僅為8.89%。這一結果與目前大量的臨床報道結果一致?？傮w而言，GP方案治療中晚期非小細胞肺癌的療效較低，而且患者治療過程中不良反應的發(fā)生率比較明顯。因此如何提高非小細胞肺癌的臨床治療有效率成為腫瘤治療的焦點。

中藥抗腫瘤是腫瘤治療的方法之一，近年來能成為腫瘤治療的熱點。這些抗腫瘤藥物通常與化療藥物結合使用用于臨床抗腫瘤治療，并取得了顯著的療效，甚至部分中藥與化療藥物搭配后可獲得意外的效果。華蟾素注射液是從中藥大蟾蜍皮中獲得的重要水制劑，其主要成分為蟾蜍內(nèi)酯，目前研究顯示其具有清熱解毒、利水消腫和化瘀潰堅等療效[13]。臨床研究顯示華蟾素具有抑制腫瘤細胞增殖，促進腫瘤細胞凋亡等效果[14]。因此我院將華蟾素和GP化療方案聯(lián)合應用于非小細胞肺癌的治療，結果顯示聯(lián)合治療使非小細胞肺癌的臨床治療有效率提高22.22%，中位生存期延長了3.5個月，1年和2年生存率增加了17.78%和8.89%。說明華蟾素聯(lián)合GP方案治療非小細胞肺癌具有較好的臨床效果。

我們進一步分析了華蟾素聯(lián)合GP方案治療非小細胞肺癌具有較好臨床效果的原因，結果發(fā)現(xiàn)華蟾素聯(lián)合GP治療方案可顯著提高非小細胞肺癌患者外周CD4 T淋巴細胞和NK細胞的比例，同時CD8 T淋巴細胞的比例顯著下降。腫瘤患者免疫功能低下，處于免疫抑制狀態(tài)，表現(xiàn)為CD8 T淋巴細胞比例增加，而CD4 T淋巴細胞比例顯著性下調(diào)，而CD4 T淋巴細胞介導的細胞免疫在抗腫瘤免疫過程中發(fā)揮著重要作用。我們的結果證實華蟾素可以顯著改善非小細胞肺癌患者的機體免疫功能，提高患者自身抗腫瘤免疫反應，這一結果也解釋了華蟾素具有顯著抗腫瘤效果的原因之一。

綜上所述，華蟾素聯(lián)合GP化療方案治療非小細胞肺癌療效顯著，患者生存時間顯著延長，生存率顯著提高，且患者機體免疫功能得到了明顯改善，值得臨床推廣使用。

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(編輯：甘艷)

Clinical Efficacy and Anti-tumor Mechanism of Cinobufacini Combined with GP

Regimen for Advanced Non-small Cell Lung Cancer

CHENBin.SuzhouJiulongHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai，215021

【Abstract】ObjectiveTo explore the clinical efficacy and anti-tumor mechanism of cinobufacini combined with GP regimen for advanced non-small cell lung cancer(NSCLC).Methods90 patients with advanced NSCLC were divided randomly into the control group and the observation group.The control group were treated with GP regimen.Patients in the observation group were treated with cinobufacini combined GP regimen.The regime repeated in 28 days.All patients were treated for 56 days.The immune function，treatment efficiency，mean survival time，1-，2- year survival rate and side effects of the 2 group were analyzed.ResultsCompared with before the treatment，the immune function in the control group after treatment did not significantly improve (P>0.05).The percentage of CD4 T lymphocytes and NK cells and the ratio of CD4 and CD8 T lymphocytes in the observation group after treatment significantly enhanced than that before treatment (P<0.05).The treatment efficiency in the observation group significantly increased than that of the control group (P<0.05).Mean survival time and 1-，2- year survival rate in the observation group significantly enhanced than that of the control group (P<0.05).The side effects had no statistical difference between the 2 groups (P>0.05).ConclusionCinobufotalin not only inhibit tumor cells，promote tumor cell apoptosis，but aslo improve immune function in patients with advanced NSCLC.Cinobufacini combined with GP regimen have better clinical efficacy，and it is worthy of clinical application.

【Key words】Cinobufotalin;GP regimen;Non-small cell lung cancer(NSCLC);Efficacy

(收稿日期2015-03-24修回日期 2015-08-24)

中圖分類號：R734.2

文獻標識碼：A

文章編號：1001-5930(2016)02-0224-04

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.02.015