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    西藏地區(qū)135株結(jié)核分枝桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析

    2016-02-22 17:24:47李論宇別明江阿忠扎西努宗李長山杜寶中
    西部皮革 2016年24期
    關(guān)鍵詞:西藏大學(xué)抗結(jié)核結(jié)核

    李論宇,別明江,阿忠,扎西努宗,李長山,杜寶中

    (1.西藏大學(xué),西藏 拉薩 850000;2.四川大學(xué),四川 成都 610000;3.西藏自治區(qū)第三人民醫(yī)院,西藏 拉薩 850000;4.西藏職業(yè)技術(shù)學(xué)院,西藏 拉薩 850000)

    西藏地區(qū)135株結(jié)核分枝桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析

    李論宇1,別明江2,阿忠3,扎西努宗3,李長山4,杜寶中1

    (1.西藏大學(xué),西藏 拉薩 850000;2.四川大學(xué),四川 成都 610000;3.西藏自治區(qū)第三人民醫(yī)院,西藏 拉薩 850000;4.西藏職業(yè)技術(shù)學(xué)院,西藏 拉薩 850000)

    了解西藏地區(qū)結(jié)核分枝桿菌對(duì)抗結(jié)核藥物的耐藥情況,為臨床合理用藥提供參考依據(jù)。以西藏自治區(qū)第三人民醫(yī)院的痰涂片標(biāo)本抗酸菌檢測陽性的肺結(jié)核患者作為監(jiān)測對(duì)象,采用WHO推薦的堿處理法對(duì)痰標(biāo)本進(jìn)行處理后、培養(yǎng),成功分離的結(jié)核分枝桿菌的菌株,然后對(duì)這135例患者的菌株藥敏實(shí)驗(yàn),抗結(jié)核藥物包括異煙肼、利福平、鏈霉素、乙胺丁醇、阿卡米星、左氧氟沙星。結(jié)果 135例患者的菌株中,耐藥菌株 86例,總耐藥率達(dá) 64.3%(86/135),總耐多藥率達(dá) 20.7%(28/135),對(duì) INH、RFP、SM、EMB、AKM、LVX 的耐藥率分別為 39.3%(5/135)、36.9%(50/135)、44.9%(61/135)、19.3%(26/135)、5.9%(8/135)和 8.0%(11/135)。經(jīng)檢驗(yàn),x2具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:西藏地區(qū)肺結(jié)核患者的耐藥率高。

    西藏地區(qū);結(jié)核分枝桿菌;耐藥性

    近幾十年來,結(jié)核病的蔓延呈現(xiàn)重新上升趨勢。引起全球結(jié)核感染疫情回升的主要因素之一是耐藥結(jié)核分枝桿菌,尤其是耐多藥結(jié)核分枝桿菌的出現(xiàn)及其引起疾病的蔓延。我國結(jié)核的耐藥形勢十分嚴(yán)峻,總耐藥率為27.8%,耐多藥率高達(dá)10.7%,由此而造成的結(jié)核病患病率和死亡率居高不下。我國為 22 個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一,同時(shí)也是 27 個(gè)耐多藥結(jié)核病流行嚴(yán)重的國家之一[1]西藏是結(jié)核病的高發(fā)地區(qū),呈發(fā)病率高、耐藥率高的特點(diǎn)。耐多藥肺結(jié)核傳染期長、治療難度大、費(fèi)用高,有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道其病死率可達(dá) 37%而治療有效率僅為 56%[2]。通過對(duì)耐藥結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行耐藥性監(jiān)測,來增加耐藥結(jié)核病治愈率、降低病死率,給臨床醫(yī)師提供及時(shí)準(zhǔn)確的耐藥數(shù)據(jù)以便其制定最佳方案實(shí)施治療。為了解西藏地區(qū)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌的耐藥現(xiàn)狀,通過對(duì) 2015年 8 月至2016年11月間分離培養(yǎng)的135株結(jié)核分枝桿菌菌株進(jìn)行了耐藥性研究。

    1 材料

    2015年8月至2016年11月從西藏自治區(qū)第三人民醫(yī)院肺科獲得肺結(jié)核患者痰培養(yǎng)陽性的結(jié)核分枝桿菌菌株135株。結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株 H37Rv(ATCC27294)由國家疾病預(yù)防控制中心提供,西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室真空冷凍保存。

    酸性羅氏培養(yǎng)基、改良羅氏培養(yǎng)基及對(duì)硝基苯甲酸(PNB)培養(yǎng)基根據(jù)中國防癆協(xié)會(huì)《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》[2]方法自行配制使用;藥敏試驗(yàn)藥物種類及培養(yǎng)基內(nèi)藥物終濃度如下:異煙肼(INH)0.2μg/ml、利福平(RFP)40μg/ml、鏈霉素(SM)4μg/ml、乙胺丁醇(EMB)20μg/ml、阿米卡星(AMK)10μg/ml、左氧氟沙星(LVX)20μg/ml。

    2 方法

    試驗(yàn)菌株的分離培養(yǎng)鑒定操作方法步驟遵照《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。痰液標(biāo)本經(jīng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.0%Na OH處理20min后接種至酸性羅氏培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)5-8周。分離培養(yǎng)的結(jié)核分枝桿菌菌株轉(zhuǎn)接至改良羅氏培養(yǎng)基37℃?zhèn)鞔囵B(yǎng)4-5周,待其生長良好后采用PNB生長試驗(yàn)對(duì)其菌群進(jìn)行初步鑒定。PNB培養(yǎng)基上無菌落生長即為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群菌株,以結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株H37Rv進(jìn)行對(duì)照。

    采用WHO推薦的比例法進(jìn)行INH、RFP、SM、EMB、KM和LVX藥物敏感性試驗(yàn)。操作步驟遵照《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。耐藥判定標(biāo)準(zhǔn):耐藥百分比=含藥培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)/對(duì)照培養(yǎng)基上菌落數(shù)×100%。若耐藥百分比大于1%,則認(rèn)為受試菌對(duì)該抗結(jié)核藥物耐藥。

    若稀釋菌液(10-4mg/ml)在對(duì)照培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)少于20個(gè)菌落,則應(yīng)從對(duì)照管傳代培養(yǎng),重復(fù)試驗(yàn)。每批試驗(yàn)用結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株H37Rv評(píng)價(jià)含藥培養(yǎng)基的質(zhì)量。

    單耐藥:結(jié)核分枝桿菌對(duì)任一抗結(jié)核藥物耐藥;多耐藥:結(jié)核分枝桿菌對(duì) 2 種及以上抗結(jié)核藥物耐藥,不包括同時(shí)對(duì)INH和RFP耐藥;耐多藥(MDR):至少同時(shí)對(duì)INH和RFP具有耐藥性。

    3 藥敏結(jié)果

    所研究的 135株結(jié)核分枝桿菌臨床分離菌株中,對(duì)所試6種抗結(jié)核藥物的藥敏結(jié)果如下:全敏感49株,占35.7%,86株對(duì)一種或一種以上藥物耐藥,總耐藥率為64.3%,耐多藥28株,耐多藥率為20.7%。對(duì)6種所試藥物耐藥率由高到低依次為:鏈霉素44.9%(61/135)、異煙肼39.3%(5/135)、利福平36.9%(50/135)、乙胺丁醇19.3%、左氧氟沙星8.0%(11/135)、阿米卡星5.9%(8/135)。

    4 討論

    流動(dòng)人口結(jié)核病人、耐藥結(jié)核病人、HIV/TB雙重感染是當(dāng)今結(jié)核病控制工作中的三大重點(diǎn)難點(diǎn)[3]。耐藥結(jié)核病,尤其是耐多藥結(jié)核病產(chǎn)生,給結(jié)核病的預(yù)防、治療帶來了新問題,使結(jié)核病發(fā)病率“卷土從來”。

    對(duì)初治病人采用正規(guī)的個(gè)性化療方案和 DOTS管理也是今后結(jié)核病控制策略中的重點(diǎn)。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到,耐藥結(jié)核病是結(jié)核病疫情回升的主要原因,也是治療一大難點(diǎn)[4]。一旦發(fā)生耐藥結(jié)核病人,不但影響治療效果,而且通過調(diào)整治療方案,使用二線抗結(jié)核藥物,將使結(jié)核病患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)大大增加。故采取切實(shí)有效措施,減少耐藥結(jié)核病的發(fā)生,仍是控制結(jié)核病疫情之上策[5]。

    [1] 肖東樓.全國結(jié)核病耐藥性基線調(diào)查報(bào)告(2007 - 2008年)/中華人民共和國衛(wèi)生部編[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:4.

    [2] 莊玉輝,王國志,翟秉祥.結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程[J].中國防癆雜志,1996(18):30.

    [3] 趙東陽,要玉霞,謝春雨.成人結(jié)核病耐藥原因分析[J].醫(yī)藥論壇雜志,2005,26(20):1.

    [4] 馮俊華.四聯(lián)聯(lián)合治療耐多藥結(jié)核病[J].中國防癆雜志,2004(26):46.

    [5] 謝榮華.120例耐藥肺結(jié)核治療效果分析[J].中國防癆雜志,2004(26):46-47.

    李論宇(1988-),男,碩士研究生西藏大學(xué),研究方向:結(jié)核分枝桿菌耐藥性。

    杜寶中,男,漢族,河南鄭州人,西藏大學(xué)副教授,研究方向:病原微生物致病性及耐藥機(jī)制。

    R378

    A

    1671-1602(2016)24-0036-01

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