文│由佳 孔凡虎 許海軍(山東省煙臺市畜牧獸醫(yī)工作站)
劉文東(山東省煙臺民生家禽養(yǎng)殖專業(yè)合作社)
中草藥制劑對肉仔雞免疫效果的影響
文│由佳 孔凡虎 許海軍(山東省煙臺市畜牧獸醫(yī)工作站)
劉文東(山東省煙臺民生家禽養(yǎng)殖專業(yè)合作社)
隨著肉雞業(yè)迅猛發(fā)展,養(yǎng)殖規(guī)模和數(shù)量不斷增加,養(yǎng)殖場在傳統(tǒng)飼養(yǎng)模式下,如大劑量使用或濫用抗生素等化學(xué)藥品,會造成病原菌耐藥性增加、飼養(yǎng)環(huán)境惡化、雞病增多、雞產(chǎn)品藥殘超標(biāo)等問題日益突出,給肉雞業(yè)帶來很大隱患,也嚴(yán)重影響食品質(zhì)量安全和人類身體健康。
中草藥資豐價廉,耐藥性低,殘留少,毒副作用小,而且中草藥源于天然,飽含多種有效成分,將其作用于機(jī)體可產(chǎn)生多元組合效應(yīng),在動物疾病防治中的地位逐漸升高,成為一種綠色環(huán)保的免疫增強(qiáng)劑。由黃芪、丹參、虎杖組成的中草藥復(fù)方制劑,可提升機(jī)體非特異性免疫力,提高肉仔雞免疫抗體保護(hù)水平,促進(jìn)免疫器官發(fā)育及功能的協(xié)調(diào)和穩(wěn)定,增強(qiáng)雞群抗病能力。
本試驗主要是將中草藥復(fù)方制劑以不同劑量添加入飼料中,通過對不同日齡雞新城疫抗體效價、法氏囊和脾臟指數(shù)的測定,研究中草藥復(fù)方制劑對肉仔雞免疫抗體水平及免疫器官的影響,掌握該中草藥復(fù)方制劑最佳添加量,為中草藥在肉雞養(yǎng)殖和疫病防控應(yīng)用方面提供一定的理論依據(jù)。
1.材料。
(1)試驗場地及動物。選擇山東煙臺萊陽市商品肉雞規(guī)模養(yǎng)殖場作為試驗場地;健康A(chǔ)A肉仔雞(公母混合飼養(yǎng))2000只,由民生合作社肉種雞場提供。
(2)中草藥復(fù)方制劑。中草藥復(fù)方制劑組方成分為黃芪400克、丹參300克、虎杖300克,草藥均選購于煙臺市中藥材公司經(jīng)銷部。將以上三種草藥,置65℃烘箱中烘干,粉碎為細(xì)末,過200目篩,按配方混合均勻,分裝后存放于通風(fēng)干燥處備用。
(3)供試材料。新城疫(ND)血凝抗原:購自哈爾濱獸醫(yī)研究所(批號為:20150420)。0.5%雞紅細(xì)胞:自配,采集3只無禽流感和新城疫抗體健康非免疫公雞血液,針管吸取3.8%的檸檬酸鈉溶液少許。以pH7.2~7.4、濃度0.01摩爾/升的PBS液混勻,1800轉(zhuǎn)/分鐘離心5~10分鐘,去掉血漿和白細(xì)胞層,重復(fù)以上過程,反復(fù)洗滌離心3次,配成0.5%的紅細(xì)胞懸液,于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
2.方法。
(1)試驗設(shè)計。本試驗采用單因子隨機(jī)分組設(shè)計,選取健康A(chǔ)A肉仔雞2000只,公母混合飼養(yǎng),隨機(jī)分為4組,每組500只,1組為對照組,2、3、4組為試驗組,各組中草藥復(fù)方制劑添加量分別為0、0.05%、0.1%、0.15%。重復(fù)試驗在另外一規(guī)模場選取2000只肉仔雞,采取以上相同方法進(jìn)行研究。
表1 疫苗免疫程序
(2)飼養(yǎng)管理和中草藥復(fù)方制劑使用方法。各組均飼喂相同的優(yōu)質(zhì)全價飼料(不添加任何藥物),采取嚴(yán)格的環(huán)境控制、消毒防疫、飼養(yǎng)管理等標(biāo)準(zhǔn)化管理模式進(jìn)行飼養(yǎng)。中草藥復(fù)方制劑為1~42日齡全程添加于飼料中。使用的疫苗均為哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司的合格疫苗,免疫程序見表1。
(3)檢測項目及方法。新城疫(ND)抗體效價測定:采用血凝——血凝抑制試驗(HA-HI test)檢測,分別在1、14、28、42日齡隨機(jī)抽取血清樣品4次(1日齡雛雞為出殼時心臟采血,其他日齡均采用翅靜脈采血),樣品份數(shù)為每次每組抽取飼養(yǎng)組數(shù)量的5%,即取25份血樣。檢測依據(jù)ND抗體檢測操作和判定法按照國家標(biāo)準(zhǔn)《新城疫診斷技術(shù)》(GB/ T16550-2008),試驗數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)分析軟件進(jìn)行分析處理。
法氏囊和脾臟指數(shù)測定:分別在試驗雞28、42日齡,每次每組隨機(jī)抽取20只雞頸靜脈放血致死,摘取脾臟、法氏囊,剔除脂肪后稱重,利用免疫器官指數(shù)計算公式計算每組不同日齡的法氏囊和脾臟指數(shù)。免疫器官指數(shù)=免疫器官重(毫克)/體重(克)。
表2 不同日齡雞ND抗體效價
表3 不同日齡雞法氏囊和脾臟指數(shù)
對各組雞不同日齡新城疫抗體效價、法氏囊和脾臟指數(shù)進(jìn)行測定,測定結(jié)果見表2、表3。
從表2得出,雞群1日齡各組母源抗體水平較高,滴度在6.33~7.30范圍內(nèi);14日齡,試驗2、3、4組抗體水平分別比對照組高1.07、1.2、 1.06個滴度,差異顯著(P<0.05),試驗組間差異不顯著(P>0.05),以試驗3組保護(hù)效果最好;在28日齡各組抗體水平都達(dá)到峰值,試驗2、3、4組平均抗體水平分別達(dá)到6.1、6.15和6.35個滴度,比對照組分別高出1.1、1.5、1.35個滴度,差異顯著(P<0.05),試驗組間差異不顯著(P>0.05),以試驗3組保護(hù)效果最好。28日齡開始各組抗體水平逐漸下降,但到42日齡抗體水平均在4以上的有效保護(hù)范圍內(nèi),其中試驗2、3、4組在28日齡后分別下降了0.57、0.39、0.43個滴度,比對照組下降幅度分別減少0.41、0.59、0.43個滴度,以試驗3組保護(hù)效果最好。重復(fù)試驗結(jié)果基本相似。
由表3得出,肉仔雞在28日齡,試驗3、4組的法氏囊指數(shù)分別為2.1、2.16,比對照組分別高0.66、0.72,差異顯著(P<0.05);脾臟指數(shù)分別為1.55、1.54,比對照組分別高0.85、0.84,差異顯著(P<0.05),以試驗3組最高。42日齡試驗2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。重復(fù)試驗結(jié)果基本相似。
1.中草藥復(fù)方制劑對肉仔雞抗體水平的影響。目前已發(fā)現(xiàn)許多中草藥的藥效成分如黃芪、黨參、板藍(lán)根、甘草等具有誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞分化、促進(jìn)抗體產(chǎn)生、預(yù)防某些病毒感染及抵抗免疫抑制因子等免疫學(xué)活性。劉明生等研制的復(fù)方黃芪中藥,能夠明顯提高雛雞的新城疫HI抗體水平,改善雛雞的免疫機(jī)能。楊斌等研究的兩種復(fù)方中藥制劑,能夠有效延長新城疫免疫抗體消長水平。于金玲等研究的中草藥復(fù)方制劑——熱毒效,對新城疫抗體水平影響顯著,可明顯提高抗體滴度,提高機(jī)體的特異性免疫能力。從表2中可以看出,肉仔雞在28日齡抗體水平達(dá)到峰值,試驗2、3、4組抗體水平比對照組分別高1.1、1.5、1.35個滴度;14、42日齡,試驗2、3、4組抗體水平也均比對照組高,存在顯著差異(P<0.05),試驗組間差異不顯著(P>0.05)。這與以上多項研究結(jié)果基本一致。
2.中草藥復(fù)方制劑對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響。免疫器官的臟體系數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。法氏囊是禽類特有的體液免疫中樞器官,它能將淋巴干細(xì)胞誘導(dǎo)成為具有免疫活性的細(xì)胞,是B細(xì)胞分化發(fā)育后到達(dá)外周免疫器官的輸送場所。脾臟作為體內(nèi)最大的外周免疫器官,是產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞和抗體的場所之一,對于機(jī)體防御和清除功能起著重要作用。有研究表明中草藥飼料添加劑均可顯著提高脾臟和法氏囊指數(shù)。從表3中可以看出,肉仔雞在28日齡,試驗2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對照組,存在顯著差異(P<0.05),各試驗組間差異不顯著(P>0.05);42日齡,試驗2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對照組,但各組間差異不顯著(P>0.05)。這與相關(guān)文獻(xiàn)報道基本一致。
試驗表明,在飼料中以0.1%的量長期添加黃芪400克、丹參300克、虎杖300克制成的中草藥復(fù)方制劑,可明顯提高抗體滴度,提升新城疫抗體水平,還能夠促進(jìn)免疫器官良好生長發(fā)育及功能協(xié)調(diào)和穩(wěn)定,延緩免疫器官萎縮,增強(qiáng)雞群抗病能力,降低死淘率,從而提高經(jīng)濟(jì)收益。