柴雞馬立克病的病理學(xué)觀察與血清學(xué)診斷

李衛(wèi)東（德州學(xué)院農(nóng)學(xué)系德州市禽業(yè)工程技術(shù)研究中心，山東德州253023）

?

柴雞馬立克病的病理學(xué)觀察與血清學(xué)診斷

李衛(wèi)東
（德州學(xué)院農(nóng)學(xué)系德州市禽業(yè)工程技術(shù)研究中心，山東德州253023）

馬立克?。∕D）是雞的一種以淋巴組織增生的病毒性腫瘤病，主要侵害外周神經(jīng)系統(tǒng)，以周圍神經(jīng)、性腺、虹膜、內(nèi)臟器官、肌肉和皮膚的單獨(dú)或多發(fā)的單核細(xì)胞浸潤(rùn)為特征，具有高度傳染性，也是一種免疫抑制性疾病。雞馬立克病1907年首先由匈牙利獸醫(yī)病理學(xué)家馬立克（Dr.Joseph Marek）報(bào)道，英國(guó)的Biggs于1961年建議使用“馬立克病”的名字命名，為各國(guó)的禽病學(xué)家所接受。到目前為止本病呈世界性分布，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。

1　發(fā)病情況與臨床癥狀

山東省德州市某柴雞養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的2 800只本地柴雞，于1日齡時(shí)接種了MD疫苗，95日齡時(shí)出現(xiàn)采食下降、消瘦、萎頓等癥狀，并出現(xiàn)零星死亡，每天死亡1～10只，一直持續(xù)到130日齡，之后逐漸減少，共計(jì)死亡221只，死亡率高達(dá)7.89%。臨床癥狀可見病雞精神沉郁，羽毛松亂、走路遲緩，食欲減退、貧血、拉綠色或淡黃色稀糞，病雞極度消瘦，最后高度衰竭而死亡。應(yīng)用了抗生素以及喹諾酮類藥物，治療無效。

2　病理剖檢學(xué)觀察

將送檢的22只病雞進(jìn)行外部檢查和剖檢?？梢姴‰u精神委頓，雞冠蒼白，羽毛部分脫落，腹瀉、消瘦，肢體麻痹和皮膚結(jié)節(jié)腫瘤。剖開腹腔后，肝、脾腫大，達(dá)正常的2～3倍左右，表面及切面都有大小不等、粟粒至葡萄大的灰白色腫瘤結(jié)節(jié)、質(zhì)地脆，部分雞的肝臟、脾臟只見到彌漫性腫大而表面沒見白色腫瘤；腺胃腫大，腺胃壁增厚、變硬，黏膜脫落，乳突模糊，有的病例見有黏膜出血、糜爛和潰瘍；腎臟腫大，散在腫瘤結(jié)節(jié)；心包膜增厚，有的病死雞心臟冠狀脂肪出血；病雞卵巢、輸卵管發(fā)育不良，卵巢有腫瘤結(jié)節(jié)。部分雞喉頭、氣管有少量黏液，肺臟大多有水腫實(shí)變；肌肉蒼白，部分雞見有肌肉腫瘤結(jié)節(jié)；腔上囊萎縮。采集肝臟腫瘤結(jié)節(jié)切片，H.E.染色，鏡下觀察發(fā)現(xiàn)腫瘤病灶由多形態(tài)淋巴細(xì)胞組成。

3　血清學(xué)檢驗(yàn)

3.1抗原檢測(cè)分別采集22只雞的新生羽毛囊浸泡于5倍量的生理鹽水中，用玻棒將羽髓壓擠，反復(fù)凍融3次，6 000 r/min離心10 min，取上清液作為待檢羽髓抗原，用含8%NaCl、pH值7.2 的PBS和1%瓊脂糖制備凝膠板，然后按常規(guī)法打孔，加樣后與馬立克病標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清（標(biāo)準(zhǔn)抗原和陽(yáng)性血清由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所制備）進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)，濕盒中37℃孵育48 h觀察結(jié)果。待檢的22份羽髓抗原中有16份與馬立克病標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清孔之間出現(xiàn)清晰致密的沉淀線，陽(yáng)性率為72.73%；

3.2抗體檢測(cè)分別采集8只病雞的血清作為待檢抗體樣本，與馬立克病標(biāo)準(zhǔn)抗原進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)，濕盒中37℃孵育48 h觀察結(jié)果。8份血清樣本與馬立克病標(biāo)準(zhǔn)抗原孔間均出現(xiàn)清晰致密的沉淀線。

4　細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)

22只病雞，每只雞以無菌操作取雞肝、脾、血液等病料接種于鮮血瓊脂斜面，經(jīng)37℃48 h培養(yǎng)，均無細(xì)菌生長(zhǎng)。

據(jù)流行特點(diǎn)、發(fā)病年齡、零星死亡、癥狀、剖檢變化以及血清學(xué)試驗(yàn)，診斷為雞馬立克病。

5　討論

5.1雞馬立克病根據(jù)臨床癥狀和病變部位可分為即神經(jīng)型、皮膚型、內(nèi)臟型和眼型四種類型。此次發(fā)病的柴雞群，確診為內(nèi)臟型馬立克病。

5.2本次發(fā)病柴雞的血清學(xué)檢驗(yàn)馬立克病抗原抗體均為陽(yáng)性，病理剖檢學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)肌肉中存在腫瘤，腔上囊萎縮，這些變化與淋巴白血病相鑒別。

5.3發(fā)病柴雞群1日齡接種了馬立克病疫苗，但仍在3月齡后發(fā)病，證明發(fā)生了免疫失敗。凍干疫苗產(chǎn)生免疫力的時(shí)間較晚，雛雞感染馬立克病毒后，幾個(gè)月后才表現(xiàn)出癥狀，并引起死亡，馬立克病疫苗對(duì)雞的保護(hù)只是一種干擾作用，只能干擾MDV對(duì)機(jī)體的作用，而不能防止周圍環(huán)境的病毒進(jìn)入體內(nèi)，也不能阻止體內(nèi)病毒排出體外向周圍擴(kuò)散，此時(shí)，當(dāng)雞群受到馬立克病病毒入侵時(shí)，就很容易造成免疫失敗，引發(fā)雞群感染發(fā)病。MDV能引起免疫抑制作用，導(dǎo)致雞群更高的腫瘤發(fā)生率和較差的生產(chǎn)性能。

參考文獻(xiàn)：

［1］陳華美，徐長(zhǎng)根.馬立克病的研究進(jìn)展［J］.家禽科學(xué)，2008，（8）：43-45.

［2］王春生.雞馬立克病的診斷與防控［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2009，（11）：17-19.

［3］郭俊清，姚大偉，李臻興，等.一例雞馬立克病的臨床、病理及分子診斷［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，（1）：218-219.

［4］徐正軍，陳昌海，程雷等.雞馬立克病的診斷與病因分析［J］.中國(guó)家禽，2008（7）：47.

［5］銀梅，寧紅梅，陳桂香，等.一起馬立克病的診斷［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2010，37（10）：211-213.

［6］孟慶華，劉金彪，高清清.一例雞馬立克病的病理組織學(xué)診斷［J］.中國(guó)家禽，2010（5）：52-53.

［7］張明烽，賈德清，劉有昌.關(guān)于雞馬立克病及免疫的技術(shù)觀點(diǎn)［J］.中國(guó)家禽，2010（1）：52-53.

［8］馮云霞.雞馬立克病的診斷與防治［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2011（3）：161.

中圖分類號(hào)：S858.31

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號(hào)：0529- 6005（2016）03- 0058- 01

收稿日期：2014-08-22

作者簡(jiǎn)介：李衛(wèi)東（1964-），男，副教授，本科，從事動(dòng)物醫(yī)學(xué)教學(xué)，E-mail：dwwswx@163.com