薄荷地上部分的非揮發(fā)性化學(xué)成分研究

陳智坤， 梁呈元， 任冰如， 陳　劍， 于　盱， 呂　寒， 劉　艷， 李維林,①

〔1. 陜西省西安植物園 陜西省植物研究所, 陜西 西安 710061; 2. 江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所(南京中山植物園), 江蘇 南京 210014〕

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薄荷地上部分的非揮發(fā)性化學(xué)成分研究

陳智坤1,2， 梁呈元2， 任冰如2， 陳劍2， 于盱2， 呂寒2， 劉艷2， 李維林2,①

〔1. 陜西省西安植物園 陜西省植物研究所, 陜西 西安 710061; 2. 江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所(南京中山植物園), 江蘇 南京 210014〕

薄荷屬(MenthaLinn.)植物薄荷(MenthahaplocalyxBriq.)的干燥地上部分為常用中藥材[1]，其主要藥用成分為揮發(fā)油[2-3]，其非揮發(fā)性成分也具有重要的藥理作用。為詳細(xì)了解薄荷的非揮發(fā)性成分，作者對(duì)薄荷地上部分乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取物的組成成分進(jìn)行了分析。

1　材料和方法

1.1材料

供試薄荷的干燥地上部分于2011年9月購(gòu)自安徽亳州藥材市場(chǎng)，產(chǎn)地為安徽太和縣肖口鎮(zhèn)，由梁呈元副研究員鑒定。

1.2方法

稱(chēng)取干燥地上部分25 kg，按料液比(m/V)1∶6加入體積分?jǐn)?shù)70%乙醇，常溫浸提15 d，提取2次，合并提取液并濃縮得浸膏，用蒸餾水配成混懸液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，獲得乙酸乙酯萃取物610 g和正丁醇萃取物500 g。

取乙酸乙酯萃取物200 g，經(jīng)硅膠柱層析(石油醚-乙酸乙酯)得到4個(gè)組分，經(jīng)重結(jié)晶、硅膠柱層析(石油醚-乙酸乙酯)和Sephadex LH-20柱層析(甲醇-水)得到化合物M1至M5。取正丁醇萃取物200 g，用D101大孔樹(shù)脂柱層析(體積分?jǐn)?shù)50%、 70%、 90%和100%乙醇)得到4個(gè)組分， 經(jīng)Sephadex LH-20柱層析(三氯甲烷-甲醇)和制備液相(三氯甲烷-甲醇)分離得到化合物M6至M16。 采用理化分析及MS、1H-NMR和13C-NMR分析，并與文獻(xiàn)比對(duì)，確定各化合物結(jié)構(gòu)。

2　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

M1： 白色針狀結(jié)晶； mp： 139 ℃～140 ℃； Liebermann- Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。與β-谷甾醇對(duì)照品共同薄層層析，Rf值和顯色一致，混合熔點(diǎn)不下降，鑒定為β-谷甾醇(β-sitosterol)。

M2：白色粉末；mp：287 ℃～288 ℃；Liebermann-Burchard和Molish反應(yīng)陽(yáng)性。與胡蘿卜苷對(duì)照品共同薄層層析，Rf值和顯色一致，混合熔點(diǎn)不下降，鑒定為胡蘿卜苷(daucosterol)。

M3：黃色粉末；ESI-MSm/z：307.01[M+Na]+，C16H12O5。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：12.91(1H，s，5-OH)，10.82(1H，s，H-7)，8.03(2H，dd，J=7.0，2.0 Hz，H-2′，6′)，7.11(2H，dd，J=7.0，2.0 Hz，H-3′，5′)，6.84(1H，s，H-3)，6.51(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.21(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，3.86(3H，s，4′-OCH3)。13C-NMR(DMSO，125 MHz)δ：181.70(C-4)，164.15(C-7)，163.24(C-2)，162.25(C-9)，161.39(C-4′)，157.28(C-5)，128.24(C-2′，6′)，122.79(C-1′)，114.52(C-3′，5′)， 103.71(C-10)， 103.49(C-3)， 98.83(C-6)， 93.96(C-8)，55.49(4′-OCH3)。參照文獻(xiàn)[4]鑒定為刺槐素 (acacetin)。

M4：白色粉末；ESI-MSm/z：457.28[M+H]+， C30H48O3。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：5.17(1H，t，J=3.5 Hz，H-12)，3.46(1H，dd，J=7.0，14.0 Hz，H-3)，2.76(1H，dd，J=3.5，8.5 Hz， H-5)。13C-NMR(DMSO， 125 MHz)δ： 179.06(C-28)，144.15(C-13)， 121.89(C-12)， 77.37(C-3)， 55.17(C-5)， 48.88(C-9)，47.45(C-17，19)，41.63(C-14)，41.18(C-18)，39.00(C-8)，38.67(C-4)，38.41(C-1)，36.90(C-10)，33.63(C-21)， 33.05(C-22)， 32.74(C-7)， 32.44(C-29)， 30.63(C-20)， 28.43(C-23)， 27.51(C-15)， 27.15(C-2)，25.80(C-27)，23.55(C-11)，23.26(C-16)，23.91(C-30)，18.60(C-6)，17.35(C-26)，16.40(C-24)，15.30(C-25)。參照文獻(xiàn)[5]鑒定為齊墩果酸(oleanolic acid)。

M5：黃色粉末；ESI-MSm/z：302.04[M+H]+， C15H10O7。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：12.47(1H，s，5-OH)，10.76(1H，s，H-7)，9.39(1H，s，H-3)，8.52(2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，4′)，7.64(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，7.52(1H，d，J=2.0 Hz，H-6′)，6.78(1H，s，H)，6.42(1H，s，H)， 6.21(1H，s，H)；13C-NMR(DMSO，125 MHz)δ： 174.81(C-4)， 162.53(C-7)， 160.04(C-5)，156.31(C-9)，147.52(C-4′)，146.82(C-2)，144.83(C-3′)，135.48(C-3)，121.91(C-1′)，119.83(C-6′)，115.54(C-5′)，115.24(C-2′)，104.39(C-10)，98.31(C-6)，92.9(C-8)。參照文獻(xiàn)[6]鑒定為槲皮素(quercetin)。

M6： 白色針狀結(jié)晶， ESI-MSm/z： 155.12 [M+H]+， C7H6O4。1H-NMR(D2O， 500 MHz)δ：7.42(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，7.39(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，7.37(1H，d，J=8.0 Hz， H-5)。13C-NMR(D2O， 125 MHz)δ： 177.03(C-7)， 150.03(C-3)， 146.03(C-4)，131.30(C-1)，124.24(C-6)，119.63(C-5)，118.11(C-2)。參照文獻(xiàn)[7]鑒定為原兒茶酸(protocatechuic acid)。

M7：白色粉末；mp：272 ℃～273 ℃；ESI-MSm/z：457.37[M+H]+，C30H48O3。13C-NMR(PYR，125 MHz)δ：179.88(C-28)，139.28(C-13)，125.66(C-12)，78.14(C-3)， 55.84(C-5)，53.57(C-18)，48.06(C-9，17)，42.52(C-14)，39.99(C-8)，39.51(C-19)，39.42(C-4)，39.39(C-1)，39.10(C-20)，37.46(C-10)， 37.30(C-22)， 33.60(C-7)， 31.09(C-21)， 28.83(C-23)， 28.71(C-15)， 28.15(C-2)， 24.93(C-16)， 23.93(C-27)， 23.65(C-11)， 21.43(C-30)， 18.80(C-6)，17.54(C-29)，17.47(C-26)，16.59(C-25)，15.70(C-24)。參照文獻(xiàn)[8]鑒定為熊果酸(ursolic acid)。

M8：白色粉末；ESI-MSm/z：495.34[M+Na]+，C30H48O4。13C-NMR(PYR，125 MHz)δ：180.77(C-28)，139.66(C-13)，127.83(C-12)， 78.09(C-3)， 72.51(C-19)， 55.65(C-5)，54.37(C-18)， 48.11(C-17)， 47.53(C-9)， 42.14(C-20)， 41.83(C-14)，40.09(C-8)，39.11(C-4)，38.80(C-1)，38.27(C-22)， 37.08(C-10)， 33.33(C-7)， 29.06(C-15)， 28.56(C-23)， 27.67(C-2)， 26.90(C-21)， 26.68(C-29)， 26.13(C-16)， 24.48(C-27)， 23.78(C-11)， 18.69(C-6)， 16.99(C-26)，16.57(C-24)，16.30(C-30)，15.33(C-25)。參照文獻(xiàn)[9]鑒定為坡模酸(pomolic acid)。

M9：黃色粉末；mp：328 ℃～330 ℃；ESI-MSm/z：323.05[M+Na]+，C16H12O6。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：12.92(1H，s，5-OH)， 7.49(1H，d，J=7.0 Hz，H-6′)， 7.41(1H，s， H-2′)， 7.04(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.69(1H，s，H-3)，6.44(1H，s，H-8)，6.19(1H，s，H-6)，3.84(3H，s，4′-OCH3)，其中7位和3′位上的羥基H不出峰。13C-NMR(DMSO，150 MHz)δ：181.64(C-4)，164.29(C-7)，163.47(C-2)，161.48(C-9)，157.32(C-5)，151.09(C-4′)，146.80(C-3′)，123.05(C-6′)，118.62(C-1′)，112.95(C-2′)，112.06(C-5′)，103.75(C-3)，103.49(C-10)，98.90(C-6)，93.91(C-8)，55.70(4′-OCH3)。參照文獻(xiàn)[10]鑒定為香葉木素(diosmetin)。

M10：白色粉末；ESI-MSm/z：473.17[M+H]+，C30H48O4。13C-NMR(PYR，125 MHz)δ：179.87(C-28)，139.25(C-13)，125.56(C-12)， 79.31(C-3)， 66.06(C-2)， 53.52(C-18)， 48.68(C-5)，48.03(C-9)，47.89(C-17)，42.96(C-1)，42.54(C-14)， 40.16(C-19)， 39.40(C-20)， 38.79(C-8)， 38.59(C-4)，37.44(C-10)，33.47(C-22)，33.19(C-7)，31.06(C-21)，29.46(C-23)，28.61(C-15)，24.88(C-11)，23.82(C-24)，23.66(C-16)，22.28(C-27)，21.36(C-30)，18.42(C-6)，17.48(C-26，29)，16.72(C-25)。參照文獻(xiàn)[11]鑒定為2α，3α-二羥基-12-烯-28-烏羧酸(2α，3α-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid)。

M11：白色粉末；ESI-MSm/z：473.48[M+H]+，C30H48O4。13C-NMR(PYR，125 MHz)δ：144.9(C-13)，122.31(C-12)，83.80(C-3)， 68.57(C-2)， 55.90(C-5)， 48.18(C-8，9)，47.74(C-1)，46.54(C-17，19)，42.23(C-18)，42.05(C-14)，39.84(C-4)，38.56(C-10)，34.29(C-21)，33.21(C-7，22，29)，30.91(C-20)，29.32(C-23)，28.30(C-15)，26.13(C-27)，23.93(C-16)，23.80(C-11，30)，18.86(C-6)，17.68(C-25，26)，16.86(C-24)，C-28(羧基碳)未出峰。參照文獻(xiàn)[12]鑒定為2α-羥基齊墩果酸(2α-hydroxydeanolic acid)。

M12：淡黃色粉末；ESI-MSm/z：181.16[M+H]+，C9H8O4。1H-NMR(CH3OH-d4，500 MHz)δ：6.68(1H，s，H-7)， 6.67(1H， s， H-2)，6.66(1H，s，H-6)，6.48(1H，s，H-5)，6.47(1H，s，H-8)；13C-NMR(CH3OH-d4，125 MHz)δ：176.20(C-9)，145.87(C-4)，144.28(C-3)，132.94(C-7)，119.87(C-1，8)，116.03(C-5，6)，115.98(C-2)。參照文獻(xiàn)[13]鑒定為咖啡酸(caffeic acid)。

M13：白色粉末；ESI-MSm/z：361.37[M+H]+，C18H16O8。1H-NMR(D2O，400 MHz)δ： 7.55(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)， 7.05(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)， 6.95(1H， dd，J=2.0， 8.4 Hz， H-6)，6.78(1H，dd，J=8.0 Hz，H-5)，6.75(1H，dd，J=2.0 Hz，H-2′)，6.70(1H，dd，J=8.4 Hz，H-5′)，6.61(1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6′)，6.27(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，5.19(1H，dd，J=4.4，8.4 Hz，H-8′)，3.10(1H，dd，J=4.4，14.0 Hz，H-7a′)， 3.01(1H，dd，J=8.4， 14.4 Hz，H-7b′)。13C-NMR(D2O，100 MHz)δ：173.62(C-9′)，168.59(C-9)， 149.86(C-4)，147.88(C-3)，146.99(C-7)，146.28(C-3′)，145.40(C-4′)，129.37(C-1′)，127.77(C-1)，123.31(C-6)，121.94(C-6′)，117.70(C-2′)，116.62(C-5)，116.42(C-5′)，115.33(C-2)，114.51(C-8)，74.72(C-8′)， 38.03(C-7′)。參照文獻(xiàn)[14]鑒定為迷迭香酸(rosmarinic acid)。

M14：黃色粉末；ESI-MSm/z：447.21[M+H]+，C22H22O10。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：13.48(1H，s，5-OH)，7.83(2H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-2′，6′)，7.28(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.88(2H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-3′，5′)， 6.65(1H，s，H-3)， 6.28(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-1″)，4.64(1H，d，J=8.0 Hz，H-2″)，4.35-4.26(4H，m，H-3″，4″，5″，6″)，4.19(1H，m，H-6″)，3.83(3H，s， 4′-OCH3)。13C-NMR(DMSO，125 MHz)δ：182.85(C-4)，164.44(C-2)，164.21(C-7)，163.12(C-5)， 162.64(C-4′)，157.88(C-9)，128.53(C-2′，6′)，123.13(C-1′)，114.89(C-3′，5′)，106.63(C-10)，104.82(C-3)，101.89(C-1″)，100.89(C-6)，95.43(C-8)，79.27(C-5″)， 78.51(C-3″)， 74.84(C-2″)， 71.21(C-4″)， 63.51(C-6″)，55.66(4′-OCH3)。參照文獻(xiàn)[15]鑒定為刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖苷(acacetin-7-O-β-D-glucopyranoside)。

M15：黃色粉末；ESI-MSm/z：285.04[M+H]+，C15H10O6。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：7.41(2H，d，J=6.0 Hz，H-2′，6′)，6.90(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)， 6.66(1H，s，H-3)， 6.46(1H，s，H-8)，6.19(1H，s，H-6)。13C-NMR(DMSO，500 MHz)δ：181.61(C-4)，164.15(C-7)，163.87(C-2)，161.43(C-5)，157.24(C-9)，149.68(C-3′)，145.72(C-4′)，121.47(C-1′)，118.92(C-6′)，116.01(C-2′)，113.36(C-5′)，103.65(C-10)，102.82(C-3)，98.81(C-6)，93.82(C-8)。參照文獻(xiàn)[16]鑒定為木犀草素(luteolin)。

M16：黃色粉末；ESI-MSm/z：449.20[M+H]+，C21H20O11。1H-NMR(DMSO，500 MHz)δ：12.99(1H，s，5-OH)，7.45(2H，d，J=6.5 Hz，H-2′，6′)，6.92(1H，d，J=2.0 Hz， H-5′)，6.78(2H，dd，J=2.0 Hz，H-6，8)， 6.45(1H，s，H-3)， 5.36(1H，s，H-1″)，4.60(1H，d，J=7.0 Hz，H-2″)，3.49-3.29(4H，m，H-3″，4″，5″，6″)，3.17(1H，s，H-6″)。13C-NMR(DMSO，500 MHz)δ：181.77(C-4)，164.55(C-2)，163.01(C-7)，161.13(C-5)，156.88(C-9)，149.93(C-4′)，145.69(C-3′)，121.53(C-1′)，118.98(C-6′)，115.86(C-5′)，113.76(C-2′)，105.47(C-10)，103.27(C-3)，99.86(C-6)，99.46(C-8)，94.93(C-1″)，77.13(C-5″)， 76.48(C-3″)， 73.10(C-2″)， 69.69(C-4″)，60.70(C-6″)。參照文獻(xiàn)[17]鑒定為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物M1和M2為甾體類(lèi)；M3、M5、M9、M14、M15和M16為黃酮類(lèi)；M4、M7、M8、M10和M11為三萜酸類(lèi)；M6、M12和M13為酚酸類(lèi)。其中，M6、M15和M16首次從薄荷中獲得，而M8、M10、M11和M14首次從薄荷屬中獲得。

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(責(zé)任編輯: 郭嚴(yán)冬)

Research on involatile chemical constituents in above-ground part ofMenthahaplocalyx

CHEN Zhikun1,2, LIANG Chengyuan2, REN Bingru2, CHEN Jian2, YU Xu2, LYU Han2, LIU Yan2, LI Weilin2,①

(1.Xi’an Botanical Garden, Institute of Botany of Shaanxi Province, Xi’an 710061, China; 2. Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences, Nanjing 210014, China),J.PlantResour. &Environ., 2016, 25(3): 115-117

Sixteen compounds were isolated from extracts of ethyl acetate and butyl alcohol of ethanol extracts of above-ground part ofMenthahaplocalyxBriq. They areβ-sitosterol (M1), daucosterol (M2), acacetin (M3), oleanolic acid (M4), quercetin (M5), protocatechuic acid (M6), ursolic acid (M7), pomolic acid (M8), diosmetin (M9), 2α,3α-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid (M10), 2α-hydroxydeanolic acid (M11), caffeic acid (M12), rosmarinic acid (M13), acacetin-7-O-β-D-glucopyranoside (M14), luteolin (M15) and luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside (M16). In which, M6, M15 and M16 are isolated firstly fromM.haplocalyx, and M8, M10, M11 and M14 are isolated firstly fromMenthaLinn.

薄荷； 地上部分； 乙醇提取物； 非揮發(fā)性成分； 結(jié)構(gòu)鑒定

MenthahaplocalyxBriq.; above-ground part； ethanol extracts； involatile constituents； structure identification

2015-10-22

“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAI04B06)

陳智坤(1987—)，男，陜西洋縣人，碩士，研究實(shí)習(xí)員，主要從事植物資源研究與開(kāi)發(fā)方面的工作。

E-mail: lwlcnbg@mail.cnbg.net

Q946; R284.1

A

1674-7895(2016)03-0115-03

10.3969/j.issn.1674-7895.2016.03.15