microRNA在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展①

郭　瑩　瞿　文　王一浩　邵宗鴻

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院血液科，天津300052)

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microRNA在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展①

郭瑩瞿文王一浩邵宗鴻②

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院血液科，天津300052)

①本文為國家自然科學(xué)基金(81170472，81370607)、天津市自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(12JCZDJC21500)、天津市抗癌重大專項(xiàng)攻關(guān)計(jì)劃(12ZCDZSY17900，12ZCDZSY18000)、天津市衛(wèi)生行業(yè)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(11KG135)、衛(wèi)生行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目(201202017)、天津市衛(wèi)生局科技基金(2010KZ105)和天津醫(yī)科大學(xué)科學(xué)基金(2010ky20)。

microRNA(miRNA)是一類能夠調(diào)節(jié)基因表達(dá)的短單鏈內(nèi)源非編碼RNA，人體30%編碼蛋白的RNA受miRNA調(diào)節(jié)，這種帶有莖-環(huán)結(jié)構(gòu)的miRNA主要通過與互補(bǔ)的mRNA結(jié)合引起RNA降解或翻譯抑制，對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)控作用[1]，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞發(fā)育、增殖、分化、凋亡以及腫瘤的發(fā)生。近來研究發(fā)現(xiàn)miRNA在多種自身免疫性疾病中存在異常表達(dá)，提示miRNA與多種自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[2]。本文就miRNA在自身免疫性疾病中對(duì)免疫細(xì)胞的調(diào)控研究進(jìn)展作一綜述。

自身免疫性疾病(Autoimmune diseases,AID)是體液或細(xì)胞免疫功能異常亢進(jìn)攻擊傷害自身組織或器官，而引起機(jī)體異常免疫應(yīng)答的疾病。T、B淋巴細(xì)胞的異常激活是引發(fā)免疫系統(tǒng)自穩(wěn)功能紊亂的關(guān)鍵所在。研究發(fā)現(xiàn)在自身免疫性疾病的T、B淋巴細(xì)胞中均存在miRNA的異常分布，在疾病發(fā)展的不同階段miRNA的表達(dá)譜也存在差異，并且越來越多的研究表明T、B淋巴細(xì)胞中miRNA的異常表達(dá)對(duì)AID的體液和細(xì)胞免疫調(diào)控發(fā)揮重要作用，它通過與互補(bǔ)的mRNA選擇性地結(jié)合而抑制蛋白的產(chǎn)生，進(jìn)而對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)控作用，廣泛參與T、B淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育與功能發(fā)揮。

1　miRNA對(duì)AID中T細(xì)胞的調(diào)控作用

不同AID的T淋巴細(xì)胞中均存在miRNA的異常分布，它們通過不同的作用通路影響T細(xì)胞的分化與功能的發(fā)揮。Dai等[3]通過基因芯片技術(shù)篩選了系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus,SLE)、免疫性血小板減少癥 (Immune thrombocyto-penia,ITP)患者及正常人T細(xì)胞中miRNA的表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)16個(gè)SLE相關(guān)miRNA和19個(gè)ITP相關(guān)miRNA，13個(gè)在SLE和ITP中共同表達(dá)，部分miRNA與疾病活動(dòng)度相關(guān)。Jernas等[4]通過基因芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)ITP患者和正常對(duì)照組的T細(xì)胞中有22種miRNA的表達(dá)存在明顯差異，與疾病的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性。包括miR-21、miR-146a/b、miR-148、miR-150、miR-155、miR-181a、miR-17～92等，此類差異性表達(dá)的miRNA對(duì)不同亞群的T淋巴細(xì)胞的分化與發(fā)育均有顯著調(diào)節(jié)功能，并與疾病的嚴(yán)重程度呈相關(guān)性，因此，篩選出不同AID的特異性miRNA標(biāo)記分子，可以對(duì)疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后起指導(dǎo)作用。

1.1miRNA對(duì)輔助性T細(xì)胞(Helper T cells,Th)的免疫調(diào)控輔助性T細(xì)胞參與T細(xì)胞調(diào)控或“輔助”其他淋巴細(xì)胞發(fā)揮功能。部分miRNA在CD4+T細(xì)胞中表達(dá)異常增多，通過抑制其負(fù)性調(diào)控蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其異?；罨⑴c其分化過程與功能的發(fā)揮，最終引發(fā)機(jī)體自穩(wěn)系統(tǒng)發(fā)生免疫紊亂。Feng等[5]通過模擬急性哮喘的小鼠模型，檢測(cè)不同條件下小鼠脾臟中CD4+T細(xì)胞中miR-181a、miR-146a 和miR-146b的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在疾病的初始階段這3種miRNA與正常對(duì)照組相比均表達(dá)升高，治療后3種miRNA均表達(dá)減少，miR-146a降低尤為顯著，并且與氣道炎癥細(xì)胞肥大細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞的數(shù)量及炎癥因子IL-4的表達(dá)量呈正相關(guān)關(guān)系。由于在哮喘發(fā)病機(jī)制中Th2細(xì)胞占主導(dǎo)作用[6]，其分泌的IL-4、IL-5、IL-10等多種炎癥因子可以直接激活肥大細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞等多種炎癥細(xì)胞，因此這項(xiàng)研究提示miR-181a、miR-146a和miR-146b可能參與CD4+T細(xì)胞分化為Th2細(xì)胞的過程。Li等[7]也在免疫缺陷小鼠模型中miR-181a對(duì)CD4+的調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行了深入研究，推測(cè)miR-181a可能通過抑制TCR信號(hào)通路中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用的酪氨酸蛋白磷酸酶活性(如SHP2、PTPN22、DUSP5和DUSP6等)來增強(qiáng)的TCR的信號(hào)強(qiáng)度與敏感性，當(dāng)miR-181a異常高表達(dá)時(shí)利于成熟T細(xì)胞與體內(nèi)自身抗原的結(jié)合，促進(jìn)自身免疫性疾病的發(fā)生。而miR-146a與miR-181的作用機(jī)制不同，它是通過靶向抑制CD4+T中的Fas相關(guān)凋亡結(jié)構(gòu)域蛋白，使T細(xì)胞免于活化誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，由此調(diào)節(jié)CD4+T細(xì)胞的活化[8]，對(duì)適應(yīng)性免疫起調(diào)節(jié)作用。此外，某些miRNA還可以促進(jìn)CD4+T細(xì)胞的低甲基化，加速疾病的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)SLE患者和SLE小鼠模型CD4+T細(xì)胞中存在miR-21和miR-148a的異常高表達(dá)[9]，并且在SLE患者CD4+T細(xì)胞中這兩個(gè)miRNA的表達(dá)水平與疾病的活動(dòng)性以及免疫相關(guān)的甲基化敏感基因的表達(dá)呈正相關(guān)。其機(jī)制為高表達(dá)的miR-21通過直接抑制 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)上游信號(hào)分子RASGRP1而間接調(diào)控DNMT1的表達(dá)，miR-148a通過直接靶向DNMT1的編碼區(qū)來調(diào)控DNMT1的表達(dá)，加速細(xì)胞內(nèi)低甲基化狀態(tài)，誘導(dǎo)自身免疫相關(guān)的甲基化敏感基因啟動(dòng)子區(qū)域去甲基化，上調(diào)敏感基因的表達(dá)，介導(dǎo)疾病發(fā)生。通過使用這兩種miRNA特異性抑制劑對(duì)SLE病人T淋巴細(xì)胞進(jìn)行免疫干預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)能夠有效逆轉(zhuǎn)低甲基化狀態(tài)。提示miR-21和miR-148a有望成為調(diào)控SLE患者T淋巴細(xì)胞異常低甲基化的新靶點(diǎn)，改變SLE患者T淋巴細(xì)胞內(nèi)的miR-21和miR-148a表達(dá)水平可作為潛在的干預(yù)治療手段。miRNA不僅干預(yù)CD4+T細(xì)胞的活化與甲基化狀態(tài)，還與疾病的進(jìn)展過程密切相關(guān)，可以對(duì)疾病的發(fā)展階段和嚴(yán)重程度進(jìn)行預(yù)測(cè)。miR-223是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者(Rheumatoid arthritis,RA)外周血CD4+T淋巴細(xì)胞中唯一可顯著上升的miRNA，其濃度與RA患者關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)密切相關(guān)[10,11]。Du等[12]多位研究者發(fā)現(xiàn)，miR-326在多發(fā)性硬化癥(Multiple sclerosis,MS)患者的Th17細(xì)胞中表達(dá)顯著上調(diào)，并且與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，并在小鼠模型中得以證實(shí)。其機(jī)制可能為miR-236通過抑制Th17的負(fù)調(diào)控因子-E26轉(zhuǎn)錄因子-1(E26 transformation-specific-1,ETS-1)促進(jìn)CD4+T細(xì)胞向Th17細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，從而加速疾病的發(fā)生。miR-326通過調(diào)控Th17細(xì)胞的分化參與MS的發(fā)病，在藥物治療后其表達(dá)量也相應(yīng)改變，提示miR-326可能成為診斷MS、判斷分期及觀察藥物療效的獨(dú)特性標(biāo)志物。由此看來，miR-146、miR-181、miR-21、miR-148、miR-223對(duì)CD4+T細(xì)胞的分化及免疫調(diào)節(jié)功能起重要作用，但不同的miRNA對(duì)其調(diào)控的作用通路有所差異，并且不同的AID中有其獨(dú)特差異性表達(dá)的miRNA，并與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)，對(duì)疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后具有十分重要的提示作用，但參與調(diào)控的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)繁多而復(fù)雜，因此，miRNA對(duì)CD4+T的調(diào)節(jié)作用仍需我們繼續(xù)探索。

1.2miRNA對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg)的免疫調(diào)控許多AID中的Treg細(xì)胞中亦存在miRNA的異常表達(dá)，這些miRNA對(duì)Treg細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子Foxp3(Forkhead box protein3,Foxp3)和細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)的表達(dá)具有顯著抑制作用，這兩種蛋白是Treg細(xì)胞發(fā)揮抑制作用的關(guān)鍵分子，進(jìn)而在轉(zhuǎn)錄水平對(duì)Treg細(xì)胞進(jìn)行免疫調(diào)控。以往曾有研究證實(shí)將與miRNA成熟有關(guān)的Dicer酶敲除后， Treg細(xì)胞數(shù)量明顯減少，并且抑制功能下降，表明了miRNA對(duì)維持Treg細(xì)胞穩(wěn)態(tài)有重要作用[13]。但其作用通路尚未明確，為進(jìn)一步探討miRNA對(duì)Treg細(xì)胞的作用機(jī)制，F(xiàn)ayyad-Kazan通過分離健康受試者的CD4+CD25+CD127lowTreg細(xì)胞，應(yīng)用基因芯片技術(shù)研究其miRNA表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)miR-24、miR-210和miR-145表達(dá)相對(duì)較低，通過載體向Treg細(xì)胞中轉(zhuǎn)染這三種miRNA的前體來上調(diào)它們的表達(dá)并培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)上調(diào)miR-24和miR-210的Treg細(xì)胞中Foxp3的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平均降低2倍，而上調(diào)miR-145的Treg細(xì)胞中CTLA-4的mRNA水平降低2倍，蛋白水平降低1.9倍[14，15]。根據(jù)以上研究結(jié)果可以推測(cè)miR-24和miR-210的作用機(jī)制可能是通過直接與Foxp3的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，miR-145則是通過與CTLA-4的3′-UTR特異性結(jié)合，抑制了CTLA-4的表達(dá)。Foxp3和CTLA-4均為Treg細(xì)胞發(fā)育與功能發(fā)揮所必需的轉(zhuǎn)錄因子，因此，miR-21、miR-20、miR-145通過抑制它們的表達(dá)從而實(shí)現(xiàn)對(duì)Treg細(xì)胞的調(diào)控。此外，miR-10a是通過靶向不同細(xì)胞因子的mRNA來調(diào)節(jié)天然調(diào)節(jié)性T(nTreg)細(xì)胞和適應(yīng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(iTreg)在免疫系統(tǒng)中的循環(huán)，對(duì)Treg細(xì)胞的數(shù)量及免疫功能起重要調(diào)節(jié)作用。Takahashi[16]在免疫缺陷小鼠模型中發(fā)現(xiàn)miR-10a在nTreg中高表達(dá)，并靶向抑制 Bcl-6的表達(dá)，由于 Bcl-6是濾泡輔助T細(xì)胞分化過程中的關(guān)鍵分子，從而抑制Treg細(xì)胞向?yàn)V泡輔助T細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化，降低Treg細(xì)胞的多態(tài)分化性。而被維甲酸、TGF-β誘導(dǎo)產(chǎn)生的iTreg中miR-10a表達(dá)降低，通過上調(diào)Foxp3的蛋白表達(dá)水平來促進(jìn)其免疫抑制功能，可以看出miR-10a在nTreg和iTreg細(xì)胞中的功能差異保證了Treg細(xì)胞功能的穩(wěn)態(tài)維持。此外，miR-146a、mir-155并非通過上調(diào)Foxp3的表達(dá)來增強(qiáng)Treg細(xì)胞的免疫抑制作用，而是通過激活STAT1/STAT5信號(hào)通路維持其免疫活性。Lu等[17]深入研究發(fā)現(xiàn)，miR-146a和miR-155均在Treg細(xì)胞中普遍表達(dá)，miR-155通過抑制SOCS1從而使IL-2/STAT5信號(hào)通路增強(qiáng)，對(duì)Treg細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和增殖活性起到重要作用[18]，對(duì)Treg細(xì)胞的抑制功能并無明顯影響。而miR-146a缺失會(huì)使STAT1信號(hào)通路過度激活，IFN-γ水平升高，引起T細(xì)胞異?；罨瑢?dǎo)致外周T細(xì)胞免疫耐受喪失及 Treg細(xì)胞抑制功能異常引發(fā)AID。由此看來，不同的miRNA對(duì)Treg細(xì)胞的靶基因也有所差異，部分miRNA通過靶向抑制Foxp3和CTLA-4來削弱Treg細(xì)胞的免疫抑制作用，而部分miRNA則是通過激活STAT信號(hào)通路來增強(qiáng)其抑制作用，這些差異性表達(dá)的miRNA的功能互補(bǔ)共同維持了Treg細(xì)胞的免疫穩(wěn)態(tài)。

1.3 miRNA對(duì)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)的免疫調(diào)控miRNA亦可以影響CTL細(xì)胞的功能，主要是通過調(diào)節(jié)效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中的循環(huán)，誘導(dǎo)它們之間相互轉(zhuǎn)化，對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)進(jìn)行功能調(diào)控。在急性病毒感染的動(dòng)物模型中，CD8+T細(xì)胞被抗原激活后miR-17～92表達(dá)增多，隨著活化T細(xì)胞的大量增殖，miR-17～92表達(dá)逐漸減少，在T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為記憶階段后表達(dá)沉默[19]，在另一項(xiàng)研究中，Khan等[20]也證實(shí)了在CD8+T細(xì)胞中上調(diào)miR-17～92的表達(dá)則效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生增多；抑制miR-17～92表達(dá)時(shí)，記憶細(xì)胞增多。這提示我們miR-17～92可能通過某種通路調(diào)節(jié)CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞循環(huán)，其表達(dá)對(duì)CD8+T的快速增殖具有至關(guān)重要的作用。其機(jī)制可能為：效應(yīng)性CD8+T細(xì)胞中miR-17～92簇通過抑制包括PTEN、PD1、B淋巴和T淋巴衰減因子(B-and T-lymphocyte attenuator,BTLA)等負(fù)調(diào)控PI3K-AKT-mTOR軸的轉(zhuǎn)錄本，解除對(duì)PI3K-AKT-mTOR軸的抑制，增強(qiáng)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)的活性，促使細(xì)胞向終末效應(yīng)細(xì)胞分化，抑制記憶細(xì)胞的形成，當(dāng)下調(diào)miR-17～92簇時(shí)，有利于記憶性T細(xì)胞的形成。Tsai等[21]發(fā)現(xiàn)miR-155對(duì)CD8+T細(xì)胞的功能分化也具有同樣的作用，其在效應(yīng)性CD8+T細(xì)胞中表達(dá)最高，其次為效應(yīng)記憶性T細(xì)胞，在初始T細(xì)胞和中樞記憶性T細(xì)胞中低表達(dá)。其機(jī)制為miR-155缺失的CD8+T細(xì)胞通過誘導(dǎo)STAT1的磷酸化，使Ⅰ型干擾素信號(hào)通路極度活化，使得CD8+T細(xì)胞對(duì)于Ⅰ型干擾素的抗增殖作用更加敏感，細(xì)胞增殖受到抑制[22]。因此，miR-17～92和miR-155是在機(jī)體不同免疫狀態(tài)下介導(dǎo)效應(yīng)T和記憶T細(xì)胞的相互轉(zhuǎn)化對(duì)CTL進(jìn)行調(diào)控，維持CTL的效應(yīng)功能。

1.4miRNA對(duì)記憶T細(xì)胞的免疫調(diào)控miRNA除了介導(dǎo)機(jī)體不同免疫狀態(tài)下效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的相互轉(zhuǎn)換外，還能調(diào)節(jié)TCR信號(hào)通路，誘導(dǎo)幼稚T細(xì)胞向記憶T細(xì)胞分化。Carissimi[23]研究發(fā)現(xiàn)miR-21在記憶T細(xì)胞中高表達(dá)，誘導(dǎo)TCR與幼稚T淋巴細(xì)胞結(jié)合，通過一系列信號(hào)傳導(dǎo)刺激幼稚T淋巴細(xì)胞的增殖與活化，最終引發(fā)NFET、AP-1、NF-κB以及轉(zhuǎn)錄因子的激活，導(dǎo)致mRNA及相關(guān)蛋白轉(zhuǎn)錄翻譯，使得靜止的幼稚T細(xì)胞向記憶T和效應(yīng)T細(xì)胞分化。反過來抑制原始淋巴細(xì)胞中miR-21的活性，將導(dǎo)致IFN-γ表達(dá)增多并且原始淋巴細(xì)胞對(duì)TCR的活化反應(yīng)增強(qiáng)，這表明miR-21是TCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游的負(fù)調(diào)控因子。由于記憶T細(xì)胞對(duì)抗原刺激十分敏感，亦被激活轉(zhuǎn)化為效應(yīng)T細(xì)胞，因此，這項(xiàng)研究提示miR-21的高表達(dá)能夠抑制記憶T細(xì)胞對(duì)TCR的敏感性，避免了記憶T細(xì)胞受到亞刺激而過度活化，這一假說還有待于更多深入研究證實(shí)。

2　miRNA對(duì)AID中B淋巴細(xì)胞的調(diào)控作用

B細(xì)胞在AID的體液免疫中發(fā)揮主要作用，miR-146a、miR-150、miR-155和miR-181a在AID的B細(xì)胞中均有異常表達(dá)，通過激活生發(fā)中心B細(xì)胞(Germinal center B,GCB)，促進(jìn)B細(xì)胞成熟，產(chǎn)生高親和力抗體及記憶性B細(xì)胞的形成，對(duì)B細(xì)胞的分化發(fā)育及功能發(fā)揮起關(guān)鍵作用，進(jìn)而導(dǎo)致AID的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)miR-146a在前體B細(xì)胞和祖B細(xì)胞中表達(dá)很低，但在GCB中表達(dá)很高。miR-146可能作為一種新的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，通過下調(diào)其靶基因腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(Tumor necrosis factor-associated factor 6,TRAF6)和白介素1受體相關(guān)激酶1(Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)來降低NF-κB的活性精確調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)[24]。NF-κB與miR-146a之間可能存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，一方面NF-κB的活化可以上調(diào)miR-146a；另一方面，miR-146a通過下調(diào)TRAF6和IRAK1來降低NF-κB活性。另一項(xiàng)研究[25]通過自身免疫性淋巴增生綜合征(Autoimmune lymphoproliferative syndr-ome,ALPS)轉(zhuǎn)基因小鼠研究模型發(fā)現(xiàn)在GCB細(xì)胞形成過程中miR-146a下調(diào)了的Fas表達(dá)，使淋巴細(xì)胞穩(wěn)態(tài)失衡而導(dǎo)致過度淋巴增生，最終導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因小鼠形成ALPS病理表癥。這些研究提示miR-146a可能在GCB形成過程中特異性下調(diào)Fas的表達(dá)，并具有促進(jìn)細(xì)胞穩(wěn)定增殖的特性。miR-155也同樣可以激活GCB，刺激B細(xì)胞產(chǎn)生高親和力抗體及類別轉(zhuǎn)換。Thai[26]通過敲除GCB的miR-155后，發(fā)現(xiàn)Fas凋亡受體缺失的狼瘡小鼠巨脾癥狀減輕、血清中IgG抗體減少、腎炎緩解。含SH2區(qū)域的肌醇5′磷酸酶1( SHIP-1) 是miR-155的直接靶標(biāo)[27]，能夠抑制BCR激活和增殖，進(jìn)而抑制B細(xì)胞的激活和抗體的產(chǎn)生。miR-155不僅可以靶向抑制B細(xì)胞中SHIP-1的表達(dá)，同時(shí)還促進(jìn)ERK激酶信號(hào)通路的活化，進(jìn)而導(dǎo)致SHIP-1的表達(dá)再次受到抑制，影響B(tài)細(xì)胞的活性。故可以推測(cè)miR-155僅在B細(xì)胞激活時(shí)被誘導(dǎo)，只能影響AID中激活的B細(xì)胞，敲除miR-155僅阻止有害的特異性抗體產(chǎn)生而不會(huì)影響保護(hù)性的自然抗體，因此靶向祛除miR-155可能不會(huì)對(duì)人體健康構(gòu)成危險(xiǎn)。在重癥肌無力患者B細(xì)胞中的miR-155表達(dá)亦上調(diào)，其機(jī)制可能為miR-155通過上調(diào)電鰻乙酰膽堿受體(T-AChR)來刺激B細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體。Wang[28]在體外培養(yǎng)的B細(xì)胞和重癥肌無力小鼠模型中給予與抗-CD20單克隆抗體結(jié)合的miR-155共軛抑制劑使miR-155基因沉默后，B細(xì)胞活化因子(BAFF)受體相關(guān)的信號(hào)通路傳導(dǎo)減弱并且NF-κB向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移及AChR特異性抗體減少，小鼠肌無力樣癥狀減輕，對(duì)疾病起到一定的治療作用。此外，還有部分miRNA對(duì)造血祖B細(xì)胞的分化成熟過程起調(diào)控作用，影響活化B細(xì)胞的數(shù)量。祖B細(xì)胞中存在miR-150的高表達(dá)，它通過作用于靶基因c-Myb抑制祖B淋巴細(xì)胞向前體B淋巴細(xì)胞的發(fā)育，從而導(dǎo)致成熟B1淋巴細(xì)胞數(shù)目下降[29]。而miR-181a在造血祖細(xì)胞中低表達(dá)，在分化成熟B淋巴細(xì)胞中高表達(dá)，而在Dicer酶缺陷的B細(xì)胞中B細(xì)胞發(fā)育完全阻斷[30]，淋巴組織中濾泡樹突細(xì)胞與B細(xì)胞相互作用，誘導(dǎo)miR-181a過表達(dá)，miR-181a反過來靶向抑制前凋亡蛋白Bim的表達(dá)，從而阻止B細(xì)胞的凋亡，增加B細(xì)胞的數(shù)量[31]。以上研究提示miR-150、miR-181a參與了B細(xì)胞的分化及成熟過程。由此看來，B細(xì)胞的分化發(fā)育過程的各個(gè)階段均有不同miRNA對(duì)其進(jìn)行調(diào)控，提示B細(xì)胞異常激活及有害抗體的產(chǎn)生可能與某種miRNA的異常表達(dá)有關(guān)，研究AID中miRNA對(duì)B細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用，對(duì)進(jìn)一步揭示AID發(fā)病機(jī)制、發(fā)現(xiàn)新的AID標(biāo)記物及對(duì)未來靶向治療提供理論基礎(chǔ)。

3　結(jié)語

綜上所述，各類miRNA在不同自身免疫性疾病中對(duì)T、B淋巴細(xì)胞均有調(diào)節(jié)作用，通過調(diào)控淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能的異常，進(jìn)而介導(dǎo)自身免疫性疾病的發(fā)生。隨著近年研究miRNA在復(fù)雜生物信號(hào)系統(tǒng)中對(duì)免疫細(xì)胞分化及激活中的調(diào)控作用，miRNA在自身免疫性疾病中的基因調(diào)控通路成為目前研究的熱點(diǎn)，不同的miRNA在不同免疫性疾病中表達(dá)有所差異，這一差異主要與參與自身免疫性疾病發(fā)病的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)不同有關(guān)，這也進(jìn)一步體現(xiàn)出miRNA調(diào)控疾病特異性的特點(diǎn)，為自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制提供了重要思路。學(xué)習(xí)和探索不同miRNA介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞免疫紊亂的機(jī)制，不僅影響自身免疫性疾病的發(fā)生、進(jìn)展和預(yù)后，還將為自身免疫性疾病的免疫靶向治療提供依據(jù)。

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[收稿2015-08-20修回2015-09-15]

(編輯倪鵬)

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.08.035

R392文獻(xiàn)標(biāo)志碼A

1000-484X(2016)08-1237-05

②，E-mail:shaozonghong@sina.com。

郭瑩(1987年-)，女，碩士，主要從事免疫相關(guān)性血小板減少癥發(fā)病機(jī)制方面的研究，E-mail:guoying8246@sina.cn。

通訊作者及指導(dǎo)教師：瞿文(1966年-)，女，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，主要從事免疫相關(guān)性血小板減少癥發(fā)病機(jī)制方面的研究，E-mail:quwentj923@sina.com。