食管鱗癌組織中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表達(dá)及其臨床意義

曹　婧，任　美

(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 鄭州 450052)

?

食管鱗癌組織中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表達(dá)及其臨床意義

曹婧，任美

(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 鄭州 450052)

[摘要]目的探討食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達(dá)及臨床意義，并探討三者的相互關(guān)系。方法采用免疫組化S-P法檢測(cè)105例食管鱗癌和50例癌旁正常食管黏膜組織中survivin、caspase-3和caspase-8。結(jié)果食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽(yáng)性率分別為74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。食管鱗癌組織中survivin的表達(dá)與分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)。食管鱗癌組織中survivin與caspase-3和caspase-8均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.718，P<0.05)。結(jié)論Survivin、caspase-3和caspase-8在食管鱗癌組織中均存在異常表達(dá)，survivin可能通過抑制caspase-3、caspase-8表達(dá)而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，三者聯(lián)合檢測(cè)可用于食管鱗癌的病情和預(yù)后評(píng)估。

[關(guān)鍵詞]食管鱗癌；survivin；caspase-3；caspase-8

細(xì)胞凋亡是一種細(xì)胞的程序性死亡的生物學(xué)過程，其受促進(jìn)凋亡基因和凋亡抑制基因的調(diào)控，正常機(jī)體內(nèi)這種調(diào)控處于一種動(dòng)態(tài)的平衡狀態(tài)，保證機(jī)體各器官和組織的正常運(yùn)行，而腫瘤發(fā)生的過程則往往伴隨著細(xì)胞凋亡調(diào)控的失衡。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成員之一，可以通過caspase依賴性和非依賴性途徑發(fā)揮細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用，是細(xì)胞凋亡的主要調(diào)控效應(yīng)因子[1-2]。Caspase-3和caspase-8是2種參與細(xì)胞凋亡促進(jìn)作用的核心蛋白[2-4]。本研究通過檢測(cè)食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達(dá)，探討細(xì)胞凋亡在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中作用，以及調(diào)控因素，以期為食管鱗癌的診斷、預(yù)后評(píng)估提供一定參考數(shù)據(jù)，并為食管鱗癌的靶向治療提供靶點(diǎn)選擇方向。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源入組鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科2013年1月至2015年1月收治的經(jīng)病理學(xué)確診的食管鱗癌患者105例，其中男69例，女36例；年齡30~76歲，中位年齡53歲；分化程度：高分化40例，中分化39例，低分化26例；臨床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期39例，Ⅲ期37例，Ⅳ期10例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無(wú)43例，有62例。同時(shí)收集50例癌旁正常食管黏膜組織標(biāo)本作為對(duì)照。

1.2Survivin、caspase-3和caspase-8的檢測(cè)采用免疫組化S-P法檢測(cè)105例食管鱗癌和50例癌旁正常食管黏膜組織中survivin、caspase-3和caspase-8，以已知陽(yáng)性組織作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。鼠抗人survivin、caspase-3和caspase-8抗體以及S-P免疫組化試劑盒等均購(gòu)自福州邁新生物工程技術(shù)有限公司。

1.3結(jié)果評(píng)判隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡(×400)視野，綜合染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤5%計(jì)0分，6%~25%計(jì)1分，26%~50%計(jì)2分，51%~75%計(jì)3分，76%~100%計(jì)4分；染色強(qiáng)度：無(wú)染色計(jì)0分，淡黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。然后兩者乘積作為結(jié)果，0分為(-)，1~3為(±)，4~6為(+)，7~12為(++)，其中前兩者為陰性，后兩者為陽(yáng)性。所有染色評(píng)判均有2位病理科醫(yī)生獨(dú)立評(píng)判，然后綜合評(píng)判。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1不同食管組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達(dá)食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽(yáng)性率分別為74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

2.2食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系食管鱗癌組織中survivin的表達(dá)與分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)。見表1。

表1　食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系 　n(%)

2.3食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8表達(dá)相互關(guān)系食管鱗癌組織中survivin的表達(dá)與分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)。見表2~4。

表2　食管鱗癌組織中survivin與caspase-3的相關(guān)性

注：r=-0.630，P<0.05

表3　食管鱗癌組織中survivin與caspase-8的相關(guān)性

注：r=-0.556，P<0.05

表4　食管鱗癌組織中caspase-3與caspase-8的相關(guān)性

注：r=0.718，P<0.05

3討論

細(xì)胞凋亡是一種細(xì)胞程序性死亡過程，正常機(jī)體內(nèi)一定的細(xì)胞凋亡有利于機(jī)體的新陳代謝，屬于正常的生物學(xué)過程。正常機(jī)體內(nèi)，細(xì)胞凋亡受凋亡基因和凋亡抑制基因的雙向調(diào)控，維持動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。腫瘤的發(fā)生同樣是一種受多因素、多基因調(diào)控的多階段的過程，這一過程受到癌基因和抑癌基因的雙向調(diào)控，而且腫瘤的發(fā)生過程中一個(gè)重要的生物學(xué)行為就是細(xì)胞的異常增殖，而細(xì)胞凋亡受到抑制[5-6]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成員之一，具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)控細(xì)胞周期的雙重作用，正常機(jī)體僅表達(dá)于胚胎組織以及未分化或低分化的組織中，成年人機(jī)體內(nèi)一般不表達(dá)或低表達(dá)。在細(xì)胞凋亡這一生物學(xué)過程中，survivin可以通過caspase依賴性和非依賴性途徑發(fā)揮細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用，是細(xì)胞凋亡的主要調(diào)控效應(yīng)因子[1-2,7]。而caspase-3和caspase-8是2種參與細(xì)胞凋亡促進(jìn)作用的核心蛋白[2-4]。Caspase-3是細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白酶，是細(xì)胞凋亡過程的主要執(zhí)行者，也是細(xì)胞凋亡蛋白酶發(fā)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵步驟，其受到抑制是導(dǎo)致細(xì)胞凋亡停止的主要因素，這也是腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中其表達(dá)降低的原因[8]。Caspase-8是細(xì)胞凋亡程序的啟動(dòng)因子，能夠通過自身活化啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生，并通過調(diào)節(jié)caspase-3的表達(dá)而達(dá)到導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的目的，在腫瘤發(fā)生過程中，caspase-8通過甲基化、基因突變等降低其蛋白的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃脫細(xì)胞凋亡程序的監(jiān)控[9-10]。

本文結(jié)果顯示，食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽(yáng)性率分別為74.3%、37.1%、39.0%，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%、84.0%、80.0%，2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示食管鱗癌組織中三者存在異常表達(dá)。本研究通過分析survivin、caspase-3和caspase-8與食管鱗癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，食管鱗癌組織中survivin的表達(dá)與分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且隨著分化程度的進(jìn)展、臨床分期的加深、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生而陽(yáng)性率增加，提示survivin可能與食管鱗癌的疾病進(jìn)展和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)，能夠促進(jìn)其進(jìn)展；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達(dá)均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且兩者的陽(yáng)性率隨臨床分期的加深和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生而下降，提示caspase-3和caspase-8是食管鱗癌的疾病進(jìn)展阻止因子。本研究還發(fā)現(xiàn)，食管鱗癌組織中survivin與caspase-3和caspase-8均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.718，P<0.05)，這提示三者在食管鱗癌的疾病進(jìn)展的生物學(xué)進(jìn)程中相互影響。

綜上所述，survivin、caspase-3和caspase-8在食管鱗癌組織中均存在異常表達(dá)，survivin 可能通過抑制caspase-3、caspase-8表達(dá)而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，三者聯(lián)合檢測(cè)可用于食管鱗癌的病情和預(yù)后評(píng)估。

參考文獻(xiàn)：

[1]Suzuki O, Abe M, Hashimoto Y.Caspase-dependent drug-induced apoptosis is regulated by cell surface sialylation in human B-cell lymphoma[J].Oncol Lett, 2015,10(2):687-690.

[2]韓憲春，王帆，李喜茹,等．Survivin和caspase-3與在食管癌中的表達(dá)和意義[J].中國(guó)藥物與臨床， 2012,10(12):1328-1330.

[3]Terlizzi M, Di Crescenzo VG, Perillo G, et al.Pharmacological inhibition of caspase-8 limits lung tumour outgrowth[J].Br J Pharmacol,2015,172(15):3917-3928.

[4]Tan BL, Norhaizan ME, Huynh K, et al.Water extract of brewers' rice induces apoptosis in human colorectal cancer cells via activation of caspase-3 and caspase-8 and downregulates the Wnt/β-catenin downstream signaling pathway in brewers’ rice-treated rats with azoxymethane-induced colon carcinogenesis[J].BMC Complement Altern Med,2015,15:205.

[5]Lu Y, Gao W, Zhang C, et al.Hsa-miR-301a-3p Acts as an Oncogene in Laryngeal Squamous Cell Carcinoma via Target Regulation of Smad4[J].J Cancer,2015,6(12):1260-1275.

[6]Xiao P, Liu WL.MiR-142-3p functions as a potential tumor suppressor directly targeting HMGB1 in non-small-cell lung carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol, 2015,8(9):10800-10807.

[7]Zhang K, Li Y, Liu W,et al.Silencing survivin expression inhibits the tumor growth of non-small-cell lung cancer cells in vitro and in vivo[J].Mol Med Rep,2015,11(1):639-644.

[8]孫建建,李勝棉,趙松,等．Survivin和Caspase-3在胰腺癌組織中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系[J].腫瘤防治研究， 2012，39(1):62-67.

[9]Mitupatum T, Aree K, Kittisenachai S, et al.Hep88 mAb-mediated paraptosis-like apoptosis in HepG2 cells via downstream upregulation and activation of caspase-3, caspase-8 and caspase-9[J].Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(5):1771-1779.

[10]張曉峰,陳幕華,陳萍萍,等．食管癌組織中Caspase-8表達(dá)及臨床意義[J]. 山東醫(yī)藥， 2008，48(38):21-23.

Expressions of Survivin, Caspase-3 and

Caspase-8 in the Esophageal Squamous-celled Carcinoma

Cao Jing, Ren Mei

(ZhengzhouRailwalVocationalandTechnicalCollege,Zhengzhou450052,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma and the clinical significance, and to analyze their correlations.MethodsImmunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the 105 cases of esophageal squamous-celled carcinoma and 50 cases of paraneoplastic normal tissues.ResultsThe positive rates of surviving, caspase-3 and caspase-8 were 74.3%(78/105), 37.1%(39/105) and 39.0%(41/105)in the esophageal squamous-celled carcinoma, and were (2/50)%, 84.0%(42/50) and 80.0%(40/50) in the paraneoplastic normal tissues (P<0.05).The expression of survivin in the esophageal squamous-celled carcinoma was related with cell differentiation, clinical stage and lymph node metastasis(P<0.05).The expressions of caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma were related with clinical stage and lymph node metastasis (P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-3 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-630，P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-556，P<0.05).The expression of caspase-3 was positively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=0.718， P<0.05).ConclusionAbnormal expressions of Survivin、caspase-3 and caspase-8 are observed in the esophageal squamous-celled carcinoma, and the associated detection can be used to evaluate the pathogenetic condition and prognosis of esophageal squamous-celled carcinoma.

[Key words]esophageal squamous-celled carcinoma; survivin；caspase-3；caspase-8

收稿日期：(2015-02-18)

[中圖分類號(hào)]R735.1;R730.23

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1673-5412(2015)06-0477-04

作者簡(jiǎn)介：曹婧(1981-)，碩士，講師，主要從事食管癌的病理學(xué)研究。E-mail:caojing8098@126.com

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.06.005