腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平變化的研究

段慧云（牡丹江市第二人民醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157000）

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腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平變化的研究

段慧云
（牡丹江市第二人民醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157000）

【摘要】目的 通過(guò)對(duì)CD62p的觀察研究，判定其對(duì)腦血栓疾病的影響。方法 采用流式細(xì)胞儀對(duì)CD62p水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 治療后2、4、8周的血漿CD62p水平逐漸下降，且與治療前相比差異顯著（P＜0.05）。結(jié)論 腦血栓疾病的發(fā)生與發(fā)展是受到多種因素綜合影響，使得患者腦血管內(nèi)血液變成固狀，血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類(lèi)綜合疾病。

【關(guān)鍵詞】血小板；CD62p；腦血栓

血小板主要功能為參與血栓形成，主要通過(guò)其表面糖蛋白的作用來(lái)完成的，通常來(lái)說(shuō)，血小板內(nèi)的溶酶體膜糖蛋白與α-顆粒膜糖蛋白為靜息狀態(tài)，在各因素作用下，溶酶體膜與Q-顆粒膜和血小板漿膜相互融合，使得血小板表面的CD63與CD62p轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨“?，加?qiáng)了其聚集、黏附功能［1］。因而，在各種因子作用下使得血小板膜糖蛋白的數(shù)量與構(gòu)型重新發(fā)生變化，使得血小板內(nèi)部發(fā)生分泌反應(yīng)，形成血栓，主要為CD62p、GPⅡb/Ⅲa、CD42b等。本次研究主要對(duì)腦血栓的診療及預(yù)后做出相應(yīng)分析與判斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院2013年3月至2014年3月收治的腦血栓患者80例作為本次的額觀察對(duì)象，設(shè)為試驗(yàn)組（男58例，女22例，平均年齡67歲），另取在我院門(mén)診檢查為健康人群80例設(shè)為常規(guī)組（男55例，女25例，平均年齡68歲）。

1.2 方法

1.2.1 所需器材：CD42b抗體（藻紅蛋白標(biāo)記）、CD62p抗體（異硫氰酸熒光素標(biāo)記）；多聚甲醛、磷酸鹽緩沖液；需用儀器包括：Falocn上樣管、FACSCalibur流式細(xì)胞儀、CTAD真空采血管、血細(xì)胞分析儀等。

1.2.2 樣品的處理：治療前與治療后的2、4、8周取1.8 mL的靜脈血，置于抗凝劑離心管內(nèi)（包含枸緣酸鈉0.2 mL，3.8%濃度），離心5 min，保持800 r/min的速率，后將富血小板血漿分離出來(lái)，并置入等量的多聚甲醛（濃度為2%），并固定15 min，后對(duì)懸浮的血小板進(jìn)行洗滌（15 min，1000 r/min），后用緩沖液將血小板懸浮調(diào)節(jié)為1×1010/L的濃度。

1.3 熒光染色：將標(biāo)記的抗體CD62p，20 μL與CD42b，20 μL混合搖勻，置于避光處0.5 h，后進(jìn)行2次洗滌，并將其轉(zhuǎn)移至流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 流式細(xì)胞儀的檢測(cè)與數(shù)據(jù)分析：前向與側(cè)向角采用對(duì)數(shù)放大，每個(gè)樣品收集血小板20000個(gè)，并將熒光標(biāo)記的抗體陽(yáng)性百分比記錄下來(lái)，分別計(jì)算CD42b與CD62p的陽(yáng)性表達(dá)率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本次數(shù)據(jù)采用SPSS17.0的統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

治療后的2周血漿CD62p水平為（32.21±8.53）%；4周（24.26± 8.36）%；8周（12.25±6.37）%，與治療前數(shù)據(jù)［（50.24±9.81）%］比較差異顯著（P＜0.05），但是與常規(guī)組數(shù)據(jù)［（3.25±0.55）%］比較均較高（P＜0.05）。

3 討 論

大量臨床實(shí)驗(yàn)證明，腦梗死疾病的發(fā)生與發(fā)展與多種因素相關(guān)，其中起到重要作用的包括活化血小板于腦血栓中的形成、發(fā)展等過(guò)程，血漿CD62p指的是其特異性標(biāo)志。

CD62p作為血小板膜糖蛋白中的一種，其分布于靜止血小板與巨核細(xì)胞內(nèi)，其中α顆粒（非活化血小板胞質(zhì)內(nèi)）包含CD62p，當(dāng)血小板進(jìn)行活化時(shí)，該顆粒將血小板膜進(jìn)行融合后釋放，CD62p重新在血小板表面排列，且該物質(zhì)僅僅在活化血小板的表面表達(dá)，不隨時(shí)間變化而消失在血小板表面，CD62p同樣也可將血小板活化狀態(tài)適當(dāng)反映出來(lái)。所以說(shuō)，血小板活化特異性標(biāo)志之一是CD62p的表達(dá)［2］。

CD62p相對(duì)于血小板膜而言，介導(dǎo)血小板與淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞間的黏附，因此CD62p屬于活化血小板和白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等互相作用的紐帶。臨床研究顯示，CD62p也可以歸屬于單核細(xì)胞與中性白細(xì)胞間的一種受體，該物質(zhì)在細(xì)胞黏附過(guò)程中，使得中性白細(xì)胞與血小板相互進(jìn)行黏附、聚集、機(jī)化血栓等，除此之外，當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞或者是血小板進(jìn)行活化時(shí)，CD62p可以釋放至血漿內(nèi)，其中血漿內(nèi)CD62p的含量可以在一定程度上表現(xiàn)出血小板的活化程度與血栓的形成傾向。近年來(lái)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)［3］，CD62p可以作為血小板與血管內(nèi)皮細(xì)胞或者是中性粒細(xì)胞間的介導(dǎo)因子，可以使得單核細(xì)胞間互相進(jìn)行黏附并聚集等，可以有效啟動(dòng)并放大血栓形成等效用，對(duì)栓塞、相關(guān)炎癥等方面起著不可忽視的作用。

通過(guò)對(duì)CD62p的觀察研究可以對(duì)患者體內(nèi)的血小板與內(nèi)皮細(xì)胞的激活狀態(tài)有一定的參考作用，同樣對(duì)已血栓性、炎癥損傷等疾病的診療方面意義重大。最初相關(guān)研究通過(guò)對(duì)CD62p的檢測(cè)，并結(jié)合一些自身免疫性的疾病、腎臟疾病、糖尿病等進(jìn)行觀察，研究發(fā)現(xiàn)CD62p水平同樣會(huì)出現(xiàn)不同程度的升高，后來(lái)經(jīng)過(guò)更深層次的研究后得出，健康人體的血漿內(nèi)同樣存在可溶性的CD62p，但是其濃度較低。

所以說(shuō)，腦血栓疾病是受各種因素影響，并使得患者腦血管內(nèi)血液變成固狀，促使血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類(lèi)綜合疾病。

參考文獻(xiàn)

［1］王朝輝，鞠文博，黃競(jìng)妍，等.腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平的比較［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2013，33（5）:1152-1153.

［2］許文芳，陳雪芳，尹琪華，等.急性腦梗死患者血小板CD62p和CD63的變化及臨床意義［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25（1）:78-79.

［3］王朝輝，鞠文博.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板膜糖蛋白與血栓性疾病變化關(guān)系研究［J］.北華大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，14（5）: 542-545.

中圖分類(lèi)號(hào)：R743

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）13-0176-01