中藥何首烏致肝損傷物質(zhì)基礎(chǔ)的研究進(jìn)展

黃一心，陳璐

·綜述進(jìn)展·

中藥何首烏致肝損傷物質(zhì)基礎(chǔ)的研究進(jìn)展

黃一心，陳璐

查閱近年來有關(guān)何首烏致肝損傷物質(zhì)基礎(chǔ)研究的文獻(xiàn)資料，進(jìn)行分析和歸納整理，為進(jìn)一步深入開展相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。

何首烏；肝損傷；物質(zhì)基礎(chǔ)

何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multiflorum Thunb.的干燥塊根，其性微溫，味苦、甘、澀，為臨床常用中藥，包括生首烏及制首烏。近年頻繁出現(xiàn)患者使用生首烏、制首烏及其劑型導(dǎo)致肝損傷的報(bào)道，逐漸引起醫(yī)藥學(xué)界的廣泛關(guān)注，并有學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)研究。本文對(duì)近年來有關(guān)何首烏致肝損傷的研究文獻(xiàn)進(jìn)行歸納整理，就其致肝損傷物質(zhì)基礎(chǔ)方面進(jìn)行綜述，以期為該藥材的臨床安全應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 化學(xué)成分

何首烏中含有二苯乙烯苷類、卵磷脂、蒽醌類、黃酮類、鞣質(zhì)、微量元素等化學(xué)成分?，F(xiàn)有研究認(rèn)為，何首烏的肝損傷作用可能與以下化學(xué)成分有關(guān)：

1.1 大黃酚

衛(wèi)培峰等[1]將制首烏中提取出的大黃酚、大黃素、大黃素和制首烏按6.67g生藥/kg的劑量分別給大鼠灌胃，連續(xù)給藥3個(gè)月，各給藥組大鼠血清中ALT均有不同程度升高，大黃酚組ALT 升高有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），制首烏組及大黃酚組均能明顯增加大鼠肝細(xì)胞凋亡指數(shù)，大黃酸組和大黃素組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)無明顯變化（P＞0.05）。提示大黃酚可能是臨床上導(dǎo)致藥物性肝損傷的化學(xué)成分之一。

1.2 大黃素及大黃酸

孫向紅等[2]研究發(fā)現(xiàn)，大黃素、大黃酸在低濃度（6.25 μmol·L-1，12.5 μmol·L-1）、作用時(shí)間短（48 h以內(nèi)）時(shí)，對(duì)肝細(xì)胞L-O2生長有促進(jìn)作用，但隨著濃度的增加、作用時(shí)間的延長，對(duì)肝細(xì)胞L-O2損傷增大即抑制率增加。50 μmol·L-1、作用48 h，對(duì)肝細(xì)胞L-O2能產(chǎn)生顯著抑制。在濃度6.25～50 μmol· L-1范圍內(nèi)，隨著濃度的增加、作用時(shí)間的延長，大黃酸、大黃素對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL的抑制率增加。當(dāng)大黃素濃度達(dá)到50 μmol·L-1以上、作用25 h，或在25 μmol·L-1濃度下作用48 h以上，抑制率與空白組比較有顯著性差異。

1.3 鞣質(zhì)

李婭琳等[3]將從何首烏中提取出的鞣質(zhì)和鞣質(zhì)、二苯乙烯苷不同配比組（1:1、2:1）分別給大鼠灌胃，結(jié)果顯示：給藥60 d，鞣質(zhì)大劑量組（4.4 g·kg-1）、鞣質(zhì)與二苯乙烯苷各配比組大鼠血清中ALT顯著升高（P＜0.01）；給藥90d，鞣質(zhì)大劑量組、鞣質(zhì)與二苯乙烯苷1:1配比組大鼠血清ALT、GGT顯著升高（P＜0.05）；鞣質(zhì)短期內(nèi)可促進(jìn)膽紅素在肝臟中的代謝，這種促進(jìn)作用受到二苯乙烯苷的影響，并且隨著二苯乙烯苷含量的減少而降低；鞣質(zhì)與二苯乙烯苷1:1配比組可引起膽道阻塞，并隨著時(shí)間的延長而加重；鞣質(zhì)可以促進(jìn)肝臟分泌膽堿酯酶，二苯乙烯苷與鞣質(zhì)各配比組均顯著降低膽堿酯酶的分泌。恢復(fù)15 d 后，各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組均無顯著差異。

1.4 沒食子酸

嚴(yán)曉鶯等[4]采用MTT實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst-33258熒光染色法和電鏡檢測技術(shù)研究沒食子酸對(duì)正常人肝細(xì)胞（L-O2）的體外細(xì)胞毒性。結(jié)果顯示，沒食子酸可抑制L-O2細(xì)胞增殖，并呈劑量依賴關(guān)系；同時(shí)還可誘導(dǎo)L-O2細(xì)胞凋亡，當(dāng)沒食子酸濃度為100 μmol·L-1時(shí)，凋亡率達(dá)到12.53%。選用100 μmol·L-1組進(jìn)行后續(xù)的形態(tài)學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)顯示，沒食子酸對(duì)L-O2細(xì)胞形態(tài)學(xué)也有一定程度的影響，其誘導(dǎo)凋亡特征很明顯。

2 炮制方法

何首烏炮制后二苯乙烯苷類成分隨炮制時(shí)間的延長含量下降，而游離蒽醌類物質(zhì)大黃素、大黃素甲醚含量顯著上升[5]。何首烏導(dǎo)致的肝損傷與炮制有明顯相關(guān)性，生首烏、制首烏及制首烏的不同炮制品對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝臟的影響各不相同。

2.1 生首烏與制首烏對(duì)肝臟的影響

涂燦等[6]將生、制何首烏75%乙醇提取物按50g生藥·kg-1劑量給SD大鼠連續(xù)灌胃6周，生何首烏組大鼠血清ALT、AST、ALP、DBIL、TBIL顯著升高（P＜0.05或0.01）；IBIL、TBA顯著性降低（P＜0.05或0.01）；制何首烏組血清各項(xiàng)指標(biāo)變化不明顯。病理組織分析顯示生何首烏組肝組織結(jié)構(gòu)破壞明顯，局部見肝細(xì)胞壞死；制首烏組肝臟組織基本正常，未見明顯病變現(xiàn)象。提示炮制能有效降低何首烏肝毒性。

王文靜等[7]將生、制何首烏按30 g生藥/kg劑量給SD大鼠連續(xù)灌胃給藥90 d，生何首烏組肝微粒體蛋白顯著性下降，CYP450含量顯著增高（P＜0.01），制何首烏組無明顯變化；生、制何首烏均能夠影響血液生化酶，生何首烏減低ALT、AST，制何首烏升高ALP，二者同時(shí)降低TG、BUN和CREA，提示生、制何首烏致大鼠肝物質(zhì)代謝途徑的作用機(jī)制有所不同。

2.2 制首烏不同炮制品的肝損傷研究

李衛(wèi)先等[8]對(duì)何首烏的不同炮制品和生首烏進(jìn)行了長期毒性研究，籠屜蒸72 h、48 h、24 h、12 h炮制品和生品按10 g生藥/kg劑量給大鼠連續(xù)灌胃12周，檢測血液生化指標(biāo)，籠屜蒸72 h、24 h、12 h和生品組ALT、AST、ALP均顯著升高，籠屜蒸48 h組各指標(biāo)與空白對(duì)照組比較無顯著差異。據(jù)此提出何首烏致肝損傷是由于炮制不當(dāng)所致。張敏等[9]用清蒸首烏、黑豆汁制首烏A、B、C按0.5 g生藥/(100 g· d)劑量給大鼠連續(xù)灌胃給藥90 d，各組大鼠血清AST均顯著升高（P＜0.05或0.01），ALT均無明顯變化（P＞0.01）；與空白組比較，黑豆汁制B、C 組對(duì)大鼠肝微粒體CYP2E1 酶活性有顯著性誘導(dǎo)作用（P＜0.05）；清蒸組、黑豆汁制A組無顯著性影響（P＞0.05）；病理觀察顯示各給藥組均出現(xiàn)明顯的病理改變。

3 討論

何首烏作為傳統(tǒng)補(bǔ)益中藥，在藥品、保健食品、食品領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛。近年來，國內(nèi)外有關(guān)其肝損傷方面的報(bào)道和病例日益增多，需引起醫(yī)院、藥品監(jiān)督管理部門、醫(yī)藥科研機(jī)構(gòu)的高度重視。目前，有關(guān)何首烏致肝損傷的物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究還剛剛起步，引起肝毒性的化學(xué)成分及作用機(jī)理尚無定論，相關(guān)研究論文多集中在近五年，研究深度還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。

炮制能有效降低何首烏的肝毒性，不同炮制方法與致肝損傷作用有明顯的相關(guān)性。商品流通中的制首烏品種繁多，有清蒸、酒制、黑豆制、黑豆+甘草制、黑豆+生姜制、黑豆+黃酒制等，炮制時(shí)間長短、輔料與藥材配比等也缺乏統(tǒng)一規(guī)范，導(dǎo)致臨床上使用的飲片品質(zhì)參差不齊，嚴(yán)重影響了用藥的安全性與可控性。建議加強(qiáng)何首烏的炮制工藝研究，制定合理統(tǒng)一的詳細(xì)的炮制規(guī)范。

可喜的是，有研究者提出了切實(shí)可行的研究思路。對(duì)比何首烏炮制前后化學(xué)成分的變化，涂燦等[6]推測，何首烏中主要的肝毒性物質(zhì)并不是由其中某一種成分單一的增減造成的，何首烏中的免疫增強(qiáng)物質(zhì)（如二苯乙烯苷類）可能會(huì)導(dǎo)致肝臟對(duì)何首烏中潛在的肝損傷成分（如大黃素類）的易感性增強(qiáng)，出現(xiàn)炎癥因子過表達(dá)，從而誘發(fā)免疫應(yīng)激肝損傷。炮制后免疫增強(qiáng)物質(zhì)（二苯乙烯苷類）含量的降低導(dǎo)致肝臟對(duì)何首烏有毒成分的敏感性降低，而達(dá)到炮制減毒的目的。其課題組提出的“中藥（何首烏）免疫應(yīng)激肝損傷假說”值得深入研究驗(yàn)證。

另外值得關(guān)注的是，何首烏肝損傷不良反應(yīng)信息分析結(jié)果顯示，何首烏的肝損傷存在遺傳因素，有些不良反應(yīng)案例具有明顯的家族性趨勢，推測可能與病人的肝臟代謝酶缺陷有關(guān)，造成藥物體內(nèi)堆積而出現(xiàn)藥源性肝損傷[10]。這或許能為下一步進(jìn)行深入的機(jī)理研究指明方向。

[1] 衛(wèi)培峰,黨艷麗,焦晨莉,等.何首烏不同成分與肝細(xì)胞凋亡的相關(guān)性研究[J].陜西中醫(yī),2009,30(2):238.

[2] 孫向紅,孫玉維,李紅,等.何首烏主要成分大黃素、大黃酸和二苯乙烯苷對(duì)肝細(xì)胞、肝癌細(xì)胞的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,19(11):1315.

[3] 李婭琳.何首烏中鞣質(zhì)及其與二苯乙烯苷不同配比對(duì)大鼠肝臟的影響[D].陜西中醫(yī)學(xué)院,2010.

[4] 嚴(yán)曉鶯,陳巨鵬,許冬青,等.沒食子酸對(duì)人正常肝細(xì)胞LO2的體外細(xì)胞毒性研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2012,39(8):1582.

[5] 陳慶堂,卓麗紅,徐文,等.何首烏炮制過程中5種化學(xué)成分的含量變化[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(5):66.

[6] 涂燦,蔣冰倩,趙艷玲,等.何首烏炮制前后對(duì)大鼠肝臟的損傷比較及敏感指標(biāo)篩選[J].中國中藥雜志,2015,40(4):654.

[7] 王文靜,李婭琳.生何首烏、制何首烏對(duì)大鼠肝微粒體CYP450的影響[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2014,34(2):76.

[8] 李衛(wèi)先,張琦,王國仁等.不同炮制品種制何首烏致肝損害的研究[J].光明中醫(yī),2012,27(3):595.

[9] 張敏.何首烏對(duì)肝臟損害的物質(zhì)基礎(chǔ)及其機(jī)制研究[D].陜西中醫(yī)學(xué)院,2011.

[10] 陳盛君.何首烏肝損傷不良反應(yīng)信息分析及其毒性機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2013,33(7):573.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

Review of research on material foundation of Polygoni mulitifori Radix induced liver injury /

HUANG Yi-xin, CHEN Lu//(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan）

The research on material foundation of Polygoni mulitifori Radix induced liver injury are reviewed to lay the foundation for further research.

Polygoni mulitifori Radix；liver injury；material foundation

R 285.5

A

1674-926X(2016)06-017-02

四川省科技廳省青年科技創(chuàng)新研究團(tuán)隊(duì)專項(xiàng)計(jì)劃項(xiàng)目（2015TD0028）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 610075

黃一心，中藥資源與開發(fā)專業(yè)2013級(jí)學(xué)生

Tel:18408260251 Email:464791377@qq.com

陳璐，副教授，主要從事中藥品種、品質(zhì)與資源研究

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2015-10-07