獻血者血液核酸檢測的關鍵及控制點思考

呂 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地區(qū)中心血站檢驗科，新疆 喀什 844000）

獻血者血液核酸檢測的關鍵及控制點思考

呂 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地區(qū)中心血站檢驗科，新疆 喀什 844000）

隨著我國無償獻血事業(yè)的迅速發(fā)展，群眾的思想覺悟越來越高，越來越多獻血者自愿獻血，這對臨床搶救和治療具有重大意義。獻血者血液核酸檢測對控制血液質量起到關鍵的把關作用，測得值應在試劑說明書規(guī)定范圍之內。檢測的過程中，必須核對可疑標本，對標本進行復查，必要時進行雙孔復查，檢測質量控制是保證檢測質量的關鍵所在。為了確保血站實驗室的檢測結果能夠記錄完整并得到妥善的保留，提高血液標本檢測過程中的規(guī)范性，衛(wèi)生部頒發(fā)了相關質量管理制度，明確了質量控制的主要范圍，明確了用血的規(guī)范，為了保證血液的質量，必須對檢驗過程的關鍵控制點進行檢查，確保批號和有效期限的準確性。為此本文重點探討獻血者血液核酸檢測的關鍵及控制。

血液核酸檢測；關鍵及控制點

開展血站核酸檢測是保證血液安全的重要舉措。按照《血站技術操作規(guī)程》的要求，對所有無償獻血者捐獻的血液都要經(jīng)過至少兩次或者兩次以上輸血傳播疾病指標（抗原或抗體）的檢測，包括HIV（艾滋病病毒）、HBV（乙肝病毒）、HCV（丙肝）和梅毒，結果均為陰性，就可以在臨床給患者使用[1-2]。之前獻血中心血站一直采用免疫學方法檢測血液中的抗體[3]。雖然免疫學方法的靈敏度和特異性在不斷改進和提高，但由于方法本身的局限性，“窗口期”獻血、病毒變異等因素仍然可能引起輸血后疾病的感染，而核酸檢測技術通過檢測抗原的方式，可大大降低輸血性感染的幾率，進一步保障血液安全。現(xiàn)將檢測過程如下闡述。

1 檢測前的控制點

1.1 在獻血前，血站工作人員要對獻血者進行健康征詢、量血壓、稱體重等檢查，并對血型、血紅蛋白、谷丙轉氨酶、乙型肝炎表面抗原、梅毒快檢等項目進行血液快速篩查，經(jīng)綜合評估，合格者才能獻血。同時，對于獻血者來說，快速篩查和采血時使用的穿刺針、采血袋等所有器材都是從具有國家規(guī)定資質并驗收合格的生產(chǎn)廠家采購的。每一位獻血者都使用一套新的采血器材，用后集中銷毀[4]。

1.2 采血管應使用一次性無菌的真空采血管。分離膠是由疏水有機化合物和硅石粉組成的，結構中含有大量氫鍵，其比重介于血漿和細胞成分之間，可形成隔離層。離心時，惰性分離膠能夠將血液中的液體成分（血清或血漿）和固體成分（紅細胞，白細胞，血小板，纖維蛋白等）徹底分開并完全積聚在試管中央而形成屏障，標本在48 h內保持穩(wěn)定。當失去離心力后，分離膠中鏈狀結構再次變成網(wǎng)狀結構，恢復初始高黏度凝膠狀態(tài)，在血漿和細胞成分間形成隔離層[5]。

1.3 標本與血液同源

在采取血液過后，護士應在每個采血管上做標示，防止貼錯標識，防止留錯血液標本，并認真核對體檢表標簽、血袋標簽、標本標簽。

1.4 防止標本溶血

標本溶血后，紅細胞破壞所釋放的血紅蛋白（Hb），其組分亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣作用，可能造成ELISA假陽性；進而抑制Taq酶的活性，使PCR擴增效率明顯降低，導致結果偏低（甚至假陰性）[6]。

1.5 處理與保存要求

血液是一種特殊物質，由不同的血液成分組成，不同血液成分的儲存條件也存在一定差異，血液必須在規(guī)定的條件下保存。如紅細胞在2～6℃冷藏環(huán)境中可儲存35天，血小板可在20～24℃振蕩條件下保存5天，新鮮冰凍血漿在-18℃以下的低溫冰箱中可儲存1年，等等。超出血液儲存條件和期限，血液就會失去應有的作用。

1.6 儀器設備的控制

儀器設備應有標識和校正驗證的標識，使用和維護記錄填寫相關數(shù)據(jù)的完整與保存，定期給儀器維護與維修。如使用全自動擴增檢測設備，可根據(jù)儀器的特點適當分區(qū)，應能有效防止PCR產(chǎn)物污染。實驗室的分區(qū)原則是各區(qū)獨立、注意流向、因地制宜、方便工作，同時各工作區(qū)應有明確標識[7]。

2 檢測中的控制

2.1 建立標準的血液核酸檢測工作程序

保證檢測工作流程同一化，標本符合檢測項目技術要求，試劑使用符合說明書要求，信息管理系統(tǒng)和設備運行通暢。

2.2 保持環(huán)境的清潔

核酸檢測過程中敏感性極高，微量的污染很有可能導致實驗失敗，最終使用血液的浪費。在實驗室中具備鞋、工作衣或防護服、鞋套、無粉乳膠手套、一次性口罩、一次性帽子等基本工作用具。各個各實驗區(qū)的用品應有標識，不得混用；配備有相應防護設備，防止在檢測的過程中有細菌感染。引起污染的主要原因有標本污染、設備污染和其它污染。應嚴格控制進出實驗室的人員，盡量減少在實驗區(qū)內不必要的走動以減少交叉污染的可能性，工作完成后及時對實驗室進行有效地清潔去污和消毒，核酸檢測實驗室要做好日維護、月維護工作[8]。

2.3 做好質量控制及評價工作

室內質控必須保證使用試劑中有內標；必須保證試劑存放符合要求，防止污染；必須采用陰性對照，以判斷核酸實驗室是否污染；必須每個檢測批次都有陽性對照，以監(jiān)測核酸提取的有效性。同時應參加衛(wèi)生計生委臨床檢驗中心組織的室間質量評價活動，以評價實驗的準確性。

3 檢測后控制

3.1 首先看內標，陰陽對照和質控擴增結果，無誤方可發(fā)放報告。

3.2 核酸單檢陽性獻血者的追蹤應遵循知情同意原則

酶免陰性核酸單檢陽性獻血者，應進行追蹤，不同的實驗項目制定相應的追蹤方案。獻血者的追蹤，需要多個科室協(xié)同進行，并遵循知情同意原則。

3.3 開展計算機信息管理系統(tǒng)標準化建設

集中化核酸檢測實驗室必須應用系統(tǒng)化對標本的采集與保存、離心與運輸、交接及標簽編碼，以及檢測過程和檢測報告的發(fā)布等進行信息化管理。委托方和受委托方應統(tǒng)一血液信息管理軟件、統(tǒng)一標本編碼規(guī)則，保證區(qū)域內每份血液和其標本的追溯性，保證血液檢測信息的準確、及時、安全、有效和完整。

4 結 論

核酸檢測可有效地縮短窗口期，降低輸血風險，提高血液安全。在獻血者核酸檢測過程中，應做好實驗室管理，制訂實驗室質量管理體系，嚴格各項技術操作，熟練掌握儀器設備性能，防止實驗室污染，保證檢測結果的精密度和準確性，不斷提高血液檢測質量，確保臨床用血安全。

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[3] 趙紅娜,王藝芳,李俊英,葛文超,方建華.核酸檢測與酶免檢測在鄭州地區(qū)血液篩查中的聯(lián)合應用[J].中國輸血雜志,2015,11(3):423-424.

[4] 馮 晴,孟中華,呂杭軍.浙江省血站血液集中化檢測工作實踐對于規(guī)劃全省血液核酸檢測的啟示[J].中國輸血雜志,2014,08(14): 89-90.

[5] 李 薇,溫馨娜,鄭慧麗.齊齊哈爾市無償獻血者血液HBV、HCV、HIV酶免檢測聯(lián)合核酸檢測結果分析[J].中國繼續(xù)醫(yī)學教育,2016,07(12):147-148.

[6] 方奎明,孫 昂,吳曉晉,祝 青,黃志翔,魯紅霞,易 玲,符 凱,李 軼.血液核酸檢測降低血傳播疾病風險的研究[J].實用預防醫(yī)學,2016,10(15):234-235.

[7] 張 峰,張 瓊,林 碧,菜淑峰,林 杰.血清學聯(lián)合核酸檢測在獻血者血液篩查中的互補性[J].中國艾滋性病,2016,03(12):523-524.

[8] 田耘博,毛 偉,廖紅文.重慶市血液中心血液病毒核酸檢測試劑利用率的回顧性分析[J].中國輸血雜志,2016,10(11):325-326.

本文編輯：劉欣悅

R446.6

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ISSN.2095-6681.2016.33.29.02