蠶沙和稻秸不同比例組合對(duì)瘤胃微生物體外發(fā)酵的組合效應(yīng)

孫麗莎 李華偉 崔慧慧 趙 睿 王夢(mèng)芝 喻禮懷 王洪榮（揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009）

蠶沙和稻秸不同比例組合對(duì)瘤胃微生物體外發(fā)酵的組合效應(yīng)

孫麗莎 李華偉 崔慧慧 趙 睿 王夢(mèng)芝 喻禮懷 王洪榮?
（揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州225009）

摘 要：本文采用瘤胃微生物體外發(fā)酵法研究了不同比例蠶沙（SE）和稻秸（RS）的組合效應(yīng)。試驗(yàn)將SE：RS設(shè)計(jì)為100∶0（SE100組）、80∶20（SE80組）、60∶40（SE60組）、40∶60（SE40組）、20∶80（SE20組）、0∶100（SE0組）的比例，分別進(jìn)行體外發(fā)酵批次培養(yǎng)24 h和體外發(fā)酵產(chǎn)氣培養(yǎng)72 h，測(cè)定產(chǎn)氣參數(shù)和發(fā)酵特性指標(biāo)。結(jié)果表明：1）SE100組理論最大產(chǎn)氣量顯著高于其他各組（P＜0．05），SE80組的24和72 h累積產(chǎn)氣量顯著高于其他組（P＜0．05）。2）24 h時(shí)培養(yǎng)液總揮發(fā)性脂肪酸濃度為SE80組＞SE100組＞SE60組＞SE40組＞SE0組＞SE20組，乙酸／丙酸為SE80組＜SE40組＜SE20組＜SE60組＜SE0組＜SE100組。3）24 h時(shí)培養(yǎng)液的微生物蛋白濃度SE20組＞SE100組＞SE60組＞SE80組＞SE40組＞SE0組。4）隨著蠶沙比例的升高，底物體外有機(jī)物消化率越高。5）SE80組多項(xiàng)指標(biāo)組合效應(yīng)指數(shù)為0．76，SE80組＞SE40組＞SE60組＞SE20組。蠶沙和稻秸組合改善了體外瘤胃微生物發(fā)酵特性和產(chǎn)氣參數(shù)，且蠶沙和稻秸的最佳比例為80∶20。關(guān)鍵詞：蠶沙；稻秸；體外發(fā)酵；組合效應(yīng)

我國南方蠶桑副產(chǎn)物資源豐富，蠶沙（silk?worm excrement，SE）是在養(yǎng)蠶生產(chǎn)中蠶糞與蠶食桑后剩下的桑渣的混合物。郭春華等［1］研究表明，蠶沙干物質(zhì)中粗蛋白質(zhì)（CP）和粗纖維含量分別為13．03%和17．37%，與山羊飼糧營養(yǎng)水平相當(dāng)，是一種優(yōu)質(zhì)的山羊飼料。稻秸（rice straw，RS）是我國南方的主要農(nóng)作物秸稈，稻秸木質(zhì)化程度高，適口性差，采食量和消化率偏低。飼糧的組合效應(yīng)實(shí)質(zhì)上是指來自不同飼料源的營養(yǎng)性物質(zhì)、非營養(yǎng)性物質(zhì)以及抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)之間互作的整體效應(yīng)［2］。Tan等［3］研究表明，肉牛飼喂稻秸時(shí)添加桑葉能顯著提高干物質(zhì)采食量、瘤胃液氨氮（NH3?N）濃度和纖維素分解菌數(shù)量，從而改善瘤胃內(nèi)環(huán)境。在秸稈與其他粗飼料的組合飼喂方面，國內(nèi)外學(xué)者的研究主要集中在秸稈與豆科牧草、青綠飼料和甜菜渣等多汁粗飼料的組合方面，結(jié)果發(fā)現(xiàn)秸稈與上述飼料組合，能提高反芻動(dòng)物對(duì)粗飼料的采食量和消化率［4－5］。有研究表明，在山羊［6－7］、兔［8］飼糧中添加一定比例的蠶沙，不但可以降低飼糧成本，而且還能提高生長(zhǎng)速率，增加養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。但是，目前國內(nèi)外關(guān)于蠶沙與秸稈組合對(duì)反芻動(dòng)物的影響還沒有討論。因此，本文以蠶沙和稻秸組合在體外瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣參數(shù)和特性指標(biāo)，利用多項(xiàng)組合效應(yīng)找出最佳組合比例，旨在探求南方經(jīng)濟(jì)作物副產(chǎn)物蠶沙的有效利用以及蠶沙和低質(zhì)秸稈飼料的有效飼喂方式。

1　材料與方法

1．1 試驗(yàn)材料

蠶沙從江蘇姜堰養(yǎng)蠶農(nóng)業(yè)示范區(qū)收集，稻秸為收獲稻谷后的晚稻秸，65℃烘干后粉碎過40目篩保存，測(cè)定常規(guī)營養(yǎng)水平。

1．2 瘤胃液供體動(dòng)物

選3只體況良好、體重相近、安裝有永久性瘤胃瘺管的健康綿羊?yàn)榱鑫敢汗w。試驗(yàn)瘺管羊飼糧配制參照NRC（2003）。組成：玉米30．0%，豆粕12．5%，麥麩5．0%，羊草37．5%，苜蓿10．0%，食鹽1．0%，預(yù)混料4．0%。營養(yǎng)水平：代謝能11．31 MJ／kg，CP 13．69%。代謝能為維持需要的1．2倍，精粗比為30∶70，日喂2次（08：30和18：00）、自由飲水、常規(guī)光照。

1．3 人工瘤胃體外發(fā)酵

1．3．1 瘤胃液的采集與分配

在瘺管羊早飼前，利用自制真空負(fù)壓裝置，3只瘺管羊分別采集瘤胃液300 mL，經(jīng)2層紗布過濾，裝入保溫瓶，通CO2，置于39℃水浴中保溫。

1．3．2 體外發(fā)酵產(chǎn)氣培養(yǎng)（72 h）

本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將蠶沙和稻秸（SE：SR）設(shè)計(jì)為100∶0（SE100組）、80∶20（SE80組）、60∶40（SE60組）、40∶60（SE40組）、20∶80 （SE20組）、0∶100（SE0組）的比例，不同比例蠶沙與稻秸組合的主要營養(yǎng)成分見表1。稱取混合底物0．5 g于不同標(biāo)號(hào)的發(fā)酵瓶（100 mL）中紫外滅菌30 min，分別加入人工唾液40 mL（事先通CO2至飽和，于39℃水浴30 min），再分別加入混合瘤胃液20 mL，塞好橡皮塞，通過進(jìn)氣通道通入混合氣體至飽和，于64通路AGRS－Ⅲ型體外發(fā)酵產(chǎn)氣自動(dòng)記錄系統(tǒng)中培養(yǎng)［9］，培養(yǎng)過程中產(chǎn)氣量自動(dòng)記錄，39℃恒溫條件下連續(xù)培養(yǎng)72 h，期間每12 h輕輕晃動(dòng)發(fā)酵瓶。設(shè)1個(gè)空白組，即無底物的瘤胃液與人工唾液的混合液。每組設(shè)置4個(gè)重復(fù)。

表1　不同比例蠶沙與稻秸組合的主要營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Main nutrient levels of different combinations of SE and RS（air?dry basis）　%

1．3．3 體外發(fā)酵批次培養(yǎng)（24 h）

按照1．3．2步驟配制緩沖液和稱取樣品，在SHA－A恒溫振蕩水浴鍋中進(jìn)行微生物發(fā)酵24 h，設(shè)1個(gè)空白組，即無底物的瘤胃液與人工唾液的混合液，每種混合底物設(shè)置15個(gè)重復(fù)，每次取出3個(gè)發(fā)酵罐。分別在培養(yǎng)開始后0、3、6、9、12、24 h取樣［10］，每次取10 mL，分裝于2只5 mL的離心管中，－20℃冷凍保存，用于微生物蛋白（MCP）和揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度的測(cè)定。將3個(gè)發(fā)酵終止后殘留物過濾、洗滌、烘干稱量后，然后轉(zhuǎn)入烘干的坩堝于馬福爐中（620±2）℃烘至恒重，用于測(cè)定體外有機(jī)物消化率（IVDOM）。

1．4 指標(biāo)測(cè)定與方法

1．4．1 產(chǎn)氣量和產(chǎn)氣參數(shù)的計(jì)算

根據(jù)公式數(shù)據(jù)模型進(jìn)行非線性回歸擬合：

式中：GPt為底物發(fā)酵在t時(shí)間點(diǎn)的發(fā)酵累計(jì)產(chǎn)氣量（mL／g DM）；A為體外發(fā)酵理論最大產(chǎn)氣量（mL／g DM）；B為曲線拐點(diǎn)參數(shù)；C為達(dá)1／2理論最大產(chǎn)氣量的時(shí)間（h）。

1．4．2 MCP和VFA濃度的測(cè)定

參照Wang等［12］的方法進(jìn)行微生物分離和MCP濃度的測(cè)定。總揮發(fā)性脂肪酸（TVFA）、乙酸、丙酸、丁酸濃度采用氣相色譜按Khorasani等［13］的方法測(cè)定；TVFA濃度是乙酸、丙酸、丁酸濃度之和。

1．4．3 IVDOM的計(jì)算

式中：m0為樣品重（g）；m1為坩堝重（g）；m2為空白樣殘?jiān)兀╣）；m3為坩堝＋樣品殘?jiān)兀╣）。

1．4．4 組合效應(yīng)的計(jì)算

單項(xiàng)組合效應(yīng)指數(shù)（SFAEI，%）＝

100×（實(shí)測(cè)值－理論值）／理論值［15］；組合效應(yīng)綜合指數(shù)（MFAEI，%）＝∑SFAEI＝

式中：實(shí)測(cè)值為實(shí)際測(cè)量的值；理論值＝SE測(cè)定值×SE比例（%）＋RS測(cè)定值×RS比例（%）。

1．5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

基本處理采用Excel軟件，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 18．0軟件中compare mean 的one?way ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析，對(duì)產(chǎn)氣量、產(chǎn)氣參數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行有重復(fù)單因素方差分析，對(duì)組合效應(yīng)值進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2　結(jié) 果

2．1 不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)72 h體外發(fā)酵產(chǎn)氣參數(shù)的影響

由表2可知，SE100組的理論最大產(chǎn)氣量顯著高于其他組（P＜0．05），各底物發(fā)酵后，SE0組的理論最大產(chǎn)氣量是最低的。SE80組在24和72 h的累積產(chǎn)氣量顯著大于其他組（P＜0．05）。SE80、SE60、SE40組達(dá)1／2理論最大產(chǎn)氣量的時(shí)間差異不顯著（P＞0．05），SE80和SE60組顯著大于SE20組（P＜0．05）。24 h累積產(chǎn)氣量為SE80組＞SE100組＞SE40組＞SE60組＞SE20組＞SE0組，72 h累積產(chǎn)氣量為SE80組＞SE100組＞SE60組＞SE20組＞SE40組＞SE0組，組間差異均顯著（P＜0．05）。

2．2 不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)24 h體外發(fā)酵特性的影響

由表3可知，不同比例蠶沙和稻秸組合在體外培養(yǎng)過程中對(duì)TVFA濃度呈現(xiàn)先上升后下降又上升的趨勢(shì)，在9、12 h時(shí)各發(fā)酵底物組均出現(xiàn)下降趨勢(shì)。24 h時(shí)培養(yǎng)液TVFA濃度為SE80組＞SE100組＞SE60組＞SE40組＞SE0組＞SE20組，SE40組與SE60組差異不顯著（P＞0．05），SE0組與SE20組差異不顯著（P＞0．05），其余各組間差異均顯著（P＜0．05）。培養(yǎng)液乙酸／丙酸隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)先下降后上升又下降的趨勢(shì)。在24 h時(shí)，乙酸／丙酸為SE80組＜SE40組＜SE20組＜SE60組＜SE0組＜SE100組，組間沒有顯著差異（P＞0．05），且都低于12 h時(shí)的乙酸／丙酸。

表2　不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)72 h體外發(fā)酵產(chǎn)氣參數(shù)的影響Table 2 Effects of different combination ratios of SE and RS on gas production parameters of 72 h in vitro fermentation

由表4可知，整體的MCP濃度動(dòng)態(tài)趨勢(shì)是先上升后下降的。在9 h時(shí)，SE100、SE40和SE60組的MCP濃度較高，顯著高于SE20和SE0組（P＜0．05）。在24 h時(shí)，SE20組＞SE100組＞SE60組＞SE80組＞SE40組＞SE0組，但是除SE0組與各組差異顯著（P＜0．05）外，其他組間均差異不顯著（P＞0．05）。

2．3 不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)24 h體外發(fā)酵IVDOM的影響

由表5可知，隨著蠶沙比例的升高，IVDOM升高，并且SE80和SE100組在除9 h外的各時(shí)間點(diǎn)的IVDOM沒有顯著差異（P＞0．05），說明蠶沙在培養(yǎng)液中發(fā)酵效果很好，瘤胃微生物的活力強(qiáng)，蠶沙和稻秸的組合效應(yīng)增加了IVDOM。

表3　不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)24 h體外發(fā)酵VFA濃度的影響Table 3 Effects of different combination ratios of SE and RS on VFA concentration of 24 h in vitro fermentation

表4　不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)24 h體外發(fā)酵MCP濃度的影響Table 4 Effects of different combination ratios of SE and RS on MCP concentration of 24 h in vitro fermentation　mg／mL

表5　不同比例蠶沙和稻秸組合對(duì)24 h體外發(fā)酵IVDOM的影響Table 5 Effects of different combination ratios of SE and RS on IVDOM of 24 h in vitro fermentation　%

2．4 不同比例蠶沙和稻秸的組合效應(yīng)指數(shù)

由表6可知，蠶沙和稻秸組合在瘤胃微生物體外發(fā)酵過程中都發(fā)生了正組合效應(yīng)，特別蠶沙比例達(dá)到80%時(shí)。SE60組與SE40組的MFAEI接近，且SE80組＞SE40組＞SE60組。

表6　不同比例蠶沙和稻秸的組合效應(yīng)指數(shù)（24 h）Table 6 Associative effect indexes of different ratios of SE and RS（24 h）

3　討 論

3．1 蠶沙和稻秸組合對(duì)培養(yǎng)液產(chǎn)氣量的影響

飼糧中所含有的可發(fā)酵有機(jī)物含量越高，微生物活性越大，產(chǎn)氣量就會(huì)越高。達(dá)1／2理論最大產(chǎn)氣量的時(shí)間與微生物產(chǎn)量最大時(shí)的時(shí)間相近。本試驗(yàn)中，蠶沙的比例越高，達(dá)1／2理論最大產(chǎn)氣量的時(shí)間越長(zhǎng)，理論最大產(chǎn)氣量越高，24和72 h的CP SE80組顯著大于其他各組。碳水化合物及CP作為底物發(fā)酵時(shí)的主要產(chǎn)氣來源物質(zhì)，直接影響著底物在體外培養(yǎng)時(shí)的產(chǎn)氣發(fā)酵特性。郭春華等［1］研究表明，蠶沙CP瘤胃有效降解率為45．47%，低于秸稈類飼料，而粗纖維的有效降解率為36．05%，高于秸稈類飼料。說明蠶沙給稻秸提供了足夠的碳源、氮源和一些必需的礦物質(zhì)元素，促進(jìn)了瘤胃發(fā)酵?；旌巷暭Z中易發(fā)酵的營養(yǎng)成分和不易發(fā)酵的結(jié)構(gòu)性碳水化合物的比例比單一飼料合理，因而更容易被瘤胃微生物利用，更適合微生物的生長(zhǎng)。

3．2 蠶沙和稻秸組合對(duì)培養(yǎng)液VFA含量的影響

李兵［16］研究表明，隨著尿素氨化處理水平的提高，TVFA濃度增加，說明氨化處理對(duì)稻草的微生物發(fā)酵是有益的，氨化處理能夠提高稻草的CP含量，提高了稻秸消化率，丙酸是反芻動(dòng)物體內(nèi)主要的生糖物質(zhì)，促進(jìn)丙酸生成有利于提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)中，隨著蠶沙比例的提高，TV?FA濃度都呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，乙酸／丙酸隨時(shí)間的增加也有減小趨勢(shì)，蠶沙CP含量為16．80%，NDF含量為34．30%，ADF含量為17．60%（表1），說明蠶沙中可消化碳水化合物含量較高，微生物活性較大，從而TVFA濃度較高。這也與張倩等［17］和劉大程等［18］的試驗(yàn)結(jié)果一致。

3．3 蠶沙和稻秸組合對(duì)培養(yǎng)液MCP濃度的影響

MCP是反芻動(dòng)物最主要的氮源供應(yīng)者。當(dāng)瘤胃中氨和能量不同步釋放，可導(dǎo)致可發(fā)酵底物利用率下降和MCP合成量減少［19］。MCP濃度不僅能間接地反映出微生物種群的數(shù)量，還能體現(xiàn)培養(yǎng)體系中微生物利用NH3?N的能力。各組發(fā)酵24 h的MCP濃度相對(duì)于發(fā)酵12 h的MCP濃度減少，原因可能是本試驗(yàn)發(fā)酵底物只是單純的粗飼料組合，這些底物的可發(fā)酵碳水化合物偏少，限制了微生物的活性和對(duì)NH3?N的攝取和轉(zhuǎn)化。這與李袁飛等［20］的結(jié)果一致。

3．4 蠶沙和稻秸的組合效應(yīng)

Menke等［21］提出體外發(fā)酵氣體產(chǎn)量同IV?DOM高度相關(guān)，即產(chǎn)氣量越高，飼料在瘤胃內(nèi)的發(fā)酵程度越高。本試驗(yàn)中，稻秸的IVDOM很低，但隨著蠶沙比例的提高，組合飼草的IVDOM越高，產(chǎn)氣量也隨著增大，但是24和72 h的累積產(chǎn)氣量為SE80組＞SE100組，說明蠶沙和稻秸存在正組合組合效應(yīng)。盧德勛［22］提出用MFAEI將人工瘤胃產(chǎn)氣各時(shí)間點(diǎn)所測(cè)得各項(xiàng)指標(biāo)綜合后評(píng)定飼料間的組合效應(yīng)。因此本試驗(yàn)綜合考慮累積產(chǎn)氣量、IVDOM、MCP、VFA幾個(gè)因素。對(duì)蠶沙和稻秸組合進(jìn)行體外發(fā)酵篩選，得出MFAEI，試驗(yàn)的最優(yōu)組合為SE80組。

4　結(jié) 論

通過對(duì)蠶沙和稻秸組合效應(yīng)的研究，二者組合改善了體外瘤胃微生物發(fā)酵特性和產(chǎn)氣參數(shù)，且蠶沙和稻秸的最佳比例為80∶20。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 郭春華，柏雪，黃艷玲，等．蠶沙對(duì)樂至黑山羊日糧干物質(zhì)、能量和蛋白質(zhì)消化代謝的影響［J］．西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，24（3）：1144－1148．

［2］ 張子儀．中國飼料學(xué)［M］．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000：289－290．

［3］ TAN N D，WANAPAT M，URIYAPONGSON S，et al．Enhancing mulberry leaf meal with urea by pelleting to improve rumen fermentation in cattle［J］．Asian?Australasian Journal of Animal Sciences，2012，25 （4）：452－461．

［4］ HADDAD S G．Associative effects of supplementing barley straw diets with alfalfa hay on rumen environ?ment and nutrient intake and digestibility for ewes［J］．Animal Feed Science and Technology，2000，87（3／4）：163－171．

［5］ PRETON T R．Associated effects and interactions a?mong feed ingredients［C］／／SANSOUCY R，PRES?TON T R，LENG R A．Proceedings of the FAO expert consultation on the substitution of imported concen?trate feeds in animal production systems in developing countries．Bangkok：FAO Regional Office for Asia and the Pacific，1987：142－146．

［6］ 郭春華，黃艷玲，馬力，等．蠶沙替代精料對(duì)樂至黑山羊生長(zhǎng)性能的影響［J］．中國飼料，2010（16）：21－23．

［7］ 田斌，關(guān)偉偉，楊文劍，等．利用蠶沙替代精料飼養(yǎng)山羊育肥試驗(yàn)［J］．畜禽業(yè)，2008，（4）：31－32．

［8］ 尹永志，郭春華，黃艷玲，等．蠶沙對(duì)新西蘭兔生產(chǎn)性能、屠宰性能及臟體比值的影響［J］．中國飼料，2010（20）：23－25．

［9］ 楊紅建，宋正河，祝仕平，等．一種發(fā)酵微量氣體產(chǎn)生量數(shù)據(jù)自動(dòng)采集存儲(chǔ)裝置及方法：中國，ZL200610011301．X［P］．2007－12－19．

［10］ 鄧露芳，王加啟，姜艷美，等．納豆芽孢桿菌對(duì)瘤胃微生物發(fā)酵的影響［J］．畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008，39（8）：1062－1068．

［11］ YANG H J，TAMMINGA S，WILLIAMS B A，et al．In vitro gas and volatile fatty acids production profiles of barley and maize and their soluble and washout fractions after feed processing［J］．Animal Feed Sci?ence and Technology，2005，120（1／2）：125－140．

［12］ WANG M Z，WANG H R，LI G X，et al．Effects of limiting amino acids on rumen fermentation and mi?crobial community in vitro［J］．Agricultural Sciences in China，2008，7（12）：1524－1531．

［13］ KHORASANI G R，OKINE E K，KENNELLY J J．Forage source alters nutrient supply to the intestine without influencing milk yield［J］．Journal of Dairy Science，1996，79（5）：862－872．

［14］ 劉潔，刁其玉，屠焰，等．肉用綿羊飼料有機(jī)物體外消化率預(yù)測(cè)模型的研究［C］／／中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)羊?qū)W分會(huì)2012全國養(yǎng)羊生產(chǎn)與學(xué)術(shù)研討會(huì)議論文集．橫山：中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)，2012．

［15］ 閆偉杰．餅粕蛋白與羊草NDF／玉米淀粉混合料的組合效應(yīng)研究［D］．碩士學(xué)位論文．杭州：浙江大學(xué)，2005：23－27．

［16］ 李兵．不同尿素水平氨化稻草堆體外發(fā)酵產(chǎn)氣量和甲烷產(chǎn)量的影響［D］．碩士學(xué)位論文．北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011：33－35．

［17］ 張倩，夏建民，李勝利，等．不同比例壓塊秸稈與羊草組成粗飼料對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵和生產(chǎn)性能的影響［J］．動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2010，22（2）：474－480．

［18］ 劉大程，盧德勛，侯先志，等．不同品質(zhì)粗飼料日糧對(duì)瘤胃發(fā)酵及主要纖維分解菌的影響［J］．中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，41（4）：1199－1206．

［19］ 馬慧，苗樹君，劉君．反芻動(dòng)物日糧正組合效應(yīng)的調(diào)控及優(yōu)化配制［J］．黃牛雜志，2005，31（6）：47－50．

［20］ 李袁飛，郝建祥，馬艷艷，等．體外瘤胃發(fā)酵法評(píng)定不同類型飼料的營養(yǎng)價(jià)值［J］．動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（10）：2403－2413．

［21］ MENKE K H，STEINGASS H．Estimation of the ener?getic feed value obtained from chemical analysis and in vitro gas production using rumen fluid［J］．Animal Research and Development，1988，28：7－55．

［22］ 盧德勛．系統(tǒng)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)導(dǎo)論［M］．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004．

（編輯 王智航）

Associative Effects of Different Combination Ratios of Silkworm Excrement and Rice Straw on the Rumen Microbial Fermentation in Vitro

SUN Lisa LI Huawei CUI Huihui ZHAO Rui WANG Mengzhi YU Lihuai WANG Hongrong?（College of Animal Science and Technology，University of Yangzhou，Yangzhou 225009，China）

?Coressoponging author，professor，E?mail：hrwang＠yzu．edu．cn

Abstract：In vitro fermentation was conducted to investigate associative effects of different combination ratios of silkworm excrement（SE）and rice straw（RS）．SE and RS were mixed at the ratios of 100∶0（SE100 group），80∶20（SE80 group），60∶40（SE60 group），40∶60（SE40 group），20∶80（SE20 group）and 0∶100 （SE0 group），respectively．The mixtures were incubated in vitro for 24 hours for a batched in vitro fermenta?tion test and 72 hours for an in vitro fermentation gas production test．Gas production parameters and fermenta?tion characteristics were determined．The results showed as follows：1）theological maximum gas production in SE100 group was significantly higher than that of the other groups（P＜0．05），and accumulated gas production of SE80 group was significantly higher than that of the other groups（P＜0．05）．2）Total volatile fatty acid concentration in culture medium at 24 hours showed SE80 group＞SE100 group＞SE60 group＞SE40 group＞SE0 group＞SE20 group，and acetate／propionate showed SE80 group＜SE40 group＜SE20 group＜SE60 group＜SE0 group＜SE100 group．3）Microbial protein concentration in culture medium at 24 hours showed SE20 group＞SE100 group＞SE60 group＞SE80 group＞SE40 group＞SE0 group．4）With the increasing of SE ratio，in vitro digestion rate of organic matter of substrate was increased．5）Multiply factor associative effect index of SE80 group was 0．76，and showed SE80 group＞SE40 group＞SE60 group＞SE20 group．In conclusion，the combina?tion of SE and RS can improve in vitro fermentation characteristics and gas production parameters，and the op?timal ratio of SE and RS is 80∶20．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（1）：313?319］

Key words：silkworm excrement；rice straw；in vitro fermentation；associative effect

通信作者：?王洪榮，教授，博士生導(dǎo)師，E?mail：hrwang＠yzu．edu．cn

作者簡(jiǎn)介：孫麗莎（1989—），女，河南商丘人，碩士研究生，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物營養(yǎng)代謝與調(diào)控。E?mail：106351286985＠qq．com

基金項(xiàng)目：國家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)“南方地區(qū)肉羊育肥與高品質(zhì)肉生產(chǎn)技術(shù)研究”（201303144）；揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)優(yōu)勢(shì)學(xué)科專項(xiàng)；江蘇省科技支撐計(jì)劃（BE2013393）

收稿日期：2014－07－21

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．01．038

文章編號(hào)：1006?267X（2015）01?0313?07

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：S816