T?2毒素對(duì)BALB／c小鼠生長性能、血液指標(biāo)和抗氧化能力的影響

陳慧英楊俊花羅愛瓊郭文博韓 薇趙志輝?（1．上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海01306；．上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，上海01403）

T?2毒素對(duì)BALB／c小鼠生長性能、血液指標(biāo)和抗氧化能力的影響

陳慧英1，2楊俊花2羅愛瓊2郭文博1，2韓 薇2趙志輝2?
（1．上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海201306；2．上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，上海201403）

摘 要：本試驗(yàn)旨在研究T?2毒素對(duì)BALB／c小鼠生長性能、血常規(guī)指標(biāo)、血清生化指標(biāo)和肝臟抗氧化能力的影響。選用平均體重約為20 g的BALB／c小鼠80只，隨機(jī)分成4個(gè)組，每個(gè)組20個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只小鼠。4個(gè)組分別為對(duì)照組和3個(gè)不同T?2毒素劑量組，即0．4、1．0和2．5 mg／kg BW組，連續(xù)灌服28 d。結(jié)果表明，2．5 mg／kg BW組小鼠死亡率達(dá)25%，平均日增重和平均日采食量極顯著降低（P＜0．01），心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和大腦的臟器系數(shù)顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），睪丸、精囊腺、子宮和卵巢等生殖系統(tǒng)臟器系數(shù)顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）。與對(duì)照組相比，0．4和1．0 mg／kg BW組肝臟臟器系數(shù)極顯著增加（P＜0．01），白細(xì)胞（WBC）、淋巴細(xì)胞（LY）、單核細(xì)胞（MO）、中性粒細(xì)胞（GR）數(shù)量均顯著或極顯著增高（P＜0．05或P＜0．01）。與對(duì)照組相比，2．5 mg／kg BW組MO、GR、血小板（PLT）數(shù)量極顯著增高（P＜0．01），但紅細(xì)胞數(shù)量（RBC）和血紅蛋白（HGB）含量顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）。血清生化指標(biāo)顯示，隨T?2毒素劑量的增加，葡萄糖（GLU）、尿素（urea）、肌酐（CRE）含量和堿性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性呈增加趨勢(shì)，但甘油三酯（TG）和白蛋白（ALB）含量呈降低趨勢(shì)，與對(duì)照組相比均差異顯著或極顯著（P＜0．05或P＜0．01）。隨T?2毒素劑量的增加，小鼠肝臟組織中丙二醛（MDA）含量呈增加趨勢(shì)，超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH?Px）活性呈降低趨勢(shì)。由此可知，T?2毒素劑量在低于1．0 mg／kg BW時(shí)對(duì)BALB／c小鼠具有免疫刺激作用，高劑量的T?2毒素抑制動(dòng)物生長性能、引起肝臟和腎臟組織損傷、對(duì)肝臟的抗氧化能力也具有顯著的抑制作用，呈劑量效應(yīng)關(guān)系。

關(guān)鍵詞：T?2毒素；生長性能；血常規(guī)指標(biāo)；血清生化指標(biāo)；抗氧化

T?2毒素是一種由梨孢鐮刀菌（F．poae）、三線鐮刀菌（F．tricinctum）、擬枝孢鐮刀菌（F．sporo?tricoides）等在特定條件下產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物，是A類單端孢霉烯族毒素的重要代表。在自然界分布廣泛，是常見污染玉米、麥類等田間作物和庫存谷物的主要真菌毒素之一［1］。在單端孢霉烯族毒素中，T?2毒素是毒性最強(qiáng)的一種，人畜誤食被污染的食品或飼料，會(huì)影響血液、肝臟、腎臟、胰腺、肌肉及淋巴細(xì)胞（LY）等的功能［2］。臨床癥狀表現(xiàn)為厭食、嘔吐、腹瀉、生長停滯、繁殖和神經(jīng)機(jī)能障礙［3］。姜昕等［4］指出T?2毒素能使大鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）活性等血清生化指標(biāo)上升。Chaudhary等［5］發(fā)現(xiàn)T?2毒素引起小鼠的大腦損傷，發(fā)生脂質(zhì)過氧化。但目前我國關(guān)于T?2毒素的基礎(chǔ)毒理學(xué)數(shù)據(jù)研究較少。因此，本試驗(yàn)采用T?2毒素標(biāo)準(zhǔn)品，觀察不同劑量T?2毒素對(duì)BALB／c小鼠平均日增重、平均日采食量、臟器系數(shù)、血常規(guī)指標(biāo)、血清生化指標(biāo)以及對(duì)肝臟組織抗氧化能力的影響，旨在填補(bǔ)我國T?2毒素毒理學(xué)基礎(chǔ)研究的空白，為T?2毒素其他毒性作用機(jī)制的深入研究和畜禽生產(chǎn)中真菌毒素污染防控提供數(shù)據(jù)參考和理論依據(jù)。

1　材料與方法

1．1 材料與儀器

T?2毒素標(biāo)準(zhǔn)品：粉末狀，純度≥99%（Pribo?lab，Singapore），購于北京普華仁生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

BCA Protein Assay Kit（Pierce，美國），丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒、過氧化氫酶（cat?alase，CAT）試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH?Px）試劑盒均購于南京建成生物工程研究所，總膽固醇（total cholester?ol，T?CHO）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high?density lipoprotein cholesterol，HDLC）、低密度脂蛋白膽固醇（low?density lipo?protein cholesterol，LDLC）試劑盒購于北京北化康泰臨床試劑有限公司，其他常規(guī)試劑均為分析純。

Sorvall高速離心機(jī)（Thermo，德國），AU5800全自動(dòng)血液生化分析儀（Beckman Coulter，美國），HB系列全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，酶標(biāo)儀（Thermo，德國），數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）等。

1．2 動(dòng)物飼養(yǎng)管理

BALB／c小鼠80只，6周齡，體重18～22 g，清潔級(jí)，高壓滅菌的小鼠顆粒飼糧，均購自復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部。室溫維持（23±2）℃，相對(duì)濕度為40%～70%，光照周期12 h，自由飲水、采食，預(yù)飼7 d。

1．3 試驗(yàn)方法

1．3．1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將80只BALB／c小鼠隨機(jī)分成4組，每組20個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，公母各占1／2，分籠飼養(yǎng)。試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)參考T?2毒素的半數(shù)致死量（LD50，5～10 mg／kg BW）以及Kravchenko等［6］和Schuh?macher?Wolz等［7］的報(bào)道，在預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，4個(gè)組小鼠分別灌服T?2毒素劑量為0（對(duì)照，灌胃滅菌生理鹽水）、0．4、1．0和2．5 mg／kg BW，每只小鼠每次灌胃0．01 mL／g BW，試驗(yàn)持續(xù)28 d。

1．3．2 臨床觀察和平均日增重、平均日采食量統(tǒng)計(jì)

每日觀察小鼠臨床癥狀，詳細(xì)記錄采食、飲水、中毒癥狀及死亡情況，每周稱重。計(jì)算平均日增重和平均日采食量。

1．3．3 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束后，小鼠脫頸處死。處死前摘眼球采血，一部分血液收集于含乙二胺四乙酸二鉀（EDTA?2K）抗凝劑的EP管，30 min內(nèi)進(jìn)行血常規(guī)檢查；另一部分血液收集于不含抗凝劑的EP管，待血液完全凝固后，3 000 r／min離心15 min，收集上層血清，－20℃保存，用于生化指標(biāo)檢測(cè)。解剖觀察各臟器病變，手術(shù)分離心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、大腦、睪丸、精囊腺、子宮、卵巢組織，分別稱重并計(jì)算臟器系數(shù)。

臟器系數(shù)（%）＝（臟器質(zhì)量／體質(zhì)量）×100。

分離部分肝臟，準(zhǔn)確稱重，按1∶9（W／V）的比例加入預(yù)冷生理鹽水制成10%的勻漿，2 000 r／min離心15 min取上清。按照試劑盒說明方法測(cè)定肝臟組織中MDA含量和CAT、SOD、GSH?Px活性。

1．3．4 血常規(guī)檢查

采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢查：白細(xì)胞（WBC）、LY、單核細(xì)胞（MO）、中性粒細(xì)胞（GR）、紅細(xì)胞數(shù)量（RBC），LY、MO、GR百分比，血紅蛋白（HGB）含量，紅細(xì)胞壓積（HCT），紅細(xì)胞平均體積（MCV），平均血紅蛋白含量（MCH），平均血紅蛋白濃度（MCHC），紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW?CV），紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW?SD），血小板（PLT）數(shù)量，血小板平均體積（MPV），血小板分布寬度（PDW），血小板壓積（PCT）。

1．3．5 血清生化指標(biāo)分析

采用全自動(dòng)血液生化分析儀對(duì)以下血清指標(biāo)進(jìn)行分析：堿性磷酸酶（ALP）、ALT、AST活性，白蛋白（ALB）、葡萄糖（GLU）、總膽紅素（TBLI）、總蛋白（TP）、尿素（urea）、肌酐（CRE）含量。

血清T?CHO、TG、HDLC、LDLC含量檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附方法（ELISA）按照試劑盒說明進(jìn)行。

1．4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。差異顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析（one?way ANOVA），LSD進(jìn)行多重比較，P＜0．05為差異顯著，P＜0．01為差異極顯著，所有結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2　結(jié)果與分析

2．1 臨床觀察

隨著T?2毒素劑量的增加，小鼠出現(xiàn)不同程度地活動(dòng)減少、蜷縮一角、趴臥不動(dòng)、運(yùn)步失調(diào)、背毛不整、反應(yīng)遲鈍等癥狀，1．0 mg／kg BW組2只母鼠發(fā)生偏癱。此外，1．0、2．5 mg／kg BW組小鼠鼻黏膜和眼結(jié)膜出現(xiàn)不同程度的干燥、紅腫及脫痂現(xiàn)象。同時(shí)，試驗(yàn)持續(xù)20 d后，1．0 mg／kg BW組公鼠死亡1只；2．5 mg／kg BW組公鼠死亡4只、母鼠死亡1只，死亡率為25%。剖解死亡小鼠發(fā)現(xiàn)，2．5 mg／kg BW組脾臟明顯腫大。

2．2 T?2毒素對(duì)小鼠生長性能的影響

由表1可見，與對(duì)照組相比，0．4和1．0 mg／kg BW組小鼠平均日增重和平均日采食量沒有顯著變化（P＞0．05）。2．5 mg／kg BW組小鼠平均日增重和平均日采食量卻極顯著低于前3組（P＜0．01）。

表1　T?2毒素對(duì)小鼠平均日增重和平均日采食量的影響Table 1 Effects of T?2 toxin on ADG and ADFI in mice　g

由表2可見，2．5 mg／kg BW組的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟的臟器系數(shù)分別極顯著高于對(duì)照、0．4和1．0 mg／kg BW組（P＜0．01）。肝臟臟器系數(shù)隨T?2毒素劑量的增加極顯著增大（P＜0．01）。2．5 mg／kg BW組大腦的臟器系數(shù)顯著高于0．4和1．0 mg／kg BW組（P＜0．05），極顯著高于對(duì)照組（P＜0．01）。1．0和2．5 mg／kg BW組睪丸臟器系數(shù)均極顯著低于對(duì)照組（P＜0．01）。與對(duì)照組相比，1．0和2．5 mg／kg BW組精囊腺臟器系數(shù)分別顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01），2．5 mg／kg BW組還極顯著低于0．4 mg／kg BW組（P＜0．01）。此外，2．5 mg／kg BW組的子宮和卵巢臟器系數(shù)分別極顯著低于對(duì)照和0．4 mg／kg BW組（P＜0．01），1．0 mg／kg BW組也顯著低于對(duì)照組（P＜0．05）。

2．3 T?2毒素對(duì)小鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響

由表3可見，與對(duì)照組相比較，0．4 mg／kg BW組的WBC、LY、MO、GR數(shù)量，LY、MO、GR百分比，HGB含量，MPV均顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），PLT數(shù)量極顯著降低（P＜0．01）；1．0 mg／kg BW組的WBC、LY、MO、GR數(shù)量，LY、MO、GR百分比均顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01）；2．5 mg／kg BW組的MO、GR、PLT數(shù)量，MO、GR百分比，MCV，PCT均顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），RBC、HGB含量顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）。與0．4 mg／kg BW組相比，2．5 mg／kg BW組的PLT數(shù)量、MCV、PCT有顯著或極顯著升高（P＜0．05或P＜0．01），WBC、LY、MO數(shù)量，LY百分比，RBC，HGB含量，MCHC，MPV均顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）。此外，與1．0 mg／kg BW組相比，2．5 mg／kg BW組的PLT數(shù)量、MCV、PCT均顯著或極顯著升高（P＜0．05或P＜0．01），而WBC、LY、MO數(shù)量，LY百分比，RBC，HGB含量，MCHC顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）。其他血常規(guī)指標(biāo)沒有顯著變化（P＞0．05）。

表2　T?2毒素對(duì)小鼠臟器系數(shù)的影響Table 2 Effects of T?2 toxin on organ coefficient in mice　%

表3　T?2毒素對(duì)小鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響Table 3 Effects of T?2 toxin on blood routine examination in mice

2．4 T?2毒素對(duì)小鼠血清生化指標(biāo)的影響

由表4可見，與對(duì)照組相比，0．4 mg／kg BW組的TG、GLU含量和ALP、ALT活性分別顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），TP含量極顯著降低（P＜0．01）；1．0 mg／kg BW組的GLU、urea含量和ALT、ALP活性顯著或極顯著增加（P＜0．05 或P＜0．01），T?CHO、ALB、TP含量顯著或極顯著減少（P＜0．05或P＜0．01）；2．5 mg／kg BW組的HDLC、LDLC、GLU、urea、CRE含量和ALP、ALT活性極顯著增加（P＜0．01），TG、ALB、TP含量極顯著降低（P＜0．01）。與0．4 mg／kg BW組相比，1．0 mg／kg BW組的LDLC、GLU、urea含量顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），TG含量極顯著降低（P＜0．01）；2．5 mg／kg BW組的HDLC、LDLC、GLU、TBLI、urea、CRE含量和ALP、ALT活性極顯著增加（P＜0．01），TG、ALB、TP含量極顯著降低（P＜0．01）。此外，與1．0 mg／kg BW組相比，2．5 mg／kg BW組的T?CHO、HDLC、LDLC、 TBLI、urea、CRE含量和ALP、ALT活性顯著或極顯著增加（P＜0．05或P＜0．01），TG、ALB、TP含量極顯著降低（P＜0．01）。

表4　T?2毒素對(duì)小鼠血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of T?2 toxin on serum biochemical indexes in mice

2．5 T?2毒素對(duì)小鼠肝臟組織抗氧化能力的影響

由表5可見，與對(duì)照組相比，T?2毒素極顯著增加肝臟中MDA含量（P＜0．01），2．5 mg／kg BW組的MDA含量還顯著高于0．4 mg／kg BW組（P＜0．05）。隨著T?2毒素劑量的增加，SOD、CAT、GSH?Px活性均呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。其中，1．0和 2．5 mg／kg BW組的SOD活性均顯著低于對(duì)照組（P＜0．05）。與對(duì)照和0．4 mg／kg BW組相比，1．0 和2．5 mg／kg BW組GSH?Px活性顯著或極顯著降低（P＜0．05或P＜0．01）；此外，2．5 mg／kg BW組的GSH?Px活性還極顯著低于1．0 mg／kg BW組（P＜0．01）。

表5　T?2毒素對(duì)小鼠肝臟組織抗氧化能力的影響Table 5 Effects of T?2 toxin on liver antioxidant ability in mice

3　討 論

3．1 T?2毒素對(duì)小鼠臨床癥狀、生長性能的影響

不同劑量藥物刺激動(dòng)物后，都會(huì)通過臨床癥狀、體重、采食量的變化來反映其對(duì)生長性能的影響，臟器系數(shù)則常用于判斷藥物對(duì)不同臟器的毒性大?。?］。試驗(yàn)中，不同劑量的T?2毒素處理對(duì)BLAB／c小鼠產(chǎn)生不同程度的毒性作用。灌毒小鼠背毛不整，行動(dòng)緩慢，反應(yīng)遲鈍，且2．5 mg／kg BW組的死亡率為25%。1．0 mg／kgBW組母鼠出現(xiàn)偏癱可能跟T?2毒素的神經(jīng)毒性有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中加入T?2毒素2～21 mg／kg BW后，大鼠腦組織中神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)的含量有變化［9］。

本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，BALB／c小鼠連續(xù)灌服2．5 mg／kg BW T?2毒素，平均日采食量和平均日增重極顯著降低。McKean等［10］給Fisher 344大鼠分別灌服1．00、2．15和4．64 mg／kg BW的T?2毒素，2．15 mg／kg BW組未見死亡，但出現(xiàn)厭食現(xiàn)象，采食量也下降。Marasas等［11］研究發(fā)現(xiàn)，大鼠連續(xù)19 d灌服0．75 mg／kg BW的T?2毒素，體重明顯降低，連續(xù)3周攝入0．25 mg／kg BW還抑制生長。結(jié)果表明T?2毒素對(duì)小鼠的生長性能有一定的抑制作用，并且與添加劑量相關(guān)。

本試驗(yàn)中，2．5 mg／kg BW組BALB／c小鼠的心臟、脾臟、肺臟、大腦的臟器系數(shù)均有增加，肝臟的臟器系數(shù)隨劑量的增加而有升高趨勢(shì)，這表明T?2毒素對(duì)不同組織均有損傷，而肝臟和腎臟的臟器系數(shù)隨劑量增加的變化尤為明顯，這表明T?2毒素對(duì)肝臟和腎臟的損傷較為嚴(yán)重。文獻(xiàn)報(bào)道稱，T?2毒素能引起肝臟細(xì)胞壞死和脂肪變性［12－13］，可致肝細(xì)胞［14］和人腎近曲小管上皮細(xì)胞［15］通過氧化應(yīng)激線粒體途徑發(fā)生凋亡，表明肝臟和腎臟是T?2毒素的主要靶器官［16］。此外，灌胃T?2毒素公鼠的睪丸、精囊腺臟器系數(shù)和雌鼠的子宮、卵巢臟器系數(shù)均比對(duì)照組低，表明T?2毒素對(duì)生殖系統(tǒng)具有毒性作用。有研究發(fā)現(xiàn)T?2毒素對(duì)小鼠睪丸、卵巢均有損傷［17］，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

3．2 T?2毒素對(duì)小鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響

血液在動(dòng)物機(jī)體不斷循環(huán)參與每項(xiàng)代謝活動(dòng)，對(duì)保證機(jī)體的正常新陳代謝、功能調(diào)節(jié)及動(dòng)物體內(nèi)外環(huán)境平衡起著非常重要的作用［18］。本試驗(yàn)中，2．5 mg／kg BW組的WBC、LY數(shù)量顯著減少，脾臟腫脹，表明T?2毒素使LY產(chǎn)生減少、增殖抑制，可能使機(jī)體的免疫系統(tǒng)受到損傷。Denicola等［19］給豚鼠連續(xù)27 d染毒T?2毒素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨髓中WBC和LY數(shù)量減少，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中，2．5 mg／kg BW組的PLT數(shù)量極顯著高于其他各組。此外，RBC、HCT和HGB含量減少，這可能與紅細(xì)胞出現(xiàn)凋亡有關(guān)，從而使HCT發(fā)生變化。Pande等［20］證實(shí)T?2毒素的劑量與HGB含量呈負(fù)相關(guān)，表明T?2毒素能降低HGB含量，可能與T?2毒素抑制蛋白質(zhì)的合成有關(guān)［9］。本試驗(yàn)中，0．4和1．0 mg／kg BW組與對(duì)照組相比，WBC、LY數(shù)量和HGB含量均顯著增加，PLT數(shù)量減少，這表明低劑量T?2毒素可能產(chǎn)生免疫刺激作用。也有研究結(jié)果表明，染毒時(shí)間和劑量不同，T?2毒素可能抑制或刺激免疫作用［10］。

3．3 T?2毒素對(duì)小鼠血清生化指標(biāo)的影響

血脂是血液中各種脂類物質(zhì)的總稱，其中最重要的是T?CHO和TG。本試驗(yàn)中T?2染毒組的T?CHO含量與對(duì)照組比偏低，這可能與本研究中T?2毒素對(duì)肝臟有明顯損傷作用相關(guān)。因?yàn)楦喂δ苁軗p后，肝臟對(duì)T?CHO的合成能力減弱［21］，從而導(dǎo)致T?CHO含量偏低。本試驗(yàn)中高劑量組HDLC和LDLC的含量均顯著增加，而TG的含量顯著降低。膽固醇在血液中以脂蛋白的形式存在，人體血液循環(huán)中的膽固醇主要由LDLC轉(zhuǎn)運(yùn)，能把膽固醇從肝臟運(yùn)送到全身組織，而HDLC則將各組織的膽固醇送回肝臟代謝［22］。Shinozuka等［23］的研究也發(fā)現(xiàn)，給ICR：CD?1小鼠一次灌服10 mg／kg BW的T?2毒素后，結(jié)果顯示血清中T?CHO含量降低。

血清TP和ALB含量一方面反映了機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收、合成和分解狀況，同時(shí)也反映了機(jī)體的免疫機(jī)能狀態(tài)［24］。本試驗(yàn)中，灌胃T?2毒素小鼠血清ALB和TP含量均比對(duì)照組顯著降低，且有劑量依賴性。Gunnar等［25］長期飼喂肉雞T?2毒素，發(fā)現(xiàn)其TP含量顯著低于對(duì)照組。在1日齡雛雞的飼糧中添加T?2毒素，也能造成血清TP和ALB含量減少［26］，這可能與T?2毒素抑制多肽鏈的起始、延長和終止來抑制蛋白質(zhì)的合成作用有關(guān)［9］。此外，本試驗(yàn)中，灌胃T?2毒素小鼠肝功能的另外2個(gè)指標(biāo)ALP和ALT活性均顯著升高。血清CRE和urea含量是在一定程度上反映腎臟腎小球?yàn)V過功能損傷的重要指標(biāo)［27］。本試驗(yàn)中，高劑量灌胃T?2毒素小鼠的CRE和urea含量顯著增加，表明T?2毒素?fù)p傷小鼠腎臟腎小球，使其濾過功能減弱，從而導(dǎo)致CRE和urea在體內(nèi)蓄積，即含量增加。Grizzle等［13］指出飼糧添加T?2毒素處理，鵪鶉血液相關(guān)生化指標(biāo)變化與腎臟損傷結(jié)果一致。GLU是與糖代謝相關(guān)的成分，血液中的糖主要是GLU，糖類在體內(nèi)的代謝主要受酶類的催化和內(nèi)分泌激素的調(diào)節(jié)［28］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，小鼠血清的GLU含量隨T?2毒素劑量的增加而升高，這表明T?2毒素對(duì)小鼠的糖代謝有影響，但其具體機(jī)制還有待進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

3．4 T?2毒素對(duì)小鼠肝臟組織抗氧化能力的影響

肝臟是T?2毒素代謝的主要場(chǎng)所，攝入的T?2毒素大部分會(huì)在肝臟分解代謝，但過量聚集會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性，從而降低代謝酶的活性，抑制蛋白質(zhì)的合成，誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化發(fā)生［29］。MDA含量和CAT、GSH?Px和SOD活性均是反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化物程度的重要指標(biāo)［30］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，灌胃T?2毒素小鼠MDA含量極顯著增加，SOD、CAT、GSH?Px活性均降低，且存在劑量效應(yīng)關(guān)系。Chaudhari等［31］用T?2毒素暴露人宮頸癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，如ROS產(chǎn)生增多、谷胱甘肽（GSH）水平下降并出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化現(xiàn)象，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。還有研究發(fā)現(xiàn)［32］，T?2毒素處理過的大鼠肝臟勻漿中的MDA含量增加，這表明T?2毒素能降低小鼠肝臟組織的抗氧化能力。

4　結(jié) 論

①T?2毒素含量高于1．0 mg／kg BW時(shí)顯著影響B(tài)ALB／c小鼠的生長性能、抑制免疫，但在低于1．0 mg／kg BW時(shí)能刺激WBC和LY增殖，具有免疫促進(jìn)作用。

②2．5 mg／kg BW T?2毒素對(duì)肝臟和腎臟的毒性作用最大，對(duì)生殖系統(tǒng)也有一定的損傷。

③T?2毒素對(duì)小鼠肝臟組織的抗氧化能力有顯著抑制作用，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系。

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（編輯 陳 燕）

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Effects of T?2 Toxin on Growth Performance，Blood Indexes and Antioxidant Ability in BALB／c Mice

CHEN Huiying1，2YANG Junhua2LUO Aiqiong2GUO Wenbo1，2HAN Wei2ZHAO Zhihui2?
（1．College of Food Science and Technology，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306，China；2．Institute for Agri?Food Standards and Testing Technology，Shanghai Academy of Agricultural Sciences，Shanghai 201403，China）

?Corresponding author，professor，E?mail：zhao9912＠hotmail．com

Abstract：This study was conducted to investigate the effects of T?2 toxin on growth performance，blood rou?tine examination，serum biochemical indexes and antioxidant ability of liver in mice．A total of 80 BALB／c mice weighted about 20 g were randomly allotted to 4 groups with 20 replicates per group and 1 mouse per rep?licate．The mice were fed one of the 4 kinds of diets［0（control），0．4，1．0，2．5 mg／kg BW T?2 toxin ex?posed daily via intragastric administration］for 28 days．The results showed as follows：in 2．5 mg／kg BW group，the morality of mice was close to 25%，and average daily gain and average daily feed intake were sig?nificantly decreased（P＜0．01）．However，the organ coefficients of heart，liver，spleen，lung，kidney and brain in 2．5 mg／kg BW group were increased markedly（P＜0．05 or P＜0．01），but those of testis，seminal vesicle，uterus and ovaries were reduced significantly（P＜0．05 or P＜0．01）．Compared with control group，or?gan coefficient of liver and the counts of white blood cell（WBC），lymphocyte（LY），monocytes（MO），neutrophil granulocyte（GR）were significantly increased in 0．4 and 1．0 mg／kg BW groups（P＜0．05 or P＜0．01），respectively．Additionally，compared with control group，the counts of MO，GR and platelet（PLT）in 2．5 mg／kg BW group were significantly increased（P＜0．01），however，red blood count（RBC）and he?moglobin（HGB）content were significantly reduced（P＜0．05 or P＜0．01），respectively．Furthermore，in ser?um biochemical indexes，the contents of glucose（GLU），urea and creatinine（CRE），and the activities of al?kaline phosphatase（ALP）and alanine aminotransferase（ALT）had improved trends with the increase of T?2 toxin dose，but the contents of triglyceride（TG）and albumin（ALB）had reduced trends，and those were sig?nificantly different with those of control group（P＜0．05 or P＜0．01）．In addition，with the increase of T?2 tox?in dose，the content of malondialdehyde（MDA）in liver tissue was also advanced，then the activities of super?oxide dismutase（SOD），catalase（CAT）and glutathione peroxidase（GSH?Px）had decreased trends．It is concluded that the supplementation of T?2 toxin under 1．0 mg／kg BW can induce the immunostimulation．Nev?ertheless，the excessive dose can cause the inhibition of growth performance，induce organ damage of liver and kidney，and reduce the antioxidant ability of liver significantly with dose?effect relationship．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（1）：212?220］

Key words：T?2 toxin；growth performance；blood routine examination；serum biochemical indexes；antioxi?dant

通信作者：?趙志輝，研究員，E?mail：zhao9912＠hotmail．com

作者簡(jiǎn)介：陳慧英（1990—），女，江西吉安人，碩士研究生，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全。E?mail：chenhy33＠hotmail．com

基金項(xiàng)目：真菌毒素對(duì)畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估關(guān)鍵技術(shù)研究［滬農(nóng)科攻字（2013）第3～8號(hào)］；食用農(nóng)產(chǎn)品非法添加物及殘留檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)研究（12DZ0502800）；熱帶水果電子束輻照加工關(guān)鍵技術(shù)及食品安全相關(guān)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)研究（11DZ0502800）

收稿日期：2014－07－24

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．01．026

文章編號(hào)：1006?267X（2015）01?0212?09

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：S859．8