曹祥練, 潘 威, 秦明松
(1.??禑熑~公司, 湖北 襄陽(yáng)441600; 2.玉溪中煙種子公司, 云南 玉溪653100)
種子質(zhì)量[1-2]是種子永恒的話(huà)題。精選分級(jí)[3-5]可以剔除種中混雜物或異品種種子,可以去除不飽滿(mǎn)或劣變的種子,提高種子的精度級(jí)別,進(jìn)而最大限度地提高純度、凈度、發(fā)芽率和種子活力,提高種子質(zhì)量。21世紀(jì)以來(lái),伴隨著種子行業(yè)全球化的進(jìn)程,世界種子貿(mào)易深化,競(jìng)爭(zhēng)愈發(fā)激烈[6-9],對(duì)于商品種子質(zhì)量的要求也越來(lái)越高,實(shí)行種子精選加工已成為種子管理的一種必須手段。傳統(tǒng)的種子精選主要是利用正常種子與雜物、異常霉變種子的質(zhì)量、密度、尺寸、形狀、表面結(jié)構(gòu)、顏色、彈性等物理性質(zhì)的差異對(duì)其進(jìn)行分離,具有操作簡(jiǎn)便、成本較低的特點(diǎn),是種子前期處理普遍采用的方法,比如風(fēng)選、網(wǎng)篩選、水選、窩眼滾筒、螺旋分離機(jī)等等,但這些方法也存在著精度差、自動(dòng)化程度低等無(wú)法克服的缺陷。種子工業(yè)和技術(shù)伴隨著其他專(zhuān)業(yè)技術(shù)的發(fā)展也在飛速變革,研發(fā)高效、精確、無(wú)損、自動(dòng)化的精選分級(jí)技術(shù)來(lái)代替?zhèn)鹘y(tǒng)分選是種子科技領(lǐng)域的一項(xiàng)研究熱點(diǎn)[10-11]。
磁流體密度梯度分選。
種子密度會(huì)因成熟度、飽滿(mǎn)度、含水量等有所差異,磁流體密度分選就是利用這種差異,由磁流體和梯度磁場(chǎng)共同作用的產(chǎn)生的密度梯度液體介質(zhì)對(duì)不同密度種子進(jìn)行分離[12]。磁流體介質(zhì)是磁粉納米顆粒懸浮于水中形成的。當(dāng)無(wú)磁場(chǎng)存在時(shí),磁流體實(shí)際密度與水相當(dāng),為1g/mL,即磁納米顆粒對(duì)水的密度不產(chǎn)生影響。但當(dāng)開(kāi)通電源,電磁鐵存在磁場(chǎng)作用時(shí),由于納米磁性顆粒的存在,液體介質(zhì)的密度會(huì)增大,最大可以達(dá)到20g/mL。且這種密度是有梯度的,因?yàn)榇艌?chǎng)強(qiáng)度隨著距離磁鐵距離的增加而成指數(shù)降低,所以相應(yīng)的磁粉顆粒所受磁場(chǎng)作用降低,磁流體介質(zhì)的密度也會(huì)梯度降低。磁流體的密度計(jì)算公式為:
所需分選的種子加入容器與磁流體接觸后,種子本身不受磁場(chǎng)作用,只受到液體介質(zhì)的浮力,密度小于液體介質(zhì)密度會(huì)懸浮,大于液體介質(zhì)密度仍會(huì)下沉,直到下沉至與其密度相當(dāng)?shù)奈恢脩腋〔粍?dòng)。以這種方式,大量種子可以一次性的被分成多個(gè)密度梯度,不需像傳統(tǒng)密度梯度分選一樣進(jìn)行多次分選,且液體介質(zhì)可以重復(fù)使用,該法可以節(jié)約大量時(shí)間和工作,且其分選效果與傳統(tǒng)液體介質(zhì)多次分選效果相當(dāng)。2011年,Koning等利用密度梯度磁流體對(duì)辣椒、番茄、西紅柿種子進(jìn)行了分級(jí),發(fā)現(xiàn)其分選結(jié)果與傳統(tǒng)液體密度分選結(jié)果相當(dāng),可明顯提高種子質(zhì)量[12]。
2.2.1 電生理特性
介電分選。
電生理特性與種子內(nèi)部品質(zhì)相關(guān),因此利用弱極性非均勻電介質(zhì)的種子在電場(chǎng)中受力不同和種子的物理機(jī)械特性差異可將品質(zhì)不同的種子分選出來(lái)[13]。介電分選的2個(gè)重要參數(shù)是種子電極化力(與種子的介電特性和電場(chǎng)性質(zhì)有關(guān))和重力。以雙繞線(xiàn)圈滾筒式分選為例,滾筒轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),附著在線(xiàn)圈上的種粒由于介電性質(zhì)和物理性質(zhì)的不同而受力不同,導(dǎo)致脫離線(xiàn)圈的角度不同而實(shí)現(xiàn)分選。徐江等發(fā)現(xiàn),滾筒轉(zhuǎn)速為252r/min,電壓在4 000V時(shí),介電分選能夠有效提高水稻種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)等指標(biāo)[14]。
2.2.2 生化特性
代謝揮發(fā)物。
種子儲(chǔ)藏過(guò)程會(huì)產(chǎn)生醛類(lèi)、酮類(lèi)、醇類(lèi)、氮氧化物等揮發(fā)性化合物,而“電子鼻”——?dú)馕吨讣y儀可模仿動(dòng)物嗅覺(jué)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu),感知和識(shí)別這些有機(jī)代謝揮發(fā)氣體,從而被應(yīng)用在種子新陳識(shí)別、活力識(shí)別、病蟲(chóng)害識(shí)別方面,通常由氣敏傳感器陣列、信號(hào)處理系統(tǒng)和模式識(shí)別系統(tǒng)三部分組成。龐林江發(fā)現(xiàn),利用PEN 2型電子鼻,經(jīng)PCA法可成功辨別不同年份的小麥樣品[15]。程紹明等利用電子鼻系統(tǒng),通過(guò)主成分分析、線(xiàn)性判別分析可快速的區(qū)分出發(fā)芽率為0%、70%、80%和90%的四種番茄種子[16]。鄒小波等研制出由厚膜金屬氧化錫氣體傳感器陣列和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)組成電子鼻裝置,其對(duì)霉變小麥、水稻識(shí)別的正確率達(dá)100%,對(duì)霉變玉米的識(shí)別正確率也達(dá)90%以上[17]。
含油率。
玉米、大豆、花生等含油種子的含油率可以作為其甄別選優(yōu)的依據(jù),而低場(chǎng)核磁共振技術(shù)可準(zhǔn)確采集帶氫鍵油脂分子信號(hào),從而快速、準(zhǔn)確檢測(cè)糧食種子含油率,實(shí)現(xiàn)種子的準(zhǔn)確分選。楊培強(qiáng)等[18]發(fā)明了一種含油種子快速分選的核磁共振多通道檢測(cè)系統(tǒng),取樣系統(tǒng)從盛料斗中取出多粒種子樣品,分送至與其對(duì)應(yīng)的并行稱(chēng)重進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)行稱(chēng)重,經(jīng)稱(chēng)重后的種子等距地落入核共振分析儀檢測(cè)線(xiàn)圈中,檢測(cè)過(guò)程中沿垂直于磁場(chǎng)方向脈沖施加一個(gè)梯度磁場(chǎng)給核共振分析儀檢測(cè)線(xiàn)圈,檢測(cè)輸出的信號(hào)為多粒種子的疊加信號(hào),再經(jīng)傅立葉變換將多粒種子的疊加信號(hào)分離,分別得到每粒種子的氫質(zhì)子含量與多套并行稱(chēng)重進(jìn)樣系統(tǒng)中得到的每粒種子的重量,計(jì)算每粒種子的含油率,并將結(jié)果輸送至種子分選系統(tǒng),然后按含油率大小對(duì)種子進(jìn)行分級(jí)。
2.3.1 色選-光電分選
其工作原理是利用種子異色粒對(duì)特定光線(xiàn)的吸收或反射強(qiáng)度不同,通過(guò)光電轉(zhuǎn)換裝置將其光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)并放大,然后對(duì)其電壓值進(jìn)行采摘識(shí)別,最后驅(qū)動(dòng)噴射閥對(duì)異色粒進(jìn)行瞬間噴吹,從而實(shí)現(xiàn)種粒與異色粒的分離,達(dá)到色選目的。目前,市場(chǎng)上光學(xué)系統(tǒng)的核心器件基本上都采用的CCD攝像頭。該法缺點(diǎn)是分辨率很低,同時(shí)它的光學(xué)系統(tǒng)成像質(zhì)量差,光路不能調(diào)整,一致性較差。
2.3.2 近紅外光譜
種子中不同有機(jī)物的特殊官能團(tuán)在近紅外光作用下,會(huì)發(fā)生振動(dòng)能級(jí)的躍遷,吸收特征波長(zhǎng)的光,形成近紅外吸收光譜。因此,可通過(guò)研究種子中水分、蛋白、淀粉、氨基酸、脂肪、胡蘿卜素等含氫基團(tuán)對(duì)近紅外光譜的吸收特性,并結(jié)合化學(xué)計(jì)量法來(lái)快速定性或定量分析種子品種、病害情況、貯藏年份、生活力等,從而實(shí)現(xiàn)種子分選。Peiris等[19]應(yīng)用近紅外光譜技術(shù)測(cè)定單粒小麥攜帶鐮刀菌及嘔吐毒素水平,鑒別率分別達(dá)到98.8%和99.8%。耿立格等[20]采集了不同年限的大豆品種子近紅外光譜,建立其生活力的無(wú)損測(cè)定校正模型,校正集的決定系數(shù)可達(dá)0.937,驗(yàn)證集決定系數(shù)可達(dá)0.902。于燕波等[21]運(yùn)用近紅外漫反射技術(shù)預(yù)測(cè)棉籽含油量,對(duì)未知樣本進(jìn)行檢驗(yàn),檢驗(yàn)集相關(guān)系數(shù)高達(dá)0.98,他們還通過(guò)PPF-PCA方法建立了高油棉籽分類(lèi)投影近紅外模型,模型對(duì)高、中、低三類(lèi)含油量不等的樣品識(shí)別正確率高達(dá)95%,可實(shí)現(xiàn)高油棉籽準(zhǔn)確篩選。
2.3.3 x-ray 成 像
x-ray的短波長(zhǎng)的輻射可以滲透種子大部分的有機(jī)體,造影后就可無(wú)損評(píng)價(jià)種子內(nèi)在的形態(tài)完整性[22-23],尤其是胚、胚乳的形態(tài),因此,可根據(jù)x 射線(xiàn)造影圖像顯示種子內(nèi)部形態(tài)差異進(jìn)行選種。該法已廣泛應(yīng)用在林木種質(zhì)量檢測(cè)上。史鋒厚等利用軟x射線(xiàn)攝影術(shù)與水襯比結(jié)合進(jìn)行南京椴選種[24],從圖像中可準(zhǔn)確辨別飽滿(mǎn)、發(fā)育不完全和空粒種子,精選后種子飽滿(mǎn)度可達(dá)85%以上。x射線(xiàn)攝影分為直接射線(xiàn)攝影法(x法)和襯比射線(xiàn)攝影法(xc法)。直接射線(xiàn)攝影法已被國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)采納,用于查定空粒和蟲(chóng)害粒種子;襯比射線(xiàn)攝影法尚待標(biāo)準(zhǔn)化。襯比射線(xiàn)攝影法造影效果一般比直接法要好,分辨率更高,目前使用襯比劑有水、BaCl2、NaI、KBr、PbSO4、KI、SrCl2、NaNO3溶液等。近年來(lái),研究者試圖把x射線(xiàn)攝影術(shù)與數(shù)字圖像處理技術(shù)結(jié)合起來(lái),取代人為觀(guān)察圖像的方法。楊冬風(fēng)[25]將軟滲鋇x-射線(xiàn)攝影的玉米圖像與計(jì)算機(jī)智能識(shí)別相結(jié)合,對(duì)高活力玉米種子的選擇準(zhǔn)確率高達(dá)95%。2006年,Neethirajan等在實(shí)時(shí)軟x射線(xiàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)提取圖像的灰度分布、紋理、形狀等特征建立了一種針對(duì)內(nèi)核角質(zhì)化種子的分類(lèi)系統(tǒng)[26]。
2.3.4 種皮葉綠素?zé)晒?/p>
1998年,Jalink等首次利用激光照射種皮產(chǎn)生的葉綠素?zé)晒猓–F)對(duì)甘藍(lán)(Brassicaoleracea)種子分級(jí),發(fā)現(xiàn)CF大小與種子質(zhì)量呈反比,將13%的高CF值的種子剔除后的,種子批發(fā)芽率達(dá)到了90%以上[27-28]。種皮上葉綠素含量很低,且隨著成熟度提高逐漸降低,較難監(jiān)測(cè),但被650~730nm波長(zhǎng)的光激發(fā)后,會(huì)發(fā)射一種熒光,這種信號(hào)可被放大檢測(cè),因此可以通過(guò)熒光強(qiáng)度來(lái)確定葉綠素殘留水平,從而判斷種子的成熟度,由此把不同成熟度種子分開(kāi)。2013年,Burcu等[29-30]將4個(gè)不同品種的在不同階段進(jìn)行采收辣椒種子都根據(jù)CF分級(jí),分級(jí)后種子發(fā)芽率、活力等都明顯提高。這項(xiàng)專(zhuān)利技術(shù)已經(jīng)商業(yè)化應(yīng)用在番茄、辣椒、黃瓜及甘藍(lán)等種子的精選上。目前,美國(guó)Satake公司已生產(chǎn)了葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)種子分選機(jī)。
該技術(shù)是利用自動(dòng)傳感器獲取種子圖像,然后轉(zhuǎn)換成數(shù)字圖像,再使用軟件進(jìn)行識(shí)別,并提取種子特征,最后再通過(guò)控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)種子的分選[31]。圖像處理主要包括圖像的獲取與存儲(chǔ)、預(yù)處理、特征提取、信息識(shí)別幾個(gè)步驟?;谟?jì)算機(jī)視覺(jué)和圖像處理的種子分級(jí)主要針對(duì)形狀、顏色、紋理等特征展開(kāi)。
1)外形。主要包括種子的尺寸、周長(zhǎng)、投影面積、形狀等特征參數(shù)。2014年,賈佳等利用圖像識(shí)別技術(shù)分析了農(nóng)大399小麥種子投影面積、長(zhǎng)度、寬度等,并以此將小麥種子分組,發(fā)現(xiàn)活力指數(shù)、幼苗鮮重與這些參數(shù)呈顯著相關(guān)[32]。陳兵旗等以面積和寬長(zhǎng)比為稻種類(lèi)型的特征參數(shù),以等價(jià)矩形長(zhǎng)、寬的差值最小為標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行了發(fā)霉和破損種子的判斷,正確率達(dá)到76.8%~100%[33]。目前,荷蘭 Hoopman公司生產(chǎn)的iXeed Counter通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像識(shí)別技術(shù)可快速獲取一批種子中寬度、長(zhǎng)度和投影面積的分布范圍。
2)提取模擬種子的顏色特征是一個(gè)重要的方法。彩色圖像的顏色系統(tǒng)應(yīng)用廣泛的包括RGB、HIS、Lab顏色空間等。2013年,彭江南等基于Seed Identificaiton軟件提取了圖像中棉籽的RGB、Lab、HSB、灰度以及物理指標(biāo),并依據(jù)這些指標(biāo)對(duì)種子進(jìn)行了快速精選,可使棉籽發(fā)芽率由89%提高到95%左右[34]。A.Dell’Aquila根據(jù)RGB平均值把lentil種子分成3份,通過(guò)線(xiàn)性回歸方程研究,發(fā)現(xiàn)RGB平均值與老化前后分級(jí)的種子發(fā)芽質(zhì)量顯著相關(guān)[35]。李振華等利用CIELAB顏色空間判斷煙草種子成熟度,發(fā)現(xiàn)煙草種子發(fā)芽率與亮度顯著相關(guān),當(dāng)煙草蒴果亮度<45,紅度>6,黃度<25,色飽和度<25,色相角度<60時(shí),是適宜采摘的成熟蒴果[36]。
3)紋理是圖像分析中一個(gè)重要而又難以描述的特征。Haralick R.M.認(rèn)為,由或多或少的相似的模式或紋理元組成的一種結(jié)構(gòu)就是紋理[37]?;趫D像灰度共生矩陣的特征提取是一種最常用的紋理特征提取方法,它能較精確地反映紋理重復(fù)方向和粗糙程度。2007年,王瑤利用包括紋理在內(nèi)24個(gè)特征參數(shù)對(duì)大麥種子建立了有效的種子模型,品種識(shí)別正確率達(dá)到95%以上[38]。2008年,郝建平等利用紋理檢測(cè)193個(gè)品種各50粒玉米種子的樣本,品種檢出率為95%[39]。
種子精選分選的宗旨是清除種子中的雜質(zhì),雜種及發(fā)育不良的種子,從而最大限度地獲得高凈度、高純度、高活力的種子。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的種子無(wú)損分選新技術(shù)雖然已取得一些進(jìn)步,但仍存在著很多不足如:
1)精度高但效率低,如計(jì)算機(jī)視覺(jué)與圖像處理技術(shù)需先獲取圖像,軟件識(shí)別后才能實(shí)現(xiàn)分選,無(wú)法滿(mǎn)足流水線(xiàn)需要。
2)方法單一,多數(shù)利用單一原理進(jìn)行分選。
3)存在局限性,如含油量測(cè)定和葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)只對(duì)部分種子有效。
伴隨著其他種子工業(yè)技術(shù)與傳統(tǒng)分選技術(shù)融合,未來(lái)種子分選技術(shù)的研發(fā)可能會(huì)向以下幾個(gè)方向發(fā)展:
1)高度自動(dòng)化,兼顧自動(dòng)化識(shí)別和自動(dòng)化分離,實(shí)現(xiàn)種子的高速、準(zhǔn)確分選。
2)方法多樣化,結(jié)合多種分選原理實(shí)現(xiàn)多重分選,進(jìn)一步提高種子質(zhì)量。
3)種子級(jí)別精細(xì)化,具有生活力的種子被分為多種活力級(jí)別,適用于不同的種植需要。
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