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    龍葵栓對慢性前列腺炎大鼠的影響

    2016-01-15 01:25:45許海英,孔令霞,倪廣林
    河北中醫(yī) 2015年1期
    關(guān)鍵詞:栓劑龍葵前列腺炎

    龍葵栓對慢性前列腺炎大鼠的影響

    許海英孔令霞1倪廣林△

    (河北省陽原縣人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,河北陽泉075800)

    【摘要】目的從實(shí)驗(yàn)角度探討龍葵栓治療慢性前列腺炎的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法將40只雄性Wister大鼠隨機(jī)分為5組,即正常對照組、模型對照組、龍葵栓大劑量組、龍葵栓小劑量組及陽性對照組,每組各8只。除正常對照組外,其余各組大鼠采用前列腺內(nèi)注射消痔靈方法復(fù)制前列腺炎模型。造模成功后,各組大鼠給藥前12 h禁食,予相應(yīng)藥肛門栓塞,連續(xù)給藥20 d。于末次給藥24 h后斷頭處死各組大鼠,剖腹取前列腺稱濕質(zhì)量后,取前列腺液進(jìn)行白細(xì)胞及卵磷脂小體檢查。結(jié)果模型對照組大鼠前列腺濕質(zhì)量較正常對照組明顯增加(P<0.01),卵磷脂小體密度下降(P<0.05),白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高(P<0.01);而龍葵栓大、小劑量組及陽性對照組與模型對照組比較前列腺濕質(zhì)量下降(P<0.05),卵磷脂小體密度升高(P<0.05),白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降(P<0.01)。結(jié)論龍葵栓可提高前列腺液中卵磷脂小體密度,降低白細(xì)胞計(jì)數(shù),促進(jìn)損傷上皮組織的修復(fù),恢復(fù)前列腺的分泌功能。

    【關(guān)鍵詞】龍葵;栓劑;前列腺炎;疾病模型,動物;模型,動物

    doi:10.3969/j.issn.1002-2619.2015.01.027

    【中圖分類號】R697.33;R965.1;R283.623;R285.5

    【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

    【文章編號】1002-2619(2014)01-0070-03

    Abstract【】Objective To explore the mechanism of longkui Suppository on treating experimental chronic prostatitis (CP) rats.Methods 40 rats were randomly divided into five groups,blank control group,model control group,high-dose longkui Suppository group,low-dose longkui Suppository group and positive control group.In addition to the blank control group,CC rats in the other groups were made by adopting the method of prostate injection of hemorrhoid injection.Groups of rats for 12 h before fasting received the corresponding medicine anal embolism,continuous dosing 20 d.The broken ends in the last 24 h after dosing to death between groups of rats,the quality of the prostate,prostate fluid for white blood cells and lecithin corpuscle were recorded.Results Rat prostate wet quality in model control group significantly increased compared with normal control group (P<0.01),the density of lecithin corpuscle decreased (P<0.05),elevated white blood cell count (P<0.01).Rat prostate wet quality in high-dose low-dose longkui Suppository group and positive control group significantly decreased compared with normal control group (P<0.05),the density of lecithin corpuscle increased (P<0.05),white blood cell count decreased (P<0.01).Conclusion Longkui Suppository can improve the density of lecithin corpuscle in prostate fluid,lower white blood cell count,promote the repair of damage epithelial tissue and restore the prostatic secretion.

    通訊作者:△河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院乳腺外科,河北張家口075000

    作者簡介:許海英(1971—),女,主管護(hù)師。從事婦產(chǎn)科臨床護(hù)理工作。

    收稿日期:(2013-04-25)

    Effects of longkui Suppository treating experimental chronic prostatitis ratsXUHaiying*,KONGLingxia,NIGuanglin.*DepartmentofSurgery,YangquanCountyPeople'sHospitalinHebeiProvince,Hebei,Yangquan075800

    【Key words】 Longkui; Suppository; Prostatitis; Disease model; Animal; Model

    1河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院中醫(yī)科,河北張家口075000

    慢性前列腺炎是男性常見病、多發(fā)病,其病理改變主要是炎性細(xì)胞浸潤,纖維組織增生,腺體萎縮、消失,導(dǎo)致前列腺腺管排泄不暢,炎性分泌液潴留,前列腺分泌功能下降[1]。龍葵栓由龍葵、大黃、丹參、菊花等中藥經(jīng)提取加工精制而成,具有活血化瘀、清熱解毒、理氣止痛的功效。本研究主要從實(shí)驗(yàn)角度研究龍葵栓對慢性前列腺炎大鼠的治療作用,以為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料

    1.1.1實(shí)驗(yàn)動物健康雄性Wister大鼠40只,體質(zhì)量(280±20) g,由北京實(shí)驗(yàn)動物繁殖中心提供,動物合格證號:SCXK(冀)2008-1-3。

    1.1.2藥物及試劑消痔靈注射液(吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司,國藥準(zhǔn)字Z22026175,批號041104);野菊花栓(廣西康華藥業(yè)有限責(zé)任公司,國藥準(zhǔn)字Z45020265,批號040715),臨用時(shí)用0.9%氯化鈉注射液配成1∶2的混懸液;1%鹽酸腎上腺素注射液(北京市永康藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H11020584,批號040726);復(fù)方丹參片(石家莊市華龍藥業(yè)股份有限公司,國藥準(zhǔn)字Z13020361,批號040711);龍葵栓(由河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院中藥房提供),藥物組成:龍葵30 g,丹參30 g,馬鞭草30 g,菊花30 g,木鱉子15 g,大黃15 g,沒藥10 g,乳香10 g,延胡索10 g。木鱉子用醋酸浸泡7 d,取汁備用。余藥直接水煎3次,每次2 h,合并藥液,濃縮稠膏(1∶1.25~1.30)冷卻后,用醇降法提取有效成分。制栓:基質(zhì)為6 000分子聚乙二醇、4 000分子聚乙二醇、甘油。將藥膏與以上基質(zhì)按10∶6∶7∶2比例在37 ℃熔點(diǎn)下制成栓劑,每劑制8粒,每粒3 g,含生藥22.5 g/粒。臨用時(shí)用0.9%氯化鈉注射液配成1∶2混懸液。

    1.1.3主要儀器德國Leica CM1900冰凍切片機(jī),德國CUT5062型組織切片機(jī),日本Hitachi(日立)S-3400掃描電子顯微鏡。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1動物分組將40只大鼠隨機(jī)分為5組,即正常對照組、模型對照組、龍葵栓大劑量組、龍葵栓小劑量組及陽性對照組,每組各8只。

    1.2.2模型制備除正常對照組外,其余各組大鼠參照文獻(xiàn)[2]方法,采用前列腺內(nèi)注射消痔靈方法復(fù)制前列腺炎模型。

    1.2.3給藥劑量及方法給藥劑量:龍葵栓大劑量組0.8 g/kg(相當(dāng)于生藥6.125 g/kg),龍葵栓小劑量組0.4 g/kg(相當(dāng)于生藥3.062 g/kg),陽性對照組為野菊花栓0.8 g/kg(相當(dāng)于生藥5.442 g/kg),模型對照組和正常對照組為空白栓(其主要成分為水溶性基質(zhì)甘油明膠和硬化劑白蠟)0.4 g/kg。給藥方法:給藥前12 h禁食,將栓劑加溫水配成相應(yīng)濃度,按以上劑量經(jīng)肛門給藥,每日2次,每次0.5 mL。給藥后用0.9%氯化鈉注射液棉球堵塞肛門,以防藥液流出和滲漏,給藥間隔8 h,連續(xù)給藥20 d。

    1.2.4標(biāo)本采集及制備于末次給藥24 h后斷頭處死各組大鼠,剖腹取前列腺稱濕質(zhì)量后,取前列腺液10 μL進(jìn)行白細(xì)胞檢查,另外取一滴涂片進(jìn)行卵磷脂小體檢查。評分標(biāo)準(zhǔn):卵磷脂小體滿視野,4分;卵磷脂小體3/4視野,3分;卵磷脂小體1/2視野,2分;卵磷脂小體1/4視野,1分[3]。然后分別用甲醛液固定標(biāo)本,取前列腺背葉組織制作透射電鏡樣品,以觀察前列腺的組織形態(tài)變化。

    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,多組間比較采用F檢驗(yàn);2組間比較用q檢驗(yàn)。

    2結(jié)果

    2.1肉眼觀察肉眼觀察正常對照組前列腺組織柔軟,無水腫,表面光滑、紅潤。模型對照組前列腺組織較硬,缺乏光澤,水腫明顯,其中有75.0%(6只)局部有較大灰白色結(jié)節(jié),有50.0%(4只)腺體與周圍組織粘連,同時(shí)有1只伴有尿潴留。龍葵栓大劑量組及陽性對照組前列腺組織柔軟,有光澤,無水腫,腺體與周圍組織無粘連,但分別有25.0%(2只)局部有小灶性灰白色結(jié)節(jié)[4]。龍葵栓小劑量組前列腺組織較柔軟,有光澤,輕度水腫,其中有37.5%(3只)局部有小灶性灰白色結(jié)節(jié),有12.5%(1只)腺體與周圍組織輕度粘連。

    2.25組大鼠前列腺濕質(zhì)量比較見表1。

    表1 5組大鼠前列腺濕質(zhì)量比較 mg, ± s

    表1 5組大鼠前列腺濕質(zhì)量比較 mg, ± s

    組 別n前列腺濕質(zhì)量正常對照組889.6±17.1**模型對照組8120.3±18.2龍葵栓大劑量組892.6±16.5*龍葵栓小劑量組896.3±17.3*陽性對照組893.7±17.6*

    與模型對照組比較,*P<0.05,**P<0.01

    由表1可見,模型對照組大鼠前列腺濕質(zhì)量較正常對照組明顯增加(P<0.01),而龍葵栓大、小劑量組及陽性對照組與模型對照組比較下降(P<0.05)。

    2.3電鏡下觀察正常對照組前列腺上皮細(xì)胞游離面有少量微絨毛,胞質(zhì)內(nèi)成分依細(xì)胞的功能狀態(tài)不同,其結(jié)構(gòu)也有差異,有些腺上皮細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)有豐富的分泌顆粒和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),而有的腺上皮細(xì)胞線粒體、核糖體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較豐富,游離面絨毛較密集(見封3,圖1)。模型對照組損傷初期(注射后2 h)細(xì)胞膜消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,細(xì)胞內(nèi)水腫(見封3,圖2)。陽性對照組前列腺腺上皮細(xì)胞損傷大部分已恢復(fù),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體核內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較多,細(xì)胞游離面有多寡不同的微絨毛,其胞核圓形,相對較大,但細(xì)胞較幼稚(見封3,圖3)。龍葵栓大劑量組腺上皮細(xì)胞多已恢復(fù),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有較多線粒體核內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞游離面有多寡不同的微絨毛,其胞核圓形,相對較大,胞細(xì)胞較幼稚(見封3,圖4)。龍葵栓小劑量組間質(zhì)纖維多,成纖維細(xì)胞明顯,腺上皮細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有少量線粒體和明顯的水腫區(qū)(見封3,圖5)。

    2.45組大鼠卵磷脂小體密度及白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較見表2。

    表2 5組大鼠卵磷脂小體密度及 白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較  ± s

    表2 5組大鼠卵磷脂小體密度及 白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較  ± s

    組 別卵磷脂小體密度(分)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(×106/L)正常對照組3.8±0.4*751.0±195.3**模型對照組1.8±0.42859.0±327.6龍葵栓大劑量組3.8±0.3*762.5±127.2**龍葵栓小劑量組3.2±0.46*826.0±213.7**陽性對照組3.7±0.32*813.2±135.8**

    與模型對照組比較,*P<0.05,**P<0.01

    由表2可見,模型對照組大鼠卵磷脂小體密度較正常對照組下降(P<0.05),白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高(P<0.01),而龍葵栓大、小劑量組及陽性對照組卵磷脂小體密度較模型對照組升高(P<0.05),白細(xì)胞計(jì)數(shù)下降(P<0.01)。

    3討論

    臨床報(bào)道顯示,前列腺炎的病理特點(diǎn)是前列腺組織的炎性細(xì)胞浸潤,上皮細(xì)胞阻塞,漸至變性,前列腺腺體間質(zhì)水腫,腺管阻塞,可見炎性膿液,感染大多發(fā)生在間質(zhì)內(nèi),與腺體的慢性充血互為因果,相互影響,導(dǎo)致上述病理改變加重,日久難愈[5]。慢性前列腺炎屬中醫(yī)學(xué)精濁、淋濁等范疇。其病機(jī)多為濕熱下注、瘀血阻滯和腎氣虧虛[6]。由于其癥狀多變和治療方法不統(tǒng)一,患者雖經(jīng)長期治療,但效果不佳,且易合并男性不育和性功能障礙[7]。

    針對上述病理變化,近年來我們應(yīng)用龍葵栓治療慢性前列腺炎的目的在于,探索中藥抗炎、抗纖維化、改善和修復(fù)損傷的前列腺組織等藥理作用。龍葵栓由龍葵、丹參、馬鞭草、菊花、木鱉子、大黃、沒藥、乳香、延胡索等組成,具有活血化瘀、清熱解毒、理氣止痛的功效。通過肛門給藥,直接作用于患處,對慢性前列腺炎有較好的預(yù)防和治療作用。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,龍葵栓可提高前列腺炎模型小鼠前列腺液中卵磷脂小體密度,降低白細(xì)胞計(jì)數(shù),能抑制炎性細(xì)胞趨化及浸潤,有較強(qiáng)的纖維蛋白降解作用,抑制肉芽腫形成,使前列腺炎模型大鼠前列腺間質(zhì)水腫、充血減輕,腺腔分泌物增加;促進(jìn)損傷上皮組織的修復(fù),恢復(fù)前列腺的分泌功能。其機(jī)制可能是消除或緩解炎癥對腺體間質(zhì)組織的刺激,使堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)釋放減少,阻止纖維連接蛋白(FN)和層粘連蛋白(LN)產(chǎn)生[8],而減輕局部滲出、水腫及炎性增生。

    參考文獻(xiàn)

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    [2]楊小榮,劉芳,謝文杰,等.大鼠非細(xì)菌性前列腺炎模型的復(fù)制[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(4):347-348,350.

    [3]應(yīng)國華.電鏡技術(shù)與細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)[M].香港:香港現(xiàn)代出版社,1993:31-79.

    [4]賀菊喬,朱曉明,曹暉,等.紫金膠囊治療大鼠細(xì)菌性前列腺炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2000,7(2):72-73.

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    [6]李海松,韓亮 王彬,等.慢性前列腺炎的中醫(yī)藥研究進(jìn)展與思考[J].環(huán)球中醫(yī)藥,2012,5(7):481-484.

    [7]馬永江,安崇辰.中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2001:478-496.

    [8]許濤,戴寧,江安紅,等.男炎消對大鼠實(shí)驗(yàn)性前列腺炎影響的病理學(xué)觀察[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2001,20(1):38-40.

    (本文編輯:曹志娟)

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