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    對CHB和HBV相關(guān)性肝硬化患者進(jìn)行外周血Th17細(xì)胞頻率檢測的臨床意義分析

    2016-01-10 04:01:20張利霞張中平許麗娟
    當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2016年22期
    關(guān)鍵詞:外周血受試者肝硬化

    張利霞 張中平 許麗娟

    (常州市武進(jìn)人民醫(yī)院消化內(nèi)科 江蘇 常州 213017)

    乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染導(dǎo)致的慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)是我國的常見病、高發(fā)病。最新的研究結(jié)果表明,由CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫應(yīng)答在肝細(xì)胞損傷與肝組織炎癥發(fā)生發(fā)展的過程中扮演了重要的角色。輔助性T細(xì)胞17(Th17)是一種CD4+T細(xì)胞,具有促進(jìn)白細(xì)胞介素-17(IL-17)的生成、促進(jìn)肝臟疾病的發(fā)生與發(fā)展等作用[1]?!巴庵苎猅h17細(xì)胞頻率”即Th17細(xì)胞在人體外周血中表達(dá)的頻率。在本次研究中,我們主要分析對CHB和HBV相關(guān)性肝硬化患者進(jìn)行外周血Th17細(xì)胞頻率檢測的臨床意義,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 本研究中的患者均為我院2013年10月~2015年10月收治的30例CHB患者與30例HBV相關(guān)性肝硬化患者。這些患者的病情均符合《慢性乙型肝炎防治指南》(2010年版)中關(guān)于CHB或HBV相關(guān)性肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。將這些患者按照病情的不同分為CHB組(n=30)及HBV相關(guān)性肝硬化組(n=30)。將同期在我院進(jìn)行體檢的30名健康人納入正常組。在CHB組患者中,有男性16例、女性14例,其平均年齡為(49.26±8.37)歲。在HBV相關(guān)性肝硬化組患者中,有男性17例、女性13例,其平均年齡為(48.83±9.26)歲。在正常組受試者 中,有男性15例、女性15例,其平均年齡為(48.94±9.30)歲。各組受試者的年齡、性別等一般資料相比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05),具有可比性。本次研究已通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn),相關(guān)的受試者均對本次研究知情且自愿參與本次研究。

    1.2 檢測指標(biāo) 抽取各組受試者的空腹肘靜脈血3mL,使用FACSCalibur流式細(xì)胞儀(美國BD公司生成)檢測其外周血中Th17細(xì)胞的頻率[5]。將各組受試者的血液標(biāo)本置于離心機(jī)中分離出血漿,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測其血漿中IL-17的水平。使用C8000型全自動生化分析儀(美國雅培公司生成)檢測各組受試者的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽紅素(TBIL)等肝功能指標(biāo)。使用ABI Prism 7300型熒光定量PCR儀(美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司生成)及DA7600型全自動熒光定量PCR儀(美國羅氏公司生成)檢測各組受試者HBV的血清學(xué)標(biāo)志物及HBV DNA載量等指標(biāo)。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件對本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計量資料用(±s)表示,采用t檢驗(yàn),計數(shù)資料用(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),采用Pearson法或Spearman法進(jìn)行相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)的設(shè)定為α=0.05,P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 對各組受試者外周血Th17細(xì)胞頻率的分析 與CHB組患者相比,HBV相關(guān)性肝硬化組患者的外周血Th17細(xì)胞頻率較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組受試者相比,CHB組患者的外周血Th17細(xì)胞頻率較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳情見表1。

    表1 對各組受試者外周血Th17細(xì)胞頻率的分析(±s )

    表1 對各組受試者外周血Th17細(xì)胞頻率的分析(±s )

    注:與正常組比較,*P<0.05;與CHB組比較,#P<0.05。

    組別例數(shù)外周血Th17細(xì)胞頻率(%)CHB組302.14±0.33*HBV相關(guān)性肝硬化組302.51±0.29*#正常組301.09±0.17#

    2.2 對各組受試者血漿IL-17水平的分析 與CHB組患者相比,HBV相關(guān)性肝硬化組患者血漿IL-17的水平較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組受試者相比,CHB組患者血漿IL-17的水平較高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳情見表2。

    表2 對各組受試者血漿IL-17水平的分析(±s )

    表2 對各組受試者血漿IL-17水平的分析(±s )

    注:與正常組比較,*P<0.05;與CHB組比較,#P<0.05。

    組別例數(shù)血漿IL-17的水平(pg/mL)CHB組3021.69±4.33*HBV相關(guān)性肝硬化組3032.48±8.15*#正常組3011.65±3.30#

    2.3 對各組受試者其他檢測指標(biāo)的分析 與HBV相關(guān)性肝硬化組患者相比,CHB組患者ALT的水平、HBV DNA的載量較高,其TBIL的水平較低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。兩組患者ALT的水平、TBIL的水平均高于正常組患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳情見表3。

    表3 對各組受試者其他檢測指標(biāo)的分析(±s)

    表3 對各組受試者其他檢測指標(biāo)的分析(±s)

    注:與正常組比較,*P<0.05;與CHB組比較,#P<0.05。

    組別例數(shù)ALT(U/L)TBIL(μmol/L)HBV DNA載量(IU/mL)CHB組30182.84±17.35*35.59±11.36*5.94±0.81 HBV相關(guān)性肝硬化組3065.72±10.41*#329.50±83.82*#3.73±0.59#正常組3020.39±4.55#12.29±4.07#--

    2.4 對各組受試者的外周血Th17細(xì)胞頻率與其他指標(biāo)相關(guān)性的分析 進(jìn)行相關(guān)性分析的結(jié)果顯示,各組受試者的外周血Th17細(xì)胞頻率與其IL-17的水平呈正相關(guān)(P<0.05),與其ALT的水平、TBIL的水平及HBV DNA的載量無明顯的相關(guān)性(P>0.05)。詳情見表4。

    表4 對各組受試者的外周血Th17細(xì)胞頻率與其他各項指標(biāo)相關(guān)性的分析

    3 討論

    乙肝是臨床上最常見的病毒性肝炎,具有病程長、治療周期長、易復(fù)發(fā)等特點(diǎn),可對患者的健康及生活造成嚴(yán)重的影響。乙肝患者在發(fā)病的早期其臨床癥狀較隱匿,其病情需經(jīng)肝功能檢查、病毒載量檢測等多項檢查才能得到確診。如何及早確診乙型肝炎患者的病情,改善其預(yù)后,阻止其病情進(jìn)展為肝硬化是進(jìn)行臨床研究的重要課題。研究發(fā)現(xiàn),CHB患者的機(jī)體對HBV的清除能力不足是導(dǎo)致HBV感染持續(xù)存在的主要原因,其機(jī)體的免疫機(jī)制異常與其Th1和Th2細(xì)胞的免疫應(yīng)答失調(diào)具有一定的關(guān)聯(lián)性。最新的研究成果表明,CHB患者外周血中Th1細(xì)胞的占比與健康人相比無明顯的差異性,且與其病情的嚴(yán)重程度無明顯的關(guān)聯(lián)性??梢?,慢性HBV感染不是由單一因素導(dǎo)致的,此病患者可能是在較多免疫機(jī)制的影響下發(fā)生持續(xù)的肝臟損傷[3]。

    Th17是有促炎作用的CD4+T淋巴細(xì)胞亞群,具有促進(jìn)人體內(nèi)IL-17等炎癥介質(zhì)的分泌等作用。本次研究的結(jié)果顯示,HBV相關(guān)性肝硬化組患者外周血中Th17細(xì)胞的頻率顯著高于CHB組患者,CHB組患者外周血中Th17細(xì)胞的頻率顯著高于正常組受試者??梢姡S著HBV感染者肝臟損傷程度的加劇,其外周血Th17細(xì)胞頻率及外周血、肝組織內(nèi)IL-17的水平可逐漸上升。IL-17除具有促炎的作用外,還可誘導(dǎo)IL-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、趨化因子、金屬蛋白酶的生成,加速局部組織中炎癥細(xì)胞的浸潤與組織損傷。本研究的結(jié)果顯示,各組受試者的外周血Th17細(xì)胞頻率與IL-17的水平呈正相關(guān)(P<0.05)。可見,Th17細(xì)胞可促進(jìn)IL-17的表達(dá),在肝臟損傷的發(fā)生發(fā)展中可發(fā)揮重要的作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),人的外周血Th17細(xì)胞頻率與ALT的水平有一定的相關(guān)性[4]。但本研究的結(jié)果顯示,各組受試者的外周血Th17細(xì)胞頻率與ALT、TBIL的水平及HBV DNA的載量均無明顯的相關(guān)性。這可能與本研究的樣本量有限且納入的CHB患者病情較輕,其外周血Th17細(xì)胞頻率與ALT的水平等肝功能指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性不明顯有關(guān)。Wang等人[5]指出,患者發(fā)生肝損傷的部位中Th17細(xì)胞的含量可顯著增多且其含量與發(fā)生炎癥反應(yīng)的程度呈正相關(guān)。可見,對Th17細(xì)胞進(jìn)行靶向調(diào)節(jié)有望為治療CHB及HBV相關(guān)性肝硬化新的策略。

    綜上所述,隨著CHB及HBV相關(guān)性肝硬化患者肝損傷程度的加重,其外周血中Th17細(xì)胞的頻率可顯著增高。Th17細(xì)胞誘導(dǎo)的IL-17分泌增多可能是導(dǎo)致肝損傷發(fā)生發(fā)展的主要原因。

    [1]王愛珍, 彭國平. 慢性乙肝患者外周血 Treg/Th17 及相關(guān)細(xì)胞因子的變化[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)生, 2013, 51(4): 108-110.

    [2]金磊, 張紀(jì)元, 孫紅啟, 等. Th17 細(xì)胞在乙肝肝硬化患者中的免疫致病機(jī)制研究[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 38(1): 62-65.

    [3]劉艷瓊, 楊小安, 鄒勇, 等. 慢乙肝患者外周血中 Th17細(xì)胞趨化因子受體的表達(dá)水平[J]. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2014, 28(3): 161-163.

    [4]林偉研, 倪進(jìn)東,唐豪,等.Th17細(xì)胞因子IL-17A與乙肝疫苗無/弱應(yīng)答關(guān)聯(lián)的研究[J]. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué), 2014, 21(8):904-905.

    [5]Wang B, Zhao X P, Fan Y C, et al. IL-17A but not IL-22 suppresses the replication of hepatitis B virus mediated by over-expression of MxA and OAS mRNA in the HepG2.2.15 cell line[J]. Antiviral research, 2013, 97(3): 285-292.

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