基于分子及傳統(tǒng)方法對九龍山自然保護(hù)區(qū)黑麂資源研究

季國華，鄭偉成*，王 華，劉菊蓮，潘成椿，葉飛英

（1. 浙江九龍山國家級自然保護(hù)區(qū)管理局，浙江 遂昌 323300；2. 浙江師范大學(xué) 生態(tài)研究所，浙江 金華 321004）

基于分子及傳統(tǒng)方法對九龍山自然保護(hù)區(qū)黑麂資源研究

季國華1，鄭偉成1*，王 華2，劉菊蓮1，潘成椿1，葉飛英1

（1. 浙江九龍山國家級自然保護(hù)區(qū)管理局，浙江 遂昌 323300；2. 浙江師范大學(xué) 生態(tài)研究所，浙江 金華 321004）

2012年10月和2013年5月，采用分層—樣地—樣帶抽樣統(tǒng)計(jì)法分別對九龍山自然保護(hù)區(qū)的核心區(qū)、緩沖區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)所設(shè)置的15條樣帶進(jìn)行黑麂（Muntiacus crinifrons）資源調(diào)查，結(jié)合樣帶法、紅外相機(jī)技術(shù)法以及分子標(biāo)記法對九龍山保護(hù)區(qū)黑麂的種群密度及保護(hù)現(xiàn)狀進(jìn)行了調(diào)查。結(jié)果表明：保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂種群平均密度為7.93 ±0.75只/km2，其中核心區(qū)、緩沖區(qū)、實(shí)驗(yàn)區(qū)黑麂種群密度分別為10.27±1.17、7.58±0.26、4.89±1.28只/km2；通過方差分析，不同樣地間黑麂種群密度差異極顯著（F = 10.45 > F3,26= 4.64，P < 0.01）。這表時(shí)，黑麂在九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)廣泛分布，而主要集中分布在上寮坑、巖坪一帶，黃基坪等周邊地帶為黑麂的次要分布區(qū)，其余地區(qū)為一般分布區(qū)。

黑麂種群密度；樣帶法；紅外相機(jī)法；分子標(biāo)記法

黑麂（Muntiacus crinifrons），也稱紅頭麂、烏金麂、紅頭青麂、蓬頭麂、烏獐，為典型的亞熱帶山地森林動(dòng)物，國家一級保護(hù)動(dòng)物，隸屬偶蹄目（Artiodactyla）鹿科（Cervidae）麂屬（Muntiacus），在瀕危野生動(dòng)植物物種國際貿(mào)易公約（CIES）和國際自然與自然資源保護(hù)聯(lián)盟（IUCN）名錄中分別被列入附錄Ⅰ和易危（Vulnerable，VU）級[1]?，F(xiàn)存種群主要分布于浙江、安徽、江西和福建四省[2～3]。

在野外很難見到活的黑麂個(gè)體和獲得黑麂的肌肉組織進(jìn)行分子水平的分析，但可以通過非損傷性取樣（noninvasive sampling）[4]，獲得黑麂的糞便[5]、毛發(fā)[6]等進(jìn)行相關(guān)研究。程宏毅等[7～10]成功從黑麂的糞便中提取出DNA及其PCR檢測，為從分子水平研究黑麂提供了技術(shù)基礎(chǔ)。周襄武等[11～12]從黑麂的糞便中提取DNA，并擴(kuò)增線粒體DNA細(xì)胞色素b基因和 2個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行檢測，同時(shí)提取黑麂肌肉和皮毛樣品的DNA作對照，結(jié)果表明，該方法可以從糞便中提取高質(zhì)量的黑麂DNA，并可進(jìn)行有效擴(kuò)增。劉軍[13]通過對黑麂糞便的研究，對黑麂進(jìn)行個(gè)體識(shí)別和性別鑒定。因此，以黑麂糞便作為樣本對黑麂的數(shù)量進(jìn)行研究是可行的。

紅外線觸發(fā)自動(dòng)數(shù)碼相機(jī)陷阱技術(shù)（infrared triggered cameras technology，ITCT），以下簡稱紅外相機(jī)技術(shù)，是一項(xiàng)定性和定量相結(jié)合的調(diào)查技術(shù)，具有晝夜連續(xù)工作、調(diào)查成本低、無創(chuàng)傷、環(huán)境干擾小、抗環(huán)境變化以及能獲得高度隱蔽物種和地形復(fù)雜區(qū)域的信息等優(yōu)點(diǎn)[14～15]。對于保護(hù)區(qū)來說，監(jiān)測是為了掌握資源和生物多樣性變化的趨勢，并且監(jiān)測需要獲得長時(shí)間可比較的數(shù)據(jù)。

黑麂在九龍山的分布呈現(xiàn)出分布廣，數(shù)量多，種群密度高的特點(diǎn)，九龍山保護(hù)區(qū)及周邊區(qū)域已經(jīng)成為我國黑麂最重要的分布中心和最大黑麂種群的集中分布區(qū)。本次調(diào)查九龍山保護(hù)區(qū)黑麂的資源，有利于掌握近10 a來黑麂種群數(shù)量的變化，以評估對黑麂保護(hù)的成效，也為今后保護(hù)對策和措施的制定和實(shí)施提供科學(xué)依據(jù)。

1 研究區(qū)自然概括

九龍山國家級自然保護(hù)區(qū)位于浙江省遂昌縣西南部，地處浙、閩、贛三省交界處（118° 49′ ～ 118° 55′ E，28° 19′ ～ 28° 24′ N），為武夷山系仙霞嶺山脈的一個(gè)主要分支，是錢塘江水系的最南端源頭[1]。九龍山山地陡峭，高峰群集。保護(hù)區(qū)內(nèi)山體坡度 > 40°的面積約占總面積的80%。九龍山自然保護(hù)區(qū)屬中亞熱帶濕潤季風(fēng)區(qū)，一年中氣候有明顯的季節(jié)性變化，氣候呈現(xiàn)明顯的垂直地帶性。降水量大，平均年降水量在1 500 ～ 2 000 mm，主要集中在4-6月，占全年降水的46%，7-8月為少雨期[16]。植被類型主要分為針葉林、針闊混交林、闊葉林、竹林和灌叢[17]。保護(hù)區(qū)優(yōu)良的森林生態(tài)環(huán)境，為野生動(dòng)物的棲息、繁衍提供了良好的條件。九龍山保護(hù)區(qū)是國家一級保護(hù)動(dòng)物、中國特有的世界性受脅物種黑麂最重要的分布中心和最大野生種群的集中分布區(qū)。

2 調(diào)查方法

通過廣泛收集和查閱以往有關(guān)黑麂的文獻(xiàn)作為基礎(chǔ)資料，于2011年11月至2013年8月，在九龍山國家級自然保護(hù)區(qū)開展黑麂資源的調(diào)查。

2.1 樣帶（樣方）法

2012年10月和2013年5月，采用國內(nèi)外常用的分層—樣地—樣帶抽樣統(tǒng)計(jì)法[18]，分別對九龍山自然保護(hù)區(qū)的核心區(qū)、緩沖區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)所設(shè)置的15條樣帶進(jìn)行調(diào)查。樣帶設(shè)置以保護(hù)區(qū)內(nèi)4個(gè)保護(hù)站為樣地，遵守隨機(jī)等概率原則，向外呈輻射狀進(jìn)行布置，與2002年至2003年調(diào)查所設(shè)的樣帶一致[1]以便對比分析。黃壇淤2條代表實(shí)驗(yàn)區(qū)（樣帶長度為（3 000、3500 m）；黃基坪4 條代表緩沖區(qū)（3 000、3 500、3 500、4 000 m），上寮坑5條（3 000、3 500、4 000、5 000、5 000 m）、巖坪4條（3 500、4 000、4 000、5 000 m）代表核心區(qū)，樣帶單側(cè)寬度為20 m。

調(diào)查樣帶兩側(cè)各20 m范圍內(nèi)及樣方內(nèi)的黑麂活動(dòng)的新鮮痕跡（如足跡、臥跡、洞穴、糞便、食物殘跡、叫聲等），記錄生境類型，用GPS進(jìn)行定位。2.2 紅外相機(jī)法

于2011年11月至2013年8月，在九龍山國家自然保護(hù)區(qū)的不同區(qū)域布置了32臺(tái)紅外相機(jī)進(jìn)行監(jiān)測。在相機(jī)的布置過程中主要采取隨機(jī)型和海拔垂直型放置模式，部分區(qū)域采取十字型模式[19]（表1）。

表1 九龍山紅外相機(jī)擺放模式Table 1 Camera trap placement patterns in Jiulongshan Nature Reserve

紅外相機(jī)在各個(gè)區(qū)域內(nèi)均沿所設(shè)定的樣地進(jìn)行擺置，紅外相機(jī)均放置在樣地內(nèi)，相鄰紅外相機(jī)的距離保持在500 m左右。樣地大小的設(shè)定原則是同一樣地內(nèi)紅外相機(jī)間距離最大的設(shè)為樣地的長，確定樣地長度后，以橫向相機(jī)間最大距離為樣地寬度。紅外相機(jī)在樣地內(nèi)的放置沿黑麂常出沒的路線及足跡鏈豐富的生境放置。所放置紅外相機(jī)樣地的大小在不同區(qū)域布置相機(jī)時(shí)用GPS儀表同時(shí)記錄每臺(tái)相機(jī)所在位置的海拔、坡度、坡向、經(jīng)緯度等生態(tài)因子。

2.3 DNA指紋技術(shù)

2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料 除了在樣帶（樣方）法調(diào)查過程中收集黑麂糞便外，在內(nèi)北坪、黃基坪和黃壇塢分別設(shè)置樣方（表2），2012年10月和2013年5月各收集1次。收集時(shí)，仔細(xì)搜尋樣方內(nèi)的黑麂新鮮糞便，當(dāng)發(fā)現(xiàn)黑麂新鮮糞便時(shí)，采集部分糞便，現(xiàn)場裝入盛有無水乙醇的帶蓋密封塑料瓶中，帶回實(shí)驗(yàn)室便將其放入-20℃冰箱中保存；采集時(shí)均使用一次性手套或者滅菌容器和材料以防止采樣過程中的人為污染和樣品間的交叉污染，并及時(shí)標(biāo)注、記錄樣品的采集時(shí)間、采集地名、海拔高度和經(jīng)緯度，以及采集者姓名等詳細(xì)資料。

2.3.2 實(shí)驗(yàn)處理 將從九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)采集的黑麂糞便樣本帶回實(shí)驗(yàn)室，放入冰箱中-20℃保存?zhèn)溆?。將采集的糞便樣本進(jìn)行糞便DNA提取，然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將PCR產(chǎn)物送上海生工進(jìn)行檢測，獲得數(shù)據(jù)后用相關(guān)軟件進(jìn)行分析。糞便DNA的提取及PCR用劉軍[21]的方法。

表2 各樣地黑麂糞便的采集Table 2 Feces collected in sample plots

2.4 數(shù)據(jù)處理

2.4.1 樣帶（樣方）法 依據(jù)前期發(fā)現(xiàn)黑麂實(shí)體與活動(dòng)痕跡的關(guān)系，確定出黑麂活動(dòng)痕跡（足跡、糞便和拱痕等）與個(gè)體數(shù)之間的關(guān)系，即黑麂足跡鏈和拱痕間隔500m以上的按2個(gè)個(gè)體計(jì)算，500m以內(nèi)的按1個(gè)個(gè)體計(jì)算，依次類推，累加黑麂的密度得到總的密度。

樣帶（樣方）內(nèi)種群密度計(jì)算公式[20]：

式中，i代表各樣帶（樣方），j代表各生境，Di為i樣帶（樣方）中黑麂的密度（只/km2），Nij為i樣帶（樣方）中第j種生境累計(jì)單位時(shí)間內(nèi)黑麂痕跡總數(shù)，Aij為樣帶（樣方）中第i種生境的調(diào)查面積（km2），t為單位時(shí)間（7 d），以足跡為指標(biāo)時(shí)，根據(jù)足跡大小排除重復(fù)ε為1；以糞便為指標(biāo)時(shí)，需要用排便率對數(shù)據(jù)進(jìn)行修正，ε即為日排便率（堆/d）。區(qū)間估計(jì)[22]為

求得九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂種群密度后，密度乘以黑麂的棲息環(huán)境面積即為黑麂的種群數(shù)量。

2.4.2 紅外相機(jī)數(shù)據(jù)處理 在對2012年10月至2013年5月的相片整理后，得到黑麂的獨(dú)立相片（independent photograph，IP）共468張。對地點(diǎn)或時(shí)間相近連續(xù)拍攝的物種照片采用相同側(cè)面、部位的斑紋、體型、毛色等特征進(jìn)行比對，以判斷是否屬同一次數(shù)，不同次數(shù)的照片定義為獨(dú)立照片。識(shí)別在ACD see 15軟件的輔助下進(jìn)行。

紅外相機(jī)黑麂的日拍攝頻率計(jì)算公式：

其中：IP為獨(dú)立相片數(shù)（張），IPij為樣地i中j相機(jī)的獨(dú)立相片數(shù)（張）；T為紅外相機(jī)2012年10月放置至2013年5月紅外相機(jī)數(shù)據(jù)收回經(jīng)歷的時(shí)間，每月按30 d進(jìn)行計(jì)算。

2.4.3 DNA指紋技術(shù)數(shù)據(jù)處理 根據(jù)所采集糞便的面積計(jì)算出黑麂的種群密度，然后算出整個(gè)保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂種群數(shù)量。用軟件Cervus3.0[22]分析微衛(wèi)星數(shù)據(jù)，對糞便樣本進(jìn)行個(gè)體識(shí)別，確定黑麂的個(gè)數(shù)。基于非損傷性標(biāo)志重捕法統(tǒng)計(jì)種群數(shù)量，根據(jù)個(gè)體識(shí)別的數(shù)據(jù)，即不同地點(diǎn)的同一個(gè)體數(shù)據(jù)，其中任何一次可記為標(biāo)志，其他記錄可看作該個(gè)體的重捕。數(shù)量分析使用軟件Capwire[24～25]完成。軟件有兩種模型：ECM（even capture probability model）和TIRM（two innate rates model）。ECM模型的基本假設(shè)是種群中每個(gè)個(gè)體的排便率基本一致，對每個(gè)個(gè)體的抽樣強(qiáng)度也基本一致，因此每個(gè)個(gè)體被捕獲的概率一致，即種群數(shù)量N的倒數(shù) 1/N。TIRM模型的基本假設(shè)是種群中個(gè)體間被捕獲的概率相差很大，在模型擬合時(shí)按照捕捉的概率將個(gè)體分成捕捉困難（B）和容易捕捉

（A）兩大類。

3 結(jié)果與分析

3.1 樣帶（樣方）法調(diào)查結(jié)果與分析

3.1.1 不同功能區(qū)黑麂種群密度 通過調(diào)查統(tǒng)計(jì)，其結(jié)果見表 3。不同樣地的黑麂種群密度變化較大，反應(yīng)出黑麂的分布是不均勻的。其中上寮坑樣地密度最高，為10.70±1.58只/km2；黃壇淤樣地密度最小，為4.89±1.28 只/km2；黃基坪和巖坪樣地密度居中，分別為7.58±0.26只/km2、9.83±0.76只/km2，全區(qū)密度平均為8.48±0.75 只/km2。

表3 各樣地黑麂的種群密度Table 3 Population density of M. crinifrons in investigated sample plots

本次調(diào)查區(qū)域涵蓋九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)的核心區(qū)、緩沖區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)。其中上寮坑和巖坪為核心區(qū)；黃基坪為緩沖區(qū)；黃壇淤為實(shí)驗(yàn)區(qū)。由于核心區(qū)、緩沖區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)的棲息地生境狀況、人為干擾程度以及保護(hù)力度等存在差別，黑麂在各區(qū)的分布并不是均勻的。核心區(qū)、緩沖區(qū)、實(shí)驗(yàn)區(qū)黑麂種群密度分別為10.27±1.17、7.58±0.26、4.89±1.28只/km2。

有關(guān)研究表明，生境質(zhì)量對鹿科動(dòng)物種群密度的波動(dòng)起著重要的作用[25-27]。從以上結(jié)果可以看出，黑麂更喜歡選擇在棲息地質(zhì)量優(yōu)越的核心區(qū)地帶活動(dòng)，在緩沖區(qū)內(nèi)黑麂種群密度也維持在比較高的水平，而在實(shí)驗(yàn)區(qū)則較少。除了黑麂喜歡棲息于高海拔外，各功能區(qū)的生境差異是導(dǎo)致黑麂在九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)分布不均勻的主要因素。

3.1.2 不同樣地間黑麂種群密度的差異 計(jì)算4個(gè)樣地中黑麂種群密度及方差，并檢驗(yàn)不同樣地間種群密度的差異。通過方差分析，不同樣地間黑麂種群密度差異極顯著（F = 10.45 > F3,26= 4.64，P < 0.01），種群密度最低的黃壇淤樣地（4.89±1.28）與處于核心區(qū)內(nèi)的上寮坑和巖坪樣地均存在極顯著差異（P < 0.01），與黃基坪樣地存在顯著差異（P < 0.05）。上寮坑、黃基坪、巖坪三個(gè)樣地間的種群密度存在顯著差異（F = 5.07 > F2,21= 3.47，0.01 < P < 0.05），上寮坑、巖坪樣地的密度高于黃基坪樣地。從以上結(jié)果可以看出，黑麂在九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)廣泛分布，而主要集中分布在上寮坑、巖坪一帶，黃基坪等周邊地帶為黑麂的次要分布區(qū)，其余地區(qū)為一般分布區(qū)。

本次調(diào)查結(jié)果與2002年至2003年的調(diào)查結(jié)果[1]相比，各樣地黑麂種群密度均有增加，黃壇淤、上寮坑、巖坪和黃基坪4個(gè)樣地分別增加了1.68、1.96、1.75和1.33只/km2，全區(qū)黑麂密度為8.48±0.75只/km2，全區(qū)面積為55.25 km2，黑麂數(shù)量為469±41只，資源量有所增加。

3.2 紅外相機(jī)調(diào)查結(jié)果與分析

對紅外相機(jī)所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析，結(jié)果見表4。全區(qū)域黑麂的日拍攝率為2.08次/d，其中核心區(qū)黑麂的日拍攝率最高，為1.68次/d，其中七樹坑樣地日拍攝率居核心區(qū)首位，達(dá)0.69 次/d；緩沖區(qū)的黃基坪日拍攝率最低，為0.10次/d；實(shí)驗(yàn)區(qū)為0.3次/d。通過不同區(qū)域的日拍攝率，可以大致看出核心區(qū)的黑麂密度比緩沖區(qū)及實(shí)驗(yàn)區(qū)明顯要高。但此次發(fā)現(xiàn)作為緩沖區(qū)的黃基坪日拍攝率反而比實(shí)驗(yàn)區(qū)的黃壇塢要低。原因可能是因黃基坪所設(shè)置樣地小，相機(jī)布置量少造成的。紅外相機(jī)的日拍攝率能大致對不同區(qū)域黑麂密度進(jìn)行對比，但由于受到樣地選擇，相機(jī)擺放方式等因素影響，只能作為密度大小判斷的一個(gè)依據(jù)，具體黑麂密度應(yīng)結(jié)合樣地法和DNA指紋技術(shù)進(jìn)行調(diào)查計(jì)算。

表4 九龍山國家自然保護(hù)區(qū)不同區(qū)域紅外相機(jī)捕捉的黑麂日拍攝頻率Table 4 Capture rate of M. crinifrons in different sample plots

3.3 DNA指紋技術(shù)調(diào)查結(jié)果與分析

DNA指紋技術(shù)調(diào)查結(jié)果見表5，得出的內(nèi)北坪、黃基坪和黃壇塢樣地的平均密度分別代表核心區(qū)、緩沖區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)的密度，全區(qū)黑麂資源量為492只。

表5 DNA 指紋技術(shù)調(diào)查的黑麂數(shù)量Table 5 Numbers of M. crinifrons obtained by DNA

樣帶（樣線）法估算出黑麂資源量為469±41只，DNA指紋技術(shù)法結(jié)果顯示保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂資源量為492只。綜合以上黑麂數(shù)量的調(diào)查方法，九龍山自然保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂資源為420～520只。

4 黑麂的資源評價(jià)與保護(hù)

1999-2000年，浙江省黑麂專項(xiàng)調(diào)查顯示，浙江省黑麂資源總量為3 500 ～ 4 000只[3]；2002-2003年，鄭祥等[1]對九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)黑麂資源調(diào)查，全區(qū)黑麂種群平均密度為7.32±0.69只/km2，為404±38只；2012-2013年，對黑麂資源調(diào)查顯示，九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)的黑麂種群平均密度為7.93±0.75只/km2，數(shù)量為420 ～ 520只。本次調(diào)查結(jié)果與以往相比，九龍山保護(hù)區(qū)內(nèi)黑麂的數(shù)量在增加，說明九龍山棲息環(huán)境利于黑麂的生存和繁殖，九龍山保護(hù)區(qū)對黑麂的保護(hù)工作是卓有成效的。

為了更好地發(fā)揮自然保護(hù)區(qū)的作用，對九龍山黑麂資源的保護(hù)提出以下建議：

（1）開展常規(guī)化的黑麂種群數(shù)量動(dòng)態(tài)監(jiān)測。建議每5 a復(fù)查一次，有利于掌握黑麂種群數(shù)量的變化規(guī)律，以制定和調(diào)整相應(yīng)的保護(hù)對策和措施。

（2）加強(qiáng)對保護(hù)區(qū)黑麂棲息環(huán)境質(zhì)量的監(jiān)測。主要包括黑麂的食物（種類、可利用量、質(zhì)量）、隱蔽所（類型、數(shù)量和質(zhì)量）等變化特征，以確定保護(hù)區(qū)內(nèi)黑麂的環(huán)境容納量。

（3）加強(qiáng)對保護(hù)區(qū)的管理和對黑麂保護(hù)的宣傳。保護(hù)區(qū)在開展保護(hù)、監(jiān)測、減災(zāi)等工作的同時(shí)，可以采用標(biāo)語、警示牌、制作和播放黑麂宣傳保護(hù)視頻等多種形式，加強(qiáng)對周邊地區(qū)居民及過往人員的宣傳教育，使其能主動(dòng)參與黑麂的保護(hù)工作。如果發(fā)現(xiàn)受傷的黑麂，要及時(shí)進(jìn)行救護(hù)。加強(qiáng)與當(dāng)?shù)卣膮f(xié)調(diào)和合作，對保護(hù)區(qū)外圍的山林采取相應(yīng)的保護(hù)措施，以擴(kuò)大黑麂的生存空間。

（4）開展黑麂的人工養(yǎng)殖。在自然保護(hù)區(qū)的實(shí)驗(yàn)區(qū)，可以考慮建立以黑麂為主的珍稀動(dòng)物養(yǎng)殖場。既可以收養(yǎng)沒收、誤傷、誤捕的珍稀野生動(dòng)物，又可以開展黑麂等珍稀動(dòng)物的生物學(xué)研究，馴養(yǎng)和繁殖人工種群，為珍稀動(dòng)物的就地保護(hù)和異地保護(hù)以及資源利用開拓新的途徑。

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Investigation on Distribution of Muntiacus crinifrons in Jiulongshan National Nature Reserve

JI Guo-hua1，ZHENG Wei-cheng1*，WANG Hua1，LIU Ju-lian1，PAN Cheng-chun1，YE Fei-ying1
(1. Jiulongshan National Nature Reserve Administration of Zhejiang, Suichang 323300, China; 2. School of Ecology, Zhejiang Normal University, Jinhua 321004, China)

Investigations on Muntiacus crinifrons resources were conducted from October 2012 to May 2013, by stratified sampling method at 15 transects in the core zone, buffer zone, and experimental zone of Jiulongshan National Nature Reserve of Zhejiang, combined with infrared triggered cameras technology(ITCT) and molecular makers. The result showed that the average density of M. crinifrons was 7.93±0.75/km2in the Jiulongshan, 10.27±1.17/km2in core zone, 7.58±0.26/km2in buffer zone and 4.89±1.28/km2in experimental zone. Analysis of variance demonstrated that there was significant difference among sample plots （F =1 0.45 > F3,26= 4.64，P < 0.01）. The investigation resulted that M. crinifrons distributed widely in Jiulongshan National Nature Reserve.

Muntiacus crinifrons; population density; transect method; infrared triggered camera technology; molecular marker

S718.6

A

1001-3776（2015）04-0001-06

2014-10-12；

：2015-03-20

林業(yè)國家級自然保護(hù)區(qū)中央財(cái)政補(bǔ)助資金（浙財(cái)農(nóng)字〔2010〕174號(hào)）

季國華（1978-），男，浙江遂昌人，助理工程師，從事自然資源保護(hù)工作；*通訊作者。