火炭母藥材薄層鑒別方法的研究

程建國(guó)，侯麗麗，晏永新

（1.山西省飼料獸藥監(jiān)察所山西太原030027；2.江西新世紀(jì)民星動(dòng)物保健品有限公司江西南昌330096）

火炭母藥材薄層鑒別方法的研究

程建國(guó)1，侯麗麗1，晏永新2

（1.山西省飼料獸藥監(jiān)察所山西太原030027；2.江西新世紀(jì)民星動(dòng)物保健品有限公司江西南昌330096）

火炭母藥材現(xiàn)收載《中華人民共和國(guó)獸藥典》2010版二部，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)只有顯微、理化等鑒別方法，按標(biāo)準(zhǔn)制修訂要求，方法應(yīng)控制主要成分或有效成分，現(xiàn)對(duì)火炭母藥材進(jìn)行了薄層鑒別方法研究，并制定了薄層鑒別方法。

火炭母；槲皮素；薄層鑒別

火炭母是蓼科（Polygonaceae）蓼屬（Polygonum）植物火炭母草（Polygonum chinense Linn.)藥用全草或根，別名為火炭毛、烏炭子、山蕎毒草，赤地利等，廣泛分布于我國(guó)南部的福建、廣東等地區(qū)。火炭母性涼，味微酸、澀，有清熱解毒，利濕消滯，涼血止癢之功效，臨床主要用于治療痢疾、腸炎、癤腫、膿皰瘡等[1]?；鹛磕钢饕行С煞职ㄧ摅w類、黃酮類等，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)火炭母對(duì)金黃葡萄球菌、大腸埃氏菌和綠膿桿菌3種菌具有一定體外抑菌活性[2]。火炭母藥材現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)只有顯微、理化等方法，現(xiàn)對(duì)火炭母藥材進(jìn)行了薄層鑒別方法研究。

1 材料和方法

1.1材料

火炭母藥材，購(gòu)自中國(guó)毫州市京皖中藥材市場(chǎng)，產(chǎn)地是廣東、廣西，經(jīng)鑒定為蓼科蓼屬植物火炭母（Polygonum chinense Linn.)。

火炭母對(duì)照藥材（批號(hào)：121477-200501），槲皮素對(duì)照品（批號(hào)100081-200406，供含測(cè)用），均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定院。

1.2 試劑、儀器

瑞氏卡瑪薄層成像系統(tǒng)，YOKO-XR顯色加熱板（武漢藥科新技術(shù)開發(fā)公司），TP-1102電子天平（丹佛儀器（北京）有限公司），BP-211D電子天平（北京賽多利斯天平有限公司），TB-215D電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）。

硅膠G薄層板（批號(hào)20131118，青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)），德國(guó)蓋爾生產(chǎn)TLC硅膠板。甲醇、鹽酸、乙酸乙酯、甲苯、甲酸乙酯、甲酸、三氯化鋁均為分析純，試驗(yàn)用水為純化水。

1.3 樣品制備

1.3.1 供試品溶液制備 取火炭母藥材粉末2 g，加50%甲醇30 mL，加鹽酸1 mL，加熱回流1 h，趁熱濾過，濾液放冷，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯提取液，濃縮至1 mL，作為供試品溶液。1.3.2對(duì)照藥材溶液制備取火炭母對(duì)照藥材2 g，加50%甲醇30 mL，加鹽酸1 mL，加熱回流1h，趁熱濾過，濾液放冷，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯提取液，濃縮至1 mL，作為對(duì)照藥材溶液。1.3.3槲皮素對(duì)照品溶液制備另取槲皮素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

1.4 鑒別方法

1.4.1 點(diǎn)樣量供試品、對(duì)照藥材溶液各10 μL，對(duì)照品5 μL。

1.4.2 展開系統(tǒng)以甲苯（水飽和）-甲酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）為展開劑。

1.4.3 展開方式取10 mL置展一側(cè)，預(yù)飽和15 min，上行展開，取出，晾干。

1.4.4 顯色方式噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈下（365 nm）下檢視。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同產(chǎn)地薄層板，不同黏合劑0.5%羧甲基纖維素鈉、含0.5%～1.0%氫氧化鈉的硅膠板試驗(yàn)比較（圖1-4）。

圖1 含0.5%氫氧化鈉的國(guó)產(chǎn)硅膠G薄層板

圖2 含1%氫氧化鈉的進(jìn)口硅膠G薄層板

圖3 含0.5%氫氧化鈉的進(jìn)口硅膠G薄層板

圖4 含1%氫氧化鈉的國(guó)產(chǎn)硅膠G薄層板

圖譜表明：硅膠G板展開后分離效果沒有含0.5%～1.0%氫氧化鈉的硅膠G板好，清晰，選擇用含0.5%～1.0%氫氧化鈉的硅膠G板，作為試驗(yàn)用薄層色譜板。

2.2 點(diǎn)樣量考察（圖5）

梯度試驗(yàn)表明，不同點(diǎn)樣量供試品斑點(diǎn)差異不明顯，對(duì)照品明顯，尤其是8～10 μL，最后確定供試品10 μL，對(duì)照品5 μL。

2.3 火炭母薄層鑒別方法確定

圖5 不同點(diǎn)樣量梯度實(shí)驗(yàn)

取本品粉末2 g，加50%甲醇30 mL,加鹽酸1 mL，加熱回流1 h，趁熱濾過，濾液放冷，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯提取液濃縮至1 mL，作為供試品溶液。另取火炭母對(duì)照藥材2 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取槲皮素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種供試品溶液10 μL、對(duì)照品溶液5 μL，分別點(diǎn)于同一含0.5%的氫氧化鈉的硅膠G薄層板上，以甲苯（水飽和）-甲酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈下（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

3 結(jié)論與討論

本方法鑒別火炭母中槲皮素化合物方法可行，斑點(diǎn)圓整、清晰、分離好，無(wú)拖尾，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)?？梢宰鳛榭刂苹鹛磕钢虚纹に貦z測(cè)指標(biāo)之一，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中?！觯ň庉嫞黑w曉松）

[1] 林志云,李書淵,張崗.火炭母的生藥學(xué)研究[J].現(xiàn)代食品與藥品雜志,2006,16(4):15-16.

[2] 胡廷秀,胡珊,杜澤林,汪明月.新中獸藥制劑病菌凈口服液質(zhì)檢鑒別實(shí)驗(yàn)研究[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2004（1）:44.

[3] 廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)（1997版).[S].

[4] 中國(guó)獸藥典（2010版，二部）.[S].

Study on Identification Methods of the Polygonum Chinensis L.of Thin-layer Chromatography

Cheng Jianguo1,Hou Lili1,Yan Yongxin2
（1.Shanxi Institute of Veterinary Drug Control,Taiyuan Shanxi 030027; 2.Jiangxi New Century Minxing Animal Health Products co.,LTD,Nanchang Jiangxi 330096)

Polygonum chinensis L.had been recorded in chinese veterinary pharmacopoeia(second part,2010 edition),the current standard contains microscopic,physical and chemical method.According to the requirements of standards,drug quality standard should be controlled main ingredients or active ingredients.Now study on identification methods of the polygonum chinensis L.of thin-layer chromatography,and made identification methods of the polygonum chinensis L.of thin-layer chromatography.

Polygonum chinensis L.;Quectitrin;Chromatography identification

10.3969/j.issn.1008-4754.2015.05.037