CD64感染指數(shù)和降鈣素原在老年慢性阻塞性肺病急性加重患者細(xì)菌感染中的診斷價(jià)值

·呼吸·消化系統(tǒng)疾病·

CD64感染指數(shù)和降鈣素原在老年慢性阻塞性肺病急性加重患者細(xì)菌感染中的診斷價(jià)值

朱建俊1姚一楠周建婭周建英

(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科，浙江杭州310003)

摘要〔〕目的探索CD64感染指數(shù)聯(lián)合降鈣素原(PCT)對(duì)老年慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者細(xì)菌感染的診斷價(jià)值。方法66例AECOPD患者分為細(xì)菌感染組38例和非細(xì)菌感染組28例，另設(shè)健康對(duì)照組30例。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)治療前后各組外周血中粒細(xì)胞表面CD64表達(dá)強(qiáng)度，獲得CD64 感染指數(shù)，并通過(guò)免疫熒光雙抗體夾心法測(cè)定血清PCT水平。結(jié)果細(xì)菌感染組CD64指數(shù)和PCT水平均顯著高于非細(xì)菌感染組和對(duì)照組(P<0.05)；非細(xì)菌感染組和對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；細(xì)菌感染組治療后CD64感染指數(shù)和PCT水平均顯著低于治療前(P<0.05)；治療后CD64感染指數(shù)和PCT水平與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論CD64 感染指數(shù)聯(lián)合PCT可為老年AECOPD患者細(xì)菌感染的診斷和鑒別提供一定的依據(jù)，有助于指導(dǎo)抗菌藥物的合理應(yīng)用。

關(guān)鍵詞〔〕慢性阻塞性肺疾病急性加重；CD64；降鈣素原

中圖分類號(hào)〔〕R563〔

基金項(xiàng)目：浙江省中醫(yī)藥科學(xué)研究基金資助(No.2011ZB068);教育部2012年度高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金項(xiàng)目(No.20120101110008)

通訊作者：周建英(1956-)，女，主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，主要從事重癥呼吸道感染、細(xì)菌耐藥及機(jī)制研究。

1杭州市余杭區(qū)第二人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科

第一作者：朱建俊(1981-)，男，主治醫(yī)師，在讀碩士，主要從事呼吸病感染學(xué)研究。

慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的誘因主要有上呼吸道病毒感染、氣管-支氣管感染及空氣污染等〔1～3〕，其中細(xì)菌感染占AECOPD發(fā)生的40%～50%〔4〕。由于病原學(xué)資料較滯后，臨床上對(duì)于AECOPD仍然以經(jīng)驗(yàn)抗感染治療〔5〕。因此，確定反映AECOPD患者存在細(xì)菌感染的標(biāo)志物對(duì)于抗感染治療有一定的指導(dǎo)意義。目前臨床中常用的指標(biāo)有白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞百分比(N%)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和降鈣素原(PCT)等，除PCT外均為非特異性指標(biāo)。PCT是目前常用的診斷AECOPD細(xì)菌感染的一個(gè)重要炎癥指標(biāo)〔1，3〕。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)細(xì)菌感染時(shí)中性粒細(xì)胞CD64 表達(dá)顯著增加，其特異性和敏感性高于其他炎性反應(yīng)指標(biāo)，在感染性疾病診斷中具有一定的應(yīng)用價(jià)值〔6，7〕。PCT和CD64感染指數(shù)均可作為診斷感染性疾病的標(biāo)志物，但兩者在臨床應(yīng)用中的相互關(guān)系，尚缺少相關(guān)研究。本文通過(guò)測(cè)定老年AECOPD患者中CD64指數(shù)與PCT水平，探討兩者在AECOPD細(xì)菌感染中的診斷價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料2013年1月至2014年1月我院66例老年AECOPD患者，COPD診斷和分期以中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制定的COPD診治指南〔8〕為標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①X線胸片檢查存在肺炎；②入選前4 w內(nèi)使用抗生素；③COPD加重病程已>5 d；④呼吸系統(tǒng)以外的其他部位存在細(xì)菌感染。該研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。男38例，女28例，平均年齡(66.5±3.5)歲，根據(jù)痰中下呼吸道潛在病原菌濃度≥107cfu/ml為AECOPD下呼吸道細(xì)菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔9〕，分為感染組(外周血WBC≥10×109/L、中性粒細(xì)胞百分比≥75%)和非感染組(外周血WBC<10×109/L、中性粒細(xì)胞百分比<75%)；對(duì)照組為30例健康體檢者，男18例，女12例，平均年齡(65.3±6.2)歲。3組年齡、性別、吸煙均無(wú)差異(P>0.05)，感染組和非感染組肺功能無(wú)差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。所有AECOPD患者入院時(shí)即刻采血、留痰，然后再給予吸氧、止咳化痰、抗感染等常規(guī)治療。

表1　各組一般資料比較 ± s)

FEV1：1 s用力呼氣容積；TVC：用力肺活量

1.2誘導(dǎo)痰處理采用超聲霧化吸入高滲氯化鈉溶液誘導(dǎo)痰液，對(duì)合格痰標(biāo)本涂片(每個(gè)低倍視野白細(xì)胞>25個(gè)，鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè))進(jìn)行定量培養(yǎng)。

1.3CD64感染指數(shù)取流式檢測(cè)管2支，分別加入20 μl CD64-FITC單克隆抗體(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司)和同型對(duì)照，后加100 μl抗凝全血，混勻后于室溫暗處15 min，溶血10 min，置流式細(xì)胞儀檢測(cè)(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特Navios流式細(xì)胞儀)。每份樣本計(jì)數(shù)10 000個(gè)以上細(xì)胞，以淋巴細(xì)胞為內(nèi)部陰性對(duì)照，進(jìn)行 CD64 感染指數(shù)(粒細(xì)胞 CD64 平均熒光強(qiáng)度/淋巴細(xì)胞 CD64 平均熒光強(qiáng)度)的計(jì)算。

1.4PCT檢測(cè)采用免疫熒光雙抗體夾心法測(cè)定(試劑盒由廣州萬(wàn)孚生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn))，以0.5 ng/ml為PCT臨界值，大于臨界值為陽(yáng)性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和方差分析。

2結(jié)果

2.1痰細(xì)菌學(xué)結(jié)果38例痰培養(yǎng)出病原菌，且痰中病原菌濃度≥107cfu/ml。流感嗜血桿菌9例、副流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌各7例、卡他莫拉菌5例、金黃色葡萄球菌4例、綠膿桿菌2例、肺炎克雷伯菌3例、鮑曼不動(dòng)桿菌1例。

2.2治療前各組CD64感染指數(shù)和PCT水平感染組 CD64和PCT水平均顯著高于非感染組和對(duì)照組(P=0.003 4，0.004 2)；非感染組和對(duì)照組無(wú)差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　各組治療前CD64感染指數(shù)和PCT水平

與非感染組、對(duì)照組相比:1)P<0.01

2.3感染組治療前、后CD64感染指數(shù)和PCT水平感染組治療后，CD64感染指數(shù)(1.338±0.151)和PCT水平(0.512±0.135)均顯著低于治療前(P=0.003 7、0.002 3)；治療后CD64感染指數(shù)、PCT水平與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

3討論

COPD主要特征為氣流受限，且氣流受限不完全可逆呈進(jìn)行性發(fā)展〔10〕。AECOPD是指在COPD發(fā)展過(guò)程中出現(xiàn)的急性事件，其中以細(xì)菌感染為主，但仍有1/3的AECOPD患者急性加重的因素尚不明確，所以并不是所有的AECOPD患者需要進(jìn)行抗菌治療〔11〕。臨床常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)WBC、ESR、CRP 等特異性不強(qiáng)，在感染性疾病、非感染性炎癥反應(yīng)、自身免疫性等疾病中均可明顯升高，是非特異性炎癥指標(biāo)；痰液細(xì)菌培養(yǎng)雖然比較準(zhǔn)確，但是檢測(cè)過(guò)程耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，影響因素多，病原學(xué)資料難以獲取，不能成為衡量細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)際臨床中，由于難以獲得準(zhǔn)確的病原學(xué)資料來(lái)有效判斷是否有細(xì)菌感染，目前臨床上對(duì)于AECOPD仍然以經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行抗感染治療〔5〕。臨床上迫切需要尋找一個(gè)能夠準(zhǔn)確判斷AECOPD患者是否存在細(xì)菌感染的生物學(xué)標(biāo)志物，從而指導(dǎo)抗菌藥物合理使用。

PCT是一種無(wú)激素的糖蛋白，正常情況下其含量較少，由甲狀腺C細(xì)胞或其他內(nèi)分泌細(xì)胞的前PCT水解產(chǎn)生；當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染和膿毒血癥時(shí)，PCT 則由甲狀腺以外的器官組織產(chǎn)生，含量顯著升高，是有價(jià)值的炎癥標(biāo)志物〔12〕。CD64是IgG Fc段的高親和受體，正常情況下CD64在中性粒細(xì)胞表面低水平表達(dá)，當(dāng)受細(xì)菌細(xì)胞壁的成分脂多糖和粒細(xì)胞集落刺激因子及γ-干擾素等刺激后會(huì)導(dǎo)致其高表達(dá)〔13〕。研究〔14〕表明CD64在敗血癥發(fā)生后24 h之內(nèi)即可明顯升高，對(duì)敗血癥的診斷具有較高的特異性和敏感性，可作為敗血癥早期診斷的檢測(cè)指標(biāo)。Icardi等〔15〕研究指出在非感染性疾病及病毒感染時(shí)中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)不高，而在細(xì)菌感染時(shí)明顯升高，是一種簡(jiǎn)單而有效的識(shí)別細(xì)菌感染的臨床檢測(cè)指標(biāo)。研究表明CD64在感染性疾病的診斷中有較高的敏感性(84%～97%)和特異性(78%～ 92%)〔16，17〕，但CD64指數(shù)的測(cè)定也和其他檢測(cè)方法一樣存在假陽(yáng)性的問(wèn)題，CD64指數(shù)不能完全替代其他實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。本研究發(fā)現(xiàn)，在AECOPD細(xì)菌感染患者中，血清CD64和PCT均升高，都可以作為診斷細(xì)菌感染的標(biāo)志，兩者聯(lián)合檢測(cè)，可能會(huì)提高診斷AECOPD細(xì)菌感染的準(zhǔn)確率。

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〔2014-02-15修回〕

(編輯苑云杰)