PIK3CA、TIEG1在老年卵巢癌組織中的表達及意義

PIK3CA、TIEG1在老年卵巢癌組織中的表達及意義

盧建軍宋建東張林燕

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科,內(nèi)蒙古呼和浩特010050)

摘要〔〕目的比較老年卵巢癌、癌旁組織和正常卵巢組織的磷脂酰肌醇3磷激酶催化亞基α基因(PIK3CA)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-1誘導的早期反應基因(TIEG1)表達差異及其與卵巢癌病理特征間的相關性。方法手術治療的40例老年宮頸癌患者手術過程中均取適量卵巢癌組織、癌旁組織和正常卵巢組織，行石蠟切片。比較三種組織的PIK3CA、TIEG1表達差異及其與卵巢癌病理特征間的相關性。結果三種組織的PIK3CA陽性表達有顯著性差異(χ2=50.76，P<0.01)，卵巢癌陽性表達最高，正常卵巢組織最低；三種組織的TIEG1陽性表達有顯著性差異(χ2=26.27，P<0.01)，其中卵巢癌最低，正常卵巢最高。卵巢癌組織的PIK3CA陽性表達與組織學分級(χ2=10.72，P=0.005)、淋巴結轉(zhuǎn)移(χ2=4.191，P=0.041)均有顯著的相關性；TIEG1陽性表達率與組織學分級(χ2=9.462，P=0.009)、淋巴結轉(zhuǎn)移(χ2=9.724，P=0.002)也有顯著的相關性。結論PIK3CA、TIEG1在卵巢癌中的表達與正常卵巢組織有顯著性差異，兩者與卵巢癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移有一定相關性。

關鍵詞〔〕PIK3CA；TIEG1；卵巢癌

中圖分類號〔〕R737〔

基金項目：內(nèi)蒙古衛(wèi)生廳2010年醫(yī)療衛(wèi)生科研計劃項目任務書項目(No.2010124)

通訊作者：宋建東(1967-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事老年卵巢腫瘤的臨床研究。

第一作者：盧建軍(1974-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事老年卵巢腫瘤的臨床研究。

目前，普遍認為在結腸癌、乳腺癌、腦癌、肺癌等各種實體腫瘤的發(fā)生發(fā)展中磷脂酰肌醇3磷激酶催化亞基α基因(PIK3CA)有著重要的作用〔1〕。但在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中PIK3CA基因的作用不顯著，尚不清楚卵巢癌中PIK3CA表達有無增強，與腫瘤病理的分型具有何種關系〔2〕。目前，有學者從生物學的角度認為轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-1誘導的早期反應基因(TIEG)1相似于TGF-1，可誘導凋亡、對細胞增殖過程進行有效抑制，是一種TGF-β早期誘導基因，其表達水平的下降與多種腫瘤(如胰腺癌、胃癌、乳腺癌等)發(fā)生和發(fā)展密切相關〔3〕。本研究觀察老年卵巢癌患者行手術切除的卵巢癌、癌旁組織和正常卵巢組織的PIK3CA、TIEG1表達差異，并分析其表達與卵巢癌病理特征間的相關性。

1資料與方法

1.1一般資料2010年2月至2013年5月我院接受手術治療的40例老年宮頸癌患者，年齡60～80周歲，年齡(68.1±7.1)歲,體質(zhì)指數(shù)(BMI)22.2 kg/m2,空腹血糖(10.1±2.5)mmol/L,總膽固醇6.25 mmol/L,甘油三酯1.64 mmol/L,腫瘤發(fā)現(xiàn)時間(2.1±.1)個月,手術時間120.2 min,術中出血量259.8 ml。每例患者手術過程中均取適量卵巢癌組織、癌旁組織和正常卵巢組織，行石蠟切片。

1.2研究方法組織切片常規(guī)脫蠟至水，對內(nèi)源性過氧化物酶消除活性，在室溫下孵育和抗原修復(AR)，然后將稀釋(1∶100)過的一抗和棄一抗依次注入，用pH為7.2～7.4的PBS(0.01 mol/L)沖洗3次(3 min/次)，接著注入二抗生物素標記(經(jīng)1%的BSA-PBS 1∶100稀釋)，37℃下行30 min孵育，最后注入辣根酶(經(jīng)PBS 1∶100稀釋)對鏈霉卵白素進行標記，同樣37℃下行30 min孵育，共3次、5 min/次，PBS緩沖液沖洗。實施SP法，DAB顯色劑和蘇木素再次染色。依據(jù)SP試劑盒的說明書嚴格進行操作，陽性對照為PIK3CA、TIEG1的陽性切片；陰性對照為緩沖液PBS。觀察正常的卵巢組織、卵巢癌以及癌旁組織的切片(由2名病理醫(yī)師完成)。隨機從每張切片中獲取高倍視野5個，每個需進行不低于100個細胞數(shù)的觀察。依據(jù)鏡下染色的陽性細胞數(shù)的百分比：陽性細胞比例<30%(+)，陽性細胞比例30%～60%()，陽性細胞比例>60%()，無陽性細胞(-)。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗。

2結果

2.1卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織的PIK3CA、TIEG1表達比較卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織標本的PIK3CA陽性表達有顯著性差異(P<0.01)，卵巢癌陽性表達最高，正常卵巢組織最低；三種組織的TIEG1陽性表達有顯著性差異(P<0.01)，其中卵巢癌最低，正常卵巢最高。見表1。

表1　卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織的

2.2卵巢癌組織PIK3CA、TIEG1陽性表達與病理特征相關性卵巢癌組織的PIK3CA、TIEG1陽性表達與組織學分級、淋巴結轉(zhuǎn)移均有顯著的相關性(P<0.05)。見表2。

表2　卵巢癌組織PIK3CA、TIEG1陽性表達與

3討論

本實驗說明卵巢癌的發(fā)生中PIK3CA過度表達起著關鍵性作用〔4〕。在各種病理組織中，pAkt與PIK3CA表達呈正比例關系，此提示PI3K/Akt信號通路的活性受PIK3CA表達水平的影響，以往的研究顯示PI3K/Akt信號通路中蛋白PI3Kp110是主要成員〔5〕，因此，PI3Kp110催化活性的加強受PIK3Ca的表達水平升高影響，磷酸化Akt，最終使PI3K/Akt信號的傳導通路被激活，促使了卵巢腫瘤的發(fā)生〔6〕。由于Akt過度表達可以誘導上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，提供了組織轉(zhuǎn)移和侵襲所需的運動能力，所以pAkt在PI3K/Akt信號通路中起著調(diào)節(jié)細胞(細胞侵襲和運動、凋亡、增殖和生長)的重要作用〔7〕。卵巢癌的分化程度越低，相應的PIK3CA陽性表達率越高，提示PIK3CA過度表達影響著癌細胞的分化程度〔8〕。而卵巢癌發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移的腫瘤組織的PIK3CA陽性表達率更高，提示PIK3CA與卵巢癌腫瘤組織的轉(zhuǎn)移也有著密切的關系〔9〕。

最早獲取的TIEG來自于成骨細胞，TIEG1的羧基末端有鋅指DNA結合的原件3個，可對其他基因啟動子內(nèi)的DNA序列(富含GC)進行直接調(diào)控，進而參與腫瘤的形成和細胞分化、凋亡、增生的過程〔10〕。大量的研究顯示，TIEG1的過度表達可促進磷酸化Smad2表達，阻礙Smad7的表達水平，影響著腫瘤的發(fā)生及發(fā)展〔11〕。有研究認為，TIEG1的低表達密切影響著多種腫瘤(如胰腺癌、胃癌和乳腺癌等)的發(fā)生發(fā)展〔12〕。TIEG1和TGF-1N可聯(lián)合Stathmin啟動子DNA的結合位點，阻礙啟動子的活性，進而對Stathmin蛋白(一種胞質(zhì)磷蛋白)進行負性調(diào)節(jié)，從而對腫瘤增殖起一定的抑制作用〔13〕。本研究結果也發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中的TIEG1陽性表達明顯低于癌旁組織和正常卵巢組織，與國內(nèi)外的相關研究結果一致〔14〕。研究還發(fā)現(xiàn)卵巢癌的分化程度越低，其相應的TIEG1表達也越低，提示了TIEG1的表達對于腫瘤的分化有著一定的影響，結果還發(fā)現(xiàn)TIEG1與腫瘤的轉(zhuǎn)移與否也有著一定的相關性〔15〕。

4參考文獻

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〔2013-12-11修回〕

(編輯苑云杰)