針刺對(duì)哮喘模型大鼠呼吸功能的影響

針刺對(duì)哮喘模型大鼠呼吸功能的影響

孫娜崔建美劉慧娟林清高秀娟

(河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，河北唐山063000)

摘要〔〕目的觀察針刺大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞對(duì)哮喘模型大鼠呼吸功能的影響。方法用卵蛋白誘導(dǎo)哮喘大鼠模型，針刺組針刺大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞,隔日1次；假針刺組針刺只刺入皮下1 mm，不予行針。2 w后，用卵蛋白激發(fā)氣道高反應(yīng)性，測(cè)定大鼠肺功能變化。結(jié)果針刺組大鼠肺順應(yīng)性、彈性阻力、每分通氣量與呼吸率均有所改善，而假針刺組無(wú)明顯改善。結(jié)論針刺大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞能有效減慢呼吸頻率,改善呼吸功能,對(duì)哮喘大鼠有明顯的治療作用，而僅刺入皮下的假針刺組則無(wú)此效果。

關(guān)鍵詞〔〕針刺；哮喘大鼠模型；肺順應(yīng)性；彈性阻力

中圖分類號(hào)〔〕R246.1〔

基金項(xiàng)目：河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃項(xiàng)目(2014191；201340701)；河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(C2010001797)

通訊作者：崔建美(1978-)，女，博士，副教授，主要從事針灸教學(xué)及針灸效應(yīng)的研究。

第一作者：孫娜(1981-)，女，碩士，講師，主要從事針灸的基礎(chǔ)與臨床研究。

哮喘是臨床最常見(jiàn)的慢性氣道非特異性炎癥性疾病，發(fā)病原因尚不清楚，從哮喘發(fā)病機(jī)制上尋找特異性防治和根治哮喘的方法一直是人們努力的方向。中醫(yī)尤其是針灸防治哮喘的大量臨床報(bào)道療效肯定了其對(duì)哮喘的治療作用〔1，2〕。本實(shí)驗(yàn)觀察針刺大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞對(duì)哮喘大鼠肺順應(yīng)性、彈性阻力、每分通氣量、呼吸率的影響。

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)雄性SD大鼠40只，體重(120±10)g，由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司提供〔(SCXK(津)2009-0001)〕;飼養(yǎng)于河北聯(lián)合大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施中〔(SYXK(冀)2010-0038)〕，環(huán)境溫度20℃～25℃，濕度60%～70%，通風(fēng)良好。飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司提供〔(SCXK(京)2009-0008)〕，飲水為超濾系統(tǒng)處理的無(wú)菌水。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采取“3R”原則進(jìn)行飼養(yǎng)及使用，并給予人道主義的關(guān)懷。

1.2實(shí)驗(yàn)儀器及試劑medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(南京美易科技有限公司)；TDL-5-A型離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；華佗牌0.35 mm×25 mm毫針。卵蛋白(Sigma公司，批號(hào)A5378)； Al(OH)3凝膠(天津歐博凱化工有限公司，批號(hào)：20110711)。

1.3分組實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(A組)、哮喘模型組(B組)、針刺組(C組)、假針刺組(D組)共4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組10只。

1.4哮喘模型制作與針刺方法B組、C組、D組一次性腹腔注射含卵蛋白1 mg和Al(OH)310 mg的生理鹽水1 ml,2 w后B組、C組、D組于頸外靜脈內(nèi)注射卵蛋白(5 mg/kg)激發(fā)哮喘發(fā)作〔3〕。C組自造模之日起,針刺大椎、肺俞(雙側(cè))、風(fēng)門(mén)(雙側(cè)),用75%酒精消毒后刺入8 mm，平補(bǔ)平瀉，每次留針20 min,每隔5 min行針1次(以200次/min捻轉(zhuǎn)速度捻針20次為行針1次),隔日針刺1次,共針刺7次。D組針刺穴位同C組，只刺入皮下1 mm，不予行針，留針20 min。

1.5呼吸功能的檢測(cè)大鼠腹腔注射10%的水合氯醛(3.5 ml/kg)麻醉后，用橡皮筋捆綁四肢后仰臥位固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，剪開(kāi)頸部皮膚,暴露左側(cè)頸外靜脈，用靜脈留置針行頸靜脈穿刺并固定,用于注射卵蛋白。暴露氣管和食管,剪斜口,插入氣管插管和食管插管,用手術(shù)線扎緊固定,連接呼吸流量測(cè)定儀和血壓換能器,連接計(jì)算機(jī),打開(kāi)medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，準(zhǔn)備測(cè)定。各組大鼠穩(wěn)定5 min后,連續(xù)采樣3 min，將其平均值作為激發(fā)前正常數(shù)據(jù)，然后以5 mg/kg體重為標(biāo)準(zhǔn)，B組、C組、D組于頸外靜脈內(nèi)注射卵蛋白，進(jìn)行激發(fā)。激發(fā)后，連續(xù)采樣30 min,由計(jì)算機(jī)系統(tǒng)分析計(jì)算肺順應(yīng)性、氣道彈性阻力、每分通氣量與呼吸率。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析及LSD檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1 大鼠哮喘模型的復(fù)制結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。卵蛋白激發(fā)前，A組與B組肺順應(yīng)性(P=0.605)與氣道彈性阻力(P=0.05)無(wú)明顯差異。卵蛋白激發(fā)后,B組大鼠氣道彈性阻力上升(P=0.00)、肺順應(yīng)性下降(P=0.00)。

2.2針刺對(duì)哮喘大鼠肺順應(yīng)性、氣道彈性阻力、每分通氣量與呼吸率的影響見(jiàn)表1。B組與C組相比肺順應(yīng)性(P=0.00)、每分通氣量(P=0.00)增加，氣道彈性阻力(P=0.00)減小，呼吸率(P=0.00)減慢。C組與B組相比肺順應(yīng)性(P=0.20)、氣道彈性阻力(P=0.90)、每分通氣量(P=0.14)、呼吸率(P=

0.91)無(wú)明顯改變。針刺大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞能有效減慢呼吸頻率,改善呼吸功能,對(duì)哮喘大鼠有明顯的治療作用，而假針刺組則無(wú)此明顯改變。

-3、-1表示卵蛋白激發(fā)前3 min和1 min，下圖同 圖1　卵蛋白激發(fā)對(duì)哮喘模型大鼠肺順應(yīng)性的影響

圖2　卵蛋白激發(fā)對(duì)哮喘模型大鼠氣道彈性阻力的影響

組別肺順應(yīng)性(ml/cmH2O)彈性阻力(cmH2O/ml)每分通氣量(ml)呼吸率(次/min)A組9.497±0.3150.267±0.0130.129±0.01878.1±3.9B組6.363±0.4991)0.546±0.0131)0.086±0.0111)3)130.1±5.11)C組8.4±0.3372)0.277±0.0132)0.126±0.0232)81.9±2.22)D組6.975±0.4371)3)0.572±0.0091)3)0.085±0.0111)3)129.9±5.21)3)F/P值122.330/0.00089.94/0.00021.788/0.000452.007/0.000

與A組比較：1)P<0.05，與B組比較：2)P<0.05；與C組比較：3)P<0.05

3討論

支氣管哮喘屬中醫(yī)的哮證,喘證,咳嗽,肺脹等范疇，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,但廣泛氣道狹窄是產(chǎn)生哮喘臨床癥狀最重要的基礎(chǔ)，其主要表現(xiàn)為氣道阻力增加和肺順應(yīng)性下降。針刺選取大椎、風(fēng)門(mén)、肺俞3個(gè)穴位,大椎為督脈、手足三陽(yáng)經(jīng)交會(huì)穴位,風(fēng)門(mén)系足太陽(yáng)膀胱經(jīng)和督脈交會(huì)穴，肺俞為足太陽(yáng)膀胱經(jīng)之背俞穴。 三穴在治療哮喘時(shí)常配伍應(yīng)用且屢收奇效〔4〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明針刺可以改善哮喘大鼠的呼吸道狹窄情況，為針刺治療哮喘的機(jī)制之一。假針刺對(duì)于哮喘大鼠無(wú)治療效果，說(shuō)明針刺得氣是針灸起到治療作用的關(guān)鍵，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

4參考文獻(xiàn)

1韓健.針刺魚(yú)際穴對(duì)支氣管哮喘患者肺功能的影響及即刻平喘效應(yīng)觀察〔J〕.中國(guó)針灸，2012；32(10)：891-4.

2譚程，趙吉平，張昶.近十年針刺治療支氣管哮喘的臨床及實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀〔J〕.針刺研究，2011；36(4)：302-12.

3崔龍?zhí)O,楊永清,馬淑蘭,等.過(guò)敏性哮喘大鼠模型的制備〔J〕.上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2000；20(2):69-71.

4邵素菊，權(quán)春分，邵素霞，等.一腔熱血育桃李，妙手回春濟(jì)黎民〔J〕.中國(guó)針灸，2010；30(8)：687-91.

〔2013-11-06修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢(mèng)園)