改良加工工藝對(duì)建立SD大鼠缺鐵性貧血模型影響的研究

趙偉健，黎雄才，朱葉萌，張富發(fā)

（廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，廣東佛山 528248）

改良加工工藝對(duì)建立SD大鼠缺鐵性貧血模型影響的研究

趙偉健，黎雄才，朱葉萌，張富發(fā)

（廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，廣東佛山 528248）

目的：本次研究為了改良低鐵飼料配置方法，優(yōu)化加工工藝，改善產(chǎn)品的成型效果，飼喂低鐵飼料輔助少量放血法，建立SD大鼠缺鐵性貧血模型，觀察發(fā)展過(guò)程中體態(tài)和行為變化，對(duì)比不同配方的造模效果。方法：結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組比較各項(xiàng)缺鐵性貧血指標(biāo)極顯著差異（P＜0.01），配方1和配方2比較各項(xiàng)缺鐵性貧血指標(biāo)下降顯著差異（P＜0.05）。結(jié)論：配方1和配方2均造模成功，經(jīng)過(guò)改良配置的低鐵飼料同樣能夠達(dá)到很好的造模效果，而且效果更顯著。

低鐵飼料；放血法；缺鐵性；貧血

缺鐵性貧血（iron deficiency anemia，IDA）是當(dāng)今世界上危及人類（尤其是兒童）健康的問(wèn)題之一，是體內(nèi)鐵的儲(chǔ)存不能滿足正常紅細(xì)胞生成的需要而發(fā)生的貧血。是由于鐵攝入量不足、吸收量減少、需要量增加、鐵利用障礙或丟失過(guò)多所至。形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血。本次研究是通過(guò)優(yōu)化低鐵飼料的配置方法，建立SD大鼠IDA模型。

1 材料與方法

1.1 低鐵飼料配置（參考AOAC配方和文獻(xiàn)）

配方1：EDTA處理酪蛋白15%，大米粉（梗稻）70%，玉米油5%，明膠5%，混合礦物鹽（不含鐵）3.5%，復(fù)合維生素1.2%，DL-蛋氨酸0.3%。EDTA處理酪蛋白的制備：用去離子水配制1%的EDTA-Na2水溶液；將酪蛋白過(guò)20目篩，用1%EDTA-Na2溶液浸泡過(guò)夜；撈出酪蛋白放入布袋中，置洗衣機(jī)中脫水；反復(fù)用去離子水沖洗，直至完全洗凈酪蛋白中的EDTA-Na2；脫水后，放入烤箱，80℃烘干，研磨成粉，過(guò)20目篩后備用。根據(jù)此配方加工出來(lái)飼料，經(jīng)過(guò)檢測(cè)含鐵量為16.5mg/kg。

配方2：雞蛋清粉17.3%，大米粉（梗稻）70%，玉米油5%，明膠3%，混合礦物鹽（不含鐵）3.5%，復(fù)合維生素1.2%。本配方用雞蛋清粉代替EDTA處理酪蛋白，不用添加DL－蛋氨酸，把原配方中5%明膠降低到3%，同時(shí)更換制粒機(jī)環(huán)模，選擇壓縮比為5的環(huán)模，簡(jiǎn)化了加工步驟，得到比原配方更好的成型效果，根據(jù)此配方加工出來(lái)飼料，經(jīng)過(guò)檢測(cè)含鐵量為12.7mg/kg。具體配比見(jiàn)表1。

1.2 建立SD大鼠缺鐵性貧血模型由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供SPF級(jí)4周齡SD大鼠30只，雌雄各半,體重90～110g，隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2，每組10只，雌雄各半。對(duì)照組飼喂正常鐵飼料（正常鐵飼料由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，鐵含量為352.5mg/kg），實(shí)驗(yàn)組1飼喂配方1，實(shí)驗(yàn)組2飼喂配方2。

1.3 動(dòng)物飼養(yǎng)在本中心SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為：SCXK（粵）2008—0002，飼養(yǎng)溫度與濕度：20～26℃，40%～70%。動(dòng)物自由采食，自由飲用凈化水。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法測(cè)定血紅蛋白（Hb）用氰化高鐵血紅蛋白法，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及紅細(xì)胞MCV（平均紅細(xì)胞容積）、MCH（平均紅細(xì)胞血紅蛋白量）、MCHC（平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度）的測(cè)定按常規(guī)進(jìn)行。第3周起，各組每只每次每周尾靜脈放血1～1.5mL，同時(shí)檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，第8周結(jié)束。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用分組資料t檢驗(yàn)（方差不齊則用平方根值代換，直至達(dá)到方差齊性要求）。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組第八周檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2，與對(duì)照組比較各項(xiàng)缺鐵性貧血指標(biāo)呈極顯著性差異（p＜0.01），實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組1比較各項(xiàng)缺鐵性貧血指標(biāo)呈顯著性差異（p＜0.05）。說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組1和實(shí)驗(yàn)組2均造模成功，而且實(shí)驗(yàn)組2比實(shí)驗(yàn)組1效果更加顯著。

3 討論

本次研究改良低鐵飼料配置方法，優(yōu)化加工工藝，改善產(chǎn)品的成型效果，飼喂低鐵飼料輔助少量放血法，實(shí)驗(yàn)組1和實(shí)驗(yàn)組2的Hb量均逐漸減低，紅細(xì)胞形態(tài)為小細(xì)胞低色素性、MCV、MCH、MCHC各項(xiàng)均下降，說(shuō)明缺鐵性貧血模型建立，同時(shí)也證明改良后的配方和工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品滿足低鐵飼料的要求。用配方1配置低鐵飼料的工藝復(fù)雜，加工過(guò)程需要消耗大量的去離子水，浪費(fèi)大量的人力和物力，而且含鐵量主要受到酪蛋白用EDTA處理和去離子水沖洗效果的影響，如果EDTA處理后沖洗不徹底，也不能達(dá)到良好的效果。用配方2配置的低鐵飼料加工工藝簡(jiǎn)單，選擇蛋清粉比多次用EDTA處理后酪蛋白含鐵量還低，因此得到含鐵量更低的產(chǎn)品，從而能夠達(dá)到更好的造模效果。配方1明膠含量為5%，用壓縮比為7的環(huán)模根本不能得到較好成型效果的產(chǎn)品，最后選擇壓縮比為5的環(huán)模得到很硬的產(chǎn)品，配方2減低了明膠的含量，環(huán)模壓縮比選擇5，因此得到更好的成型效果，或許這個(gè)和明膠的粘度有關(guān)。但本次選用的機(jī)器為鐵構(gòu)造，在加工過(guò)程難免造成一定的污染，如果能用不銹機(jī)器加工，應(yīng)該會(huì)得到更低含鐵量的低鐵飼料。

[1]Williama S.Official methods of analysis of the association of official analytical chemists[M].14th Edition USA，1984.880.

[2]LozoffB，BreittenhamGM.Behaviouralaspectsofirondeficiency. porgHematol，1986，14∶23-53.

[3]李儀奎主編，中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第1版、上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1991∶260-264.

[4]于守洋，等.營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)方法指南[M].北京∶人民衛(wèi)生出版社，1988∶78-80.

表1 低鐵飼料配置

表2 缺鐵性貧血大鼠實(shí)驗(yàn)測(cè)定值（х±s）

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．09.017

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目，編號(hào)2011B060300017作者簡(jiǎn)介：趙偉?。?977～），畜牧師，主要研究方向：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料