血清CK18、CEA、CA19-9在胃癌診斷中的臨床意義*1

楊洪云　王　靜

(1.青島大學醫(yī)學院，山東 青島　266021；2.泰山醫(yī)學院附屬醫(yī)院，山東 泰安　271000)

血清CK18、CEA、CA19-9在胃癌診斷中的臨床意義*1

楊洪云1,2王靜1

(1.青島大學醫(yī)學院，山東 青島266021；2.泰山醫(yī)學院附屬醫(yī)院，山東 泰安271000)

摘要：目的測定胃癌患者血清中CK18、CEA和CA19-9水平并探討其在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為胃癌的診治提供依據。方法采用微粒子化學發(fā)光法和酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測20例健康體檢者、20例胃良性病變患者和40例胃癌患者血清中的CK18、CEA、CA19-9水平，比較三種指標在血清中的變化，分析其在胃癌診斷評估中的價值。應用SPSS22.0統計軟件包進行統計學處理。結果CK18、CEA和CA19-9濃度在胃癌組中顯著大于其在正常組和胃良性病變組中的濃度,存在統計學差異(P<0.05)； CK18在腺癌組表達高于非腺癌組，差異存在統計學意義(P<0.05)，而CEA、CA199在腺癌組與非腺癌組無明顯差異，無統計學意義(P>0.05)。結論血清CK18、CEA和CA19-9的濃度測定對胃癌的診斷具有重要意義；監(jiān)測CK18、CEA和CA19-9的動態(tài)變化，對胃癌患者的療效觀察、預后評估有重要的價值。CK18在胃腺癌組表達高于胃非腺癌組，差異存在統計學意義(P<0.05)。3.在聯合檢測中顯示CK18、CEA和CA19-9三個指標聯合相對于單一指標效果更佳。

關鍵詞：胃癌； 角蛋白CK18；癌胚抗原 ；糖類抗原19-9；

胃癌在中國惡性腫瘤死亡率中排第二，嚴重威脅人民生命健康。[1]因此，許多臨床工作者和醫(yī)學研究人員正努力探索和尋找敏感性高、特異性強的胃癌血清學腫瘤標志物，研究其在胃癌臨床分期與治療過程中的水平變化，以期更好的應用于胃癌的診療中。CEA和CA19-9，CA72-4等作為胃癌的可靠標志物，已被許多研究證實[2-10]。細胞角蛋白18在胃癌診斷中的作用研究較少。聯合檢測CK18、CEA和CA19-9在正常人、胃良性病變、胃癌患者血清中的含量，分析CK18、CEA和CA19-9與胃癌的關系，為胃癌的診斷和治療以及判斷預后提供一定的理論依據。

1資料與方法

1.1一般資料

胃癌組：40例均為2014年1月～2014年10月就診于本院的住院病例，男30例，女10例；年齡最大77歲，最小30，中位年齡64歲；其中管狀腺癌2例，乳頭狀腺癌28例，黏液腺癌2例，印戒細胞癌8例，,全部病例經胃鏡活檢及手術病理確診。良性胃病組：20例均為同期門診或住院患者，男12例，女8例；年齡最大76歲，最小15，中位年齡42歲；胃炎15例，胃潰瘍3例，胃息肉2例；中位年齡49歲，經胃鏡活檢病理確診。健康對照組：20例均為來本院體檢人員(經化驗室及其他項目檢查確定無其他疾病的健康人)，男10例，女10例；年齡最大75歲，最小18，中位年齡52歲。三組一般情況對比無顯著性差異具有可比性。

1.2方法

1.2.1胃癌組：于病情確診收入院后采集空腹靜脈血5 ml，3500 r/min,離心10 min，血清收集-70℃冰箱，用于相關指標的檢測；胃良性病變組：于做胃鏡當日采集空腹靜脈血5 ml， 3500 r/min,離心10 min，血清收集-70℃冰箱，用于相關指標的檢測；健康對照組：收集體檢結果符合要求的血清，血清收集-70℃ 冰箱，用于相關指標的檢測。

1.2.2CK18采用酶聯免疫吸附(ELISA)法進行測定，酶聯試劑盒由齊-生物科技(上海)有限公司提供；CEA 、CA19-9采用微粒子化學發(fā)光法，儀器由美國雅培公司生產的雅培i2000，試劑為專用配套試劑。

1.3統計學處理采用SPSS22.0分析軟件包處理，對各組數據的統計結果進行統計學分析。計量資料采用均數±標準差(±s)來表示，組間比較使用配對t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1胃癌組CK18、CEA和CA19-9測定值與胃良性病變組及健康對照組比較均明顯增高(P<0.05)；胃良性病變組與健康對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。各實驗組CK-18、CEA和CA19-9測定結果見表1。

2.2在胃癌組中，按胃癌的TNM分期進行統計，Ⅲ期、Ⅳ期組CK18、CEA和CA19-9測定值均顯著高于Ⅰ期、Ⅱ期組(P<0.05)。胃癌患者按TNM分期分組CK18、CEA和CA19-9測定結果比較見表2。

2.3在胃癌組中按病理類型進行比較,CK18在腺癌組表達高于非腺癌組，差異存在統計學意義(P<0.05)，CEA和CA19-9差異無統計學意義(P>0.05)。胃癌組中，腺癌與非腺癌CK-18、CEA和CEA測定結果比較見表3。

表1　各組CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

表1　各組CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)健康組200.95±0.311.70±0.8216.08±7.67胃良性病變組201.01±0.421.97±1.3122.16±11.94胃癌組4010.30±11.30※*56.53±152.89△▲259.12±408.17※*

※：P<0.01，與胃良性病變組比較；＊：P<0.01，與健康對照組比較。△：P<0.05，與胃良性病變組比較；▲：P<0.05，與健康對照組比較。

表2　胃癌不同分期CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

表2　胃癌不同分期CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)胃癌I,II期204.64±4.304.99±2.9146.76±23.84胃癌III,IV期2015.97±13.28※108.08±205.86※471.49±496.45※

※：P<0．01，胃癌III，IV期與胃癌I，II期比較。

表3　胃腺癌與非腺癌CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

表3　胃腺癌與非腺癌CK18、CEA和CA199測定結果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)胃非腺癌84.39±3.3323.21±32.96147.36±245.21胃腺癌3211.78±12.13※64.86±169.71287.06±438.17

※：P<0.05，胃腺癌與非腺癌比較

3討論

細胞角蛋白屬于中間絲蛋白家族，是上皮細胞骨架的一部分[12]，可分為20多種不同類型。研究較多的有CK19(CYFRA21-1)和CK18。CK18是一種廣泛存在于上皮細胞,分化特異的用于組成細胞骨架的蛋白質之一，分子量較小。在上皮細胞惡性轉化過程中，角蛋白18被激活的蛋白酶加速降解，大量角蛋白18片段釋放入血液循環(huán)，使得血液中的細胞角蛋白18片段的濃度升高。因此，細胞角蛋白也是上皮性細胞惡變的標志之一，其研究主要在胃癌、結直腸癌、乳腺癌等方面。據相關文獻[6]，CK18在胃癌原發(fā)腫瘤及淋巴結轉移灶中均有較高水平的表達，對病理無轉移的胃癌患者，CK18即可有淋巴結表達。胃癌患者中有淋巴結微轉移、腫瘤直徑大于6 cm、侵及肌層和周圍軟組織、TNM 分期Ⅲ期以上情況，CK18的陽性率尤為高[7]尤其在胃腺癌中陽性率較高[8]。本次實驗結果顯示，胃癌患者血清CK18明顯高于健康人及胃良性疾病組，差異有統計學意義。胃腺癌與其他胃癌比較，血清CK18水平更高，差異有統計學意義。

CEA 是目前腫瘤標志物中研究最為廣泛的，應用時間最長的(約有20年)一種物質。CA19-9，是一種來源?于細胞膜上的單延酸神經節(jié)苷酯，在血清中以唾液粘蛋白形式存在，在人體內分布較廣泛，與消化系惡性腫瘤相關。GaoZL[12]監(jiān)測 40 例胃癌組和20 名健康對照組的血清學腫瘤標志物, 結果顯示 CEA ,CA19-9 水平可作為胃癌轉移和復發(fā)的一種標識。ChoiSR[13]監(jiān)測行胃癌根治術后復發(fā)組和未復發(fā)組的CA19-9，結果顯示, 復發(fā)病例中的 CA19-9 陽性率較高，CA19-9 可作為胃癌根治術后腹腔內復發(fā)的相對特異的標志物之一，在診斷隨訪期間，升高的腫瘤標志物預示腫瘤復發(fā)風險，且對腫瘤術前進行分期、預測其能否手術及其他治療方法的選擇有一定臨床指導價值。本次研究結果與文獻相符，結果如下:(1)胃癌組血清CEA和CA19-9明顯高于胃良性病變組和健康對照組；(2)胃癌組中，處于Ⅲ期、Ⅳ期的CEA和CA19-9測定值均顯著高于Ⅰ期、Ⅱ期(P<0.05)。(3) 針對Ⅰ、Ⅱ期胃癌，以CK18 3.0 ng/ml,CEA 5 ng/ml,CA19-9 37 U/ ml 為cut off, CK18 、CEA和CA19-9陽性率分別為50%(10/20)、50%(10/20)和60%(12/20)，三者聯合檢測對胃癌總的陽性率為80%(16/20)，三者聯合檢測大大提高了胃癌的陽性檢出率。(4)在對胃癌治療后患者的隨訪中發(fā)現，治療后CEA和CA19-9持續(xù)高水平，大部分病例預后差，很快復發(fā)。提示檢測血清CEA和CA19-9與胃癌的病情和發(fā)展和轉移密切相關，動態(tài)監(jiān)測其水平改變對于胃病的良、惡性鑒別具有重要意義；對于胃癌的預后估計和觀察療效更具臨床意義。

綜上所述，CK18可作為胃癌診斷新的免疫學標志物，與胃癌的發(fā)生發(fā)展及預后有著重要關系。聯合和動態(tài)監(jiān)測CK18、CEA、CA19-9對于良、惡性胃病的鑒別及胃癌的病情判斷、療效觀察、預測復發(fā)等具有重要的參考意義。但由于本研究的病例有限，所得數據可能存在一定的局限性， CK18是否能成為胃癌腫瘤標志物大家族中舉足輕重的一員，還需用進一步大量的實驗來證實其在診斷胃癌方面的價值。

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作者簡介：楊洪云(1979—)，女，山東泰安人，主管技師，青島大學醫(yī)學院碩士在讀，主要研究方向：胃癌腫瘤標志物相關研究。

通訊作者：王靜，青島大學免疫學教研室 ，碩士生導師，jingwang686@yahoo.com.cn。

中圖分類號：R73-34

文獻標識碼：A

文章編號：1004-7115(2015)04-0376-03

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2015.04.005

(收稿日期2015-1-15)

The clinical significance of serum CK18、 CEA、CA19-9 in the diagnosis of gastric cancer

YANGHong-yun1,2WANGJing1

(1.The Qingdao University School of Medicine，Qingdao 266021，China； 2. Affiliated Hospital of Taian Medical College， Taian 271000，China)

Abstract:Objective: To explore the clinical significance of serum CK18 CEA and CA19-9 in diagnosis of gastric cancer. Methods: CLIA(chemiluminescence immunology analysis) was used to detect the serum level of markers(CEA ,CA19-9) in 20 cases of healthy persona, 20 cases of benign diseases of stomach(gastritis ,gastric ulcer and polyp of stomach), and 40 cases of gastric cancer). ELISA was used to detect the serum level of CK18 in those people. Results: Levels of CK18 CEA and CA199 in cancer group were higher than those in healthy persona and benign diseases of stomach(P<0.05) . Expression of CK18 in adenocarcinoma was higher than that of non adenocarcinoma group, there were significant differences(P<0.05), And CEA, CA199 in the adenocarcinoma group had no difference with the non cancer group, no statistical significance (P>0.05). Conclusion: The serum concentration of CK18, CEA and CA19-9 determination in diagnosis of gastric cancer has important significance . Dynamic monitoring the changes of CK18, CEA and CA19-9, have important value for the observation of the curative effect evaluation, prognosis of patients with gastric camcer. Expression of CK18 in adenocarcinoma was higher than that of non adenocarcinoma group, there were significant differences(P<0.05). The three markers(CK18, CEA , CA19-9)of combined detection are better effect than single indicators .

Key words:gastric cancer; cytokeratin 18; CEA; carbohydrate antigen19-9