糖尿病腎病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其與eGFR的相關(guān)性

糖尿病腎病患者血清胱抑素C、β2-微球蛋白水平及其與eGFR的相關(guān)性

劉文花劉海霞1胡文博

(青海省人民醫(yī)院腎內(nèi)科，青海西寧810007)

摘要〔〕目的探討糖尿病腎病所致慢性腎臟病(CKD)患者不同時期血清胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋白(β2-MG)的變化特點及臨床意義。方法應(yīng)用免疫比濁法分別檢測各受試對象血清Cys C、β2-MG濃度，采用苦味酸法檢測血清肌酐(Scr)。根據(jù)Scr水平推算腎小球濾過率(eGFR)，按NKF-K/DOQI分期分為5期。結(jié)果Ⅰ期患者血清Cys C、β2-MG及Scr水平與健康對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)意義；Ⅱ期患者血清Cys C、β2-MG與健康對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，Scr水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，Cys C與CKDⅠ期相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。自Ⅲ期開始，各檢測指標(biāo)與健康對照組及CKDⅠ期相比均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)?；颊哐錍ys C、β2-MG與eGFR均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.712、-0.692)。結(jié)論血清Cys C與β2-MG不僅可作為DN患者早期評價GFR的敏感指標(biāo)，且血清Cys C與β2-MG的血液濃度水平對初步估計CKD患者腎損害的程度、指導(dǎo)臨床分期有一定臨床意義。

關(guān)鍵詞〔〕胱抑素C(Cys C)；β2-微球蛋白(β2 -MG)；糖尿病腎病；估算腎小球濾過率

中圖分類號〔〕R58〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

通訊作者：胡文博(1962-)，男，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，主要從事腎臟病學(xué)研究。

1青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院研究生

第一作者：劉文花(1977-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事腎臟疾病臨床研究。

近年來，糖尿病引起的諸多并發(fā)癥越來越受到人們的普遍關(guān)注，糖尿病的慢性并發(fā)癥可引起全身重要臟器的損傷，主要危險靶器官是心、腦、腎。而糖尿病腎病(DN)則是糖尿病所致微血管病變中極其重要、危險的疾病。DN是糖尿病所致嚴(yán)重微血管病變，是以腎小球硬化為主要特征，主要表現(xiàn)為蛋白尿、高血糖、水腫、漸進性腎損害，晚期引起腎衰竭，其嚴(yán)重性僅次于心、腦血管病，是糖尿病患者的主要死因。研究已證明胱抑素(Cys)C、β2-微球蛋(β2-MG)是新的反映腎功能損害的內(nèi)源性標(biāo)志物，與其他內(nèi)源性標(biāo)志物相比具有顯著優(yōu)越性〔1，2〕。本實驗測定DN患者不同時期的CysC、β2-MG水平，觀察CysC、β2-MG在不同階段變化特點、研究其與DN不同階段估算腎小球濾過率(eGFR)的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)：選取2012年10月至2013年12月期間在我院腎內(nèi)科住院明確診斷DN患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有腎臟病、高血壓、高脂血癥、甲狀腺功能異常，肝臟疾病，惡性腫瘤，結(jié)締組織疾病，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS) 的患者，應(yīng)用大劑量糖皮質(zhì)激素者及其他代謝性疾病的患者。入選對象：根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)，共獲取病例300例，男148例，女152例，年齡18～80〔平均(47.07±13.41)〕歲。另隨機抽取我院體檢中心健康體檢者110例作為對照組，男62例，女48例，平均年齡(44.45±13.56)歲，既往無特殊病史，此次體檢無明顯異常者。分期依據(jù)：研究對象臨床分期采用美國NKF-K/DOQI指南CKD分期〔3〕：Ⅰ期：腎損害伴GFR正?；蛏撸琫GFR≥90 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅱ期：腎損害伴GFR輕度降低，eGFR為60～89 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅲ期：腎損害，GFR中度降低，eGFR為30～59 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅳ期：GFR重度降低，為15～29 ml·min-1·1.73 m-2；Ⅴ期：終末期腎病(ESRD)，eGFR<15 ml·min-1·1.73 m-2。

1.2樣本獲?、贉y量記錄臨床資料。②血清標(biāo)本采集：被檢者禁食8～10 h，晨起抽取肘靜脈血5 ml立即加入預(yù)冷的EDTA促凝管，靜置2 h，以3 000 r/min離心10 min后分離血清，-70℃恒溫保存待測。

1.3相關(guān)指標(biāo)檢測

1.3.1血清CysC的測定采用北京豪邁生物工程有限公司提供的CysC測定試劑盒，操作方法：將3 μl樣本和250 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 50 μl混勻后，立即在570 nm波長下讀第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，570 nm波長下讀第二次吸光度值(A2)，計算ΔA=A2-A1。與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)進行比較，求出樣本中CysC含量。

1.3.2血清β2-MG測定采用北京豪邁生物工程有限公司提供的β2-MG測定試劑盒，操作方法：將3 μl樣本和240 μl R1混合，37℃孵育5 min，再加入R2 60 μl混勻后，立即在570 nm波長下讀第一次吸光度值(A1)，37℃孵育5 min，540 nm波長下讀第二次吸光度值(A2)，計算ΔA=A2-A1。與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)進行比較，求出樣本中β2-MG含量。

1.3.3血清肌酐檢測采用德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)的肌酐診斷試劑盒，由我院檢驗科應(yīng)用羅氏Cobas C8000全自動生化分析儀采用苦味酸法檢測。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行one-wayANOVA分析和LSD-t檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析法。

2結(jié)果

2.1各指標(biāo)檢測結(jié)果Ⅰ期患者各檢測指標(biāo)與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)；Ⅱ期患者血清CysC和β2-MG與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，肌酐無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)，CysC與CKDⅠ期比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；自CKDⅢ期開始，患者各檢測指標(biāo)與對照組及CKDⅠ期比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

2.2CysC、β2-MG與eGFR的相關(guān)性分析300例DN患者血清CysC(r=-0.712,P<0.01)、β2-MG(r=-0.092,P<0.01)與eGFR呈中度負(fù)相關(guān)。

表1　各組檢測指標(biāo)結(jié)果比較( ± s)

與對照組比較：1)P<0.01；與CKDⅠ期比較：2)P<0.01；與CKDⅡ期比較：3)P<0.01；與CKDⅢ期比較：4)P<0.01；與CKDⅣ期比較：5)P<0.01

3討論

近年來隨著糖尿病發(fā)病率的不斷升高，DN也隨之逐漸攀升，不僅嚴(yán)重威脅到患者的生命和生存質(zhì)量，也給整個社會的發(fā)展帶來了沉重的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。因此，能夠早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷DN，做到早預(yù)防、早干預(yù)、早治療顯得尤為重要。

一直以來eGFR是評價腎功能損害的金標(biāo)準(zhǔn)，但是目前臨床尚不能直接測定eGFR〔1〕，且DN在Ⅲ期以前GFR基本正常，這給臨床上早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病帶來了困難。而CysC和β2-MG是新的能夠反映eGFR的內(nèi)源性標(biāo)志物，與其他內(nèi)源性標(biāo)志物相比有顯著優(yōu)越性，對腎損害的診斷有重要價值〔2，3〕。李莉等〔4〕研究證實，在腎小球濾過功能輕度受損的患者中，血清CysC水平比尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)更能早期反映腎小球濾過功能的損害，是更為敏感的指標(biāo)。血β2-MG 是一種小分子球蛋白，不易于血漿蛋白結(jié)合，合成穩(wěn)定，不受性別、年齡、肌肉量影響〔5〕，因其可自由通過腎小球，然后在近曲小管內(nèi)幾乎全部被重吸收，故當(dāng)腎小球濾過功能受損時其血中濃度即可升高，成為目前測定腎小球濾過功能最靈敏的指標(biāo)之一〔6〕。

本研究結(jié)果顯示，CKDⅠ期患者血清CysC、β2-MG及Scr水平與對照組相比均無明顯差異。CKDⅡ期患者血清CysC與健康對照組及CKDⅠ期相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，β2-MG與健康對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，Scr水平差異則無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。即CKD患者腎功能輕度損傷(eGFR>60 ml·min-1·1.73 m-2)時，患者血清CysC與β2-MG水平即可升高，而Scr水平與腎功能正常者無顯著差異，提示Scr水平無法有效的反映早期糖尿病腎病患者腎損害，而CysC與β2-MG更為有效。結(jié)果中顯示，自CKDⅢ期開始，患者血清CysC、β2-MG和Scr水平均升高，與報道一致〔7～12〕。 相關(guān)性分析顯示，患者血清CysC和β2-MG水平均為反映腎小球濾過功能的良好指標(biāo)，與腎功能損害程度密切相關(guān)，提示患者CysC和β2-MG水平越高，腎功能越差。而且，本研究結(jié)果顯示，血清CysC與eGFR的相關(guān)系數(shù)較β2-MG高，提示患者血清CysC比β2-MG更能敏感準(zhǔn)確地反映患者腎臟損傷的程度。

綜上所述，CysC和β2-MG是反映DN患者腎損害的敏感指標(biāo)，在DN患者中，CysC和β2-MG比Scr更能早期、準(zhǔn)確地反映出腎功能損害程度。尤其是CKD2期Scr尚處于代償狀態(tài)或肌肉量少等不宜應(yīng)用Scr評價腎損害的患者，彌補了Scr的不足。但據(jù)報道，甲狀腺功能異?；颊呒皯?yīng)用大量糖皮質(zhì)激素的患者可影響機體CysC的水平〔13〕，而惡性腫瘤、肝炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等可影響β2-MG水平，故排除上述因素的影響后，檢測CysC和β2-MG對于早期發(fā)現(xiàn)腎功能損害和準(zhǔn)確評價糖尿病引起腎功能不全各期腎損害程度有一定的指導(dǎo)意義。

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〔2014-06-17修回〕

(編輯曹夢園)