肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及相關(guān)性

肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)及相關(guān)性

王再紅

(秦皇島市海港醫(yī)院呼吸內(nèi)科，山東秦皇島066000)

摘要〔〕目的檢測(cè)肺腺癌中MEL-18、細(xì)胞骨架蛋白(DESTRIN)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)，探討三者表達(dá)的關(guān)系及臨床意義。方法肺腺癌的組織及臨床資料99例作為觀察組，收集距腫物邊緣>5 cm的正常肺組織70例作為對(duì)照組。采用免疫組化方法檢測(cè)兩組中MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達(dá)。結(jié)果觀察組中MEL-18表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組，而DESTRIN和VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率均明顯高于對(duì)照組，觀察組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管內(nèi)癌栓、臨床分期、Ki67的表達(dá)均密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中MEL-18和VEGF的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，而DESTRIN和VEGF 的表達(dá)具有正相關(guān)性。結(jié)論肺腺癌中MEL-18低表達(dá)、DESTRIN和VEGF高表達(dá)，三者具有協(xié)同作用，共同促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。MEL-18具有抑制血管生成的作用，DESTRIN可能具有促進(jìn)血管生成的作用，二者的作用可能均通過(guò)介導(dǎo)VEGF的作用實(shí)現(xiàn)。

關(guān)鍵詞〔〕肺腺癌；(MEL)-18；DESTRIN；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)；免疫組化

中圖分類號(hào)〔〕R734.2〔

第一作者：王再紅(1973-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事呼吸內(nèi)科疾病研究。

肺腺癌具有腺樣分化或有黏液產(chǎn)生，表現(xiàn)為腺泡樣、乳頭樣、細(xì)支氣管肺泡樣，具有黏液形成的實(shí)性巢或者以上述形態(tài)混合生長(zhǎng)的惡性上皮性腫瘤常見(jiàn)于中老年人〔1〕。肺腺癌在發(fā)展過(guò)程中多種蛋白表達(dá)失?！?〕。MEL-18屬于PCG家族的成員，可以抑制C-myc的表達(dá)，引起腫瘤的衰老和凋亡，抑制腫瘤的形成〔3,4〕。DESTRIN在正常組織中表達(dá)極少，在腫瘤中的表達(dá)升高，對(duì)細(xì)胞的遷移、黏附和形態(tài)改變有重要價(jià)值〔5,6〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)對(duì)腫瘤和新生組織中的血管形成有重要價(jià)值〔7,8〕。本實(shí)驗(yàn)對(duì)肺腺癌中MEL-18、細(xì)胞骨架蛋白(DESTRIN)和VEGF的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，關(guān)注其相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月至2013年12月我院行肺腺癌根治手術(shù)的患者99例作為觀察組，男45例，女54例；年齡53～80歲，中位年齡68歲。收集距腫物邊緣>5 cm的正常肺組織70例作為對(duì)照組，男35例，女35例；年齡54～79歲，中位年齡67歲。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差別，具有可比性。

1.2MEL-18、DESTRIN和VEGF的檢測(cè)方法MEL-18和VEGF蛋白的濃縮液均購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)公司，DESTRIN蛋白的濃縮液購(gòu)自美國(guó)ABCAM公司。MEL-18、DESTRIN和VEGF在正式實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最理想表達(dá)的濃度用于正式實(shí)驗(yàn)。MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達(dá)應(yīng)用免疫組化En Vision 二步法，DAB染色。嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，均由病理科技師操作完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制，減少誤差。

1.3MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)的判定方法MEL-18的陽(yáng)性表達(dá)部位是細(xì)胞核，DESTRIN和VEGF陽(yáng)性表達(dá)部位是細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜，計(jì)數(shù)5個(gè)400倍視野，取平均值，以陽(yáng)性率≥5%為陽(yáng)性，<5%為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1觀察組和對(duì)照組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)陽(yáng)性率的比較與對(duì)照組比較，觀察組中MEL-18低表達(dá)、DESTRIN和VEGF高表達(dá)(P<0.000 1)。見(jiàn)表1。

表1兩組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

組別nMEL-18DESTRINVEGF觀察組9930(30.30)73(73.74)80(80.81)對(duì)照組7065(92.86)11(15.71)15(21.43)χ2值65.189355.223458.7405P值<0.0001<0.0001<0.0001

2.2觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)陽(yáng)性率與臨床病理特征的關(guān)系觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管內(nèi)癌栓、臨床分期和Ki67的表達(dá)均密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

表2觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)陽(yáng)性率與臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

分組nMEL-18DESTRINVEGF最大徑 <5cm4820(41.67)31(64.58)34(70.83) ≥5cm5110(19.61)42(82.35)46(90.20) χ2值5.69694.03195.9777 P值0.01700.04460.0145臨床分期 Ⅰ+Ⅱ5221(40.28)33(63.46)37(71.15) Ⅲ+Ⅳ479(19.15)40(85.11)43(91.49) χ2值5.27115.97246.5827 P值0.02170.01450.0103脈管內(nèi)癌栓 無(wú)7126(36.62)48(67.61)53(74.65) 有284(14.29)25(89.29)27(96.43) χ2值4.74264.87396.1426 P值0.02940.02730.0132Ki67表達(dá) <253918(47.50)22(56.41)25(64.10) ≥256012(20.00)51(85.00)55(91.67) χ2值8.48539.976411.5796 P值0.00360.00160.0007淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無(wú)5924(40.68)38(64.41)43(72.88) 有406(15.00)35(87.50)37(92.50) χ2值7.44216.56485.9162 P值0.00640.01040.0150

2.3觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達(dá)的相關(guān)性觀察組MEL-18和VEGF(r=-0.54，P=0.013 2)的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，DESTRIN和VEGF (r=0.50，P=0.019 6)的表達(dá)具有正相關(guān)性。

3討論

肺腺癌為氣道上皮或肺泡上皮來(lái)源的腫瘤，在形成腫瘤中常經(jīng)歷表型轉(zhuǎn)換，使同一腫瘤內(nèi)部?？梢砸?jiàn)到多種形態(tài)和結(jié)構(gòu)〔9,10〕。在此過(guò)程中，多種基因和蛋白進(jìn)行調(diào)節(jié)。MEL-18基因位于17號(hào)染色體長(zhǎng)臂1區(qū)2帶，其編碼的蛋白質(zhì)包含3個(gè)功能域，即位于氨基酸末端的環(huán)指結(jié)構(gòu)、中間部位的HTH螺旋結(jié)構(gòu)和羧基末端的富含脯氨酸和絲氨酸的PS結(jié)構(gòu)域〔11,12〕。研究顯示MEL-18可以直接抑制CylcinD2的活性，抑制CyclinD2與CDK復(fù)合物結(jié)合，阻止細(xì)胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)化〔13〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為MEL-18對(duì)HOX基因有明顯的轉(zhuǎn)錄阻遏作用〔14〕。還有觀點(diǎn)認(rèn)為MEL-18可能對(duì)干細(xì)胞活性有一定抑制作用，進(jìn)而抑制干細(xì)胞的繁殖和分化，使腫瘤細(xì)胞的增生停滯，發(fā)揮抑制腫瘤的作用〔15〕。因此MEL-18可能是一個(gè)多向性抑癌作用，能通過(guò)不同通路發(fā)揮作用〔16〕。DESTRIN基因定位于20p12.1，是肌動(dòng)蛋白的結(jié)合蛋白，在一定條件下可以調(diào)節(jié)actin的解聚和重構(gòu)，引起腫瘤細(xì)胞遷移能力增加〔17,18〕。也有研究顯示DESTRIN可以引起上皮細(xì)胞的過(guò)度增殖和新生血管的形成〔19,20〕。VEGF是最常見(jiàn)的血管生成促進(jìn)因子，其引起血管新生的能力強(qiáng)，作用迅速。在腫瘤中，血管生成是其生長(zhǎng)中的一個(gè)重要事件，不僅可以直接引起腫瘤的生長(zhǎng)，還對(duì)脈管播散有重要作用。目前研究認(rèn)為VEGF的影響因素研究較多，也說(shuō)明VEGF在作用過(guò)程中不是單獨(dú)進(jìn)行調(diào)節(jié)的，而是形成的強(qiáng)大的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，血管生成在此調(diào)節(jié)過(guò)程中形成動(dòng)態(tài)平衡〔21,22〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示MEL-18、DESTRIN、VEGF三者異常表達(dá)均為促進(jìn)腫瘤發(fā)生的重要因素；三者表達(dá)失調(diào)是腫瘤快速生長(zhǎng)的重要因素；三者均為促進(jìn)腫瘤淋巴道遷移的重要因素；三者異常表達(dá)后引起細(xì)胞增殖失調(diào)，此時(shí)腫瘤惡性程度明顯升高，增殖活躍，細(xì)胞的異型性大，預(yù)后差。由于脈管內(nèi)癌栓、臨床分期和Ki67的表達(dá)均與患者的預(yù)后相關(guān)，因此聯(lián)合檢測(cè)MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達(dá)可能對(duì)判斷預(yù)后有一定幫助。三者以VEGF為中心，具有一定的協(xié)同作用。MEL-18、DESTRIN在調(diào)節(jié)腫瘤進(jìn)程的過(guò)程中對(duì)VEGF的表達(dá)有影響，因此MEL-18、DESTRIN可能是調(diào)節(jié)血管生成的重要因子。MEL-18對(duì)腫瘤的抑制作用與對(duì)VEGF的作用具有相似性，這使MEL-18的機(jī)制更復(fù)雜。DESTRIN在促進(jìn)腫瘤發(fā)生及遷移過(guò)程中引起血管生成，使腫瘤的體積增大更迅速，腫瘤的異型增生更強(qiáng)。DESTRIN和VEGF在作用過(guò)程中均可以促進(jìn)腫瘤的增殖，使腫瘤細(xì)胞活化，失控性增生明顯，細(xì)胞處于高繁殖期，腫瘤生長(zhǎng)快。

4參考文獻(xiàn)

1Piperdi B,Merla A,Perez-Soler R.Targeting angiogenesis in squamous non-small cell lung cancer〔J〕.Drugs,2014；74(4):403-13.

2Kim JW,Koh Y,Kim DW,etal.Clinical implications of VEGF,TGF-β1,and IL-1β in patients with advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Res Treat,2013;45(4):325-33.

3王尉,胡衛(wèi)列,呂軍,等.MEL-18在前列腺癌中的臨床意義〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2011;26(2):115-8.

4何汀,陳明,章宜芬,等.MEL-18在人膀胱尿路上皮腫瘤組織中的表達(dá)及意義〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)學(xué),2010;38(3):212-6.

5Desmarais V,Yamaguchi H,Oser M,etal.N-WASP and cortactin are involved in invadopodium-dependent chemotaxis to EGF in breast tumor cells〔J〕.Cell Motil Cytoskeleton,2009;66(6):303-16.

6Horita Y,Ohashi K,Mukai M,etal.Suppression of the invasive capacity of rat ascites hepatoma cells by knockdown of Slingshot or LIM kinase〔J〕.J Biol Chem,2008;283(10):6013-21.

7Fu L,Chen W,Guo W,etal.Berberine targets AP-2/hTERT,NF-κB/COX-2,HIF-1α/VEGF and cytochrome-c/caspase signaling to suppress human cancer cell growth〔J〕.PLoS One,2013;8(7):e69240.

8Tang XP,Li J,Yu LC,etal.Clinical significance of survivin and VEGF mRNA detection in the cell fraction of the peripheral blood in non-small cell lung cancer patients before and after surgery〔J〕.Lung Cancer,2013;81(2):273-9.

9Zhang L,Ge W,Hu K,etal.Endostar down-regulates HIF-1 and VEGF expression and enhances the radioresponse to humanlung adenocarcinoma cancer cells〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(1):89-95.

10Rohrer Bley C,Orlowski K,Furmanova P,etal.Regulation of VEGF-expression by patupilone and ionizing radiation in lung adenocarcinoma cells〔J〕.Lung Cancer,2011;73(3):294-301.

11張振偉,蔣仲敏.MEL-18 mRNA在食管鱗癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2012;50(2):78-81.

12陸有為,郭偉劍,李進(jìn).MEL-18 mRNA在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.中國(guó)癌癥雜志,2009;19(6):423-5.

13鄒艷芳,田永,徐峰.BMI-1和MEL-18基因在大腸癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.世界華人消化雜志,2013;21(5):397-402.

14田永,鄒艷芳,徐峰.大腸癌組織中MINA53和MEL-18蛋白的表達(dá)〔J〕.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013;48(6):780-2.

15Guo BH,Zhang X,Zhang HZ,etal.Low expression of Mel-18 predicts poor prognosis in patients with breast cancer〔J〕.Ann Oncol,2010;21(12):2361-9.

16Lee JY,Jang KS,Shin DH,etal.Mel-18 negatively regulates INK4a/ARF-independent cell cycle progression via Akt inactivation in breast cancer〔J〕.Cancer Res,2008;68(11):4201-9.

17蘇堅(jiān),顏鴻飛,周鈺娟,等.結(jié)腸癌中DESTRIN表達(dá)及臨床病理學(xué)意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2013;29(7):713-5.

18吳勇軍,唐儀,李爭(zhēng),等.DESTRIN在胃癌中表達(dá)的臨床病理意義〔J〕.中國(guó)醫(yī)學(xué)工程,2011;19(7):6-8.

19蘇堅(jiān),史玲,周鈺娟,等.DADS通過(guò)RAC1-ADF/COFILIN1通路抑制結(jié)腸癌SW480細(xì)胞遷移與侵襲〔J〕.中國(guó)腫瘤臨床,2013;40(14):815-8.

20Cursiefen C1,Ikeda S,Nishina PM,etal.Spontaneous corneal hem- and lymphangiogenesis in mice with destrin-mutation depend on VEGFR3 signaling〔J〕.Am J Pathol,2005;166(5):1367-77.

21Margaritescu C,Cernea D,Georgescu CC,etal.VEGF,CD105 and α-SMA immunoexpression study in lips squamous cell carcinomas and associated dysplastic lesions〔J〕.Rom J Morphol Embryol,2014;55(1):35-41.

22Cha N,Lv M,Zhao YJ,etal.Diagnostic utility of VEGF mRNA and SP1 mRNA expression in bronchial cells of patients with lung cancer〔J〕.Respirology,2014;19(4):544-8.

〔2013-09-08修回〕

(編輯苑云杰)